反相HPLC法研究影响水稻维生素C含量的关键基因

HPLC测定水稻叶中维生素C（Vc）含量的测定方法,测定后比较转基因水稻叶与普通水稻叶中Vc含量的差异,为寻找调控水稻中Vc含量的关键基因奠定基础。草酸水溶液提取水稻叶中的Vc后,反相HPLC方法测定含量,选用的色谱柱为Diamonsil C18柱（250×4.6 mm,5μm）,流动相为0.2%磷酸-甲醇,梯度洗脱,检测波长245nm,柱温30℃。测的线性范围为1～40μg/m L（r=0.9992）,平均回收率为98.51%,转基因水稻叶组含量为（0.356±0.009）和（0.444±0.008）mg/g,而普通组Vc含量为（0.554±0.013）mg/g,统计软件SPSS19.0分析表明二者有显著差异（P〈0.01）。此方法测水稻叶中Vc含量具有简便,快速,准确的特点;类受体蛋白激酶439即为影响水稻中Vc含量的关键基因。