芦荟大黄素脂质体逆转人肺腺癌细胞A549／DDP对顺铂多药耐药的作用研究

目的:研究芦荟大黄素脂质体(aloe emodin liposomes,AE-L)在体外对耐药人肺腺癌细胞系A549/ DDP对顺铂(DDP)的耐药性。方法:采用MTT检测方法得出AE-L的无毒细胞浓度、低毒细胞浓度以及空脂质体(empty liposomes,E-L)的无毒浓度;再以E-L无毒浓度做对照组,分别测出AE-L无毒细胞浓度组、低毒细胞浓度组耐药细胞逆转倍数;电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定各组细胞内顺铂浓度。结果:AE-L无细胞毒浓度组(2.0 mg·L^(-1))使A549/DDP细胞对DDP的IC_(50)由16.81 mg·L^(-1)降至5.86 mg·L^(-1);低细胞毒浓度(7.0 mg·L^(-1))组的IC_(50)降至4.34 mg·L^(-1);2组均明显提高DDP在A549/DDP细胞内的浓度。结论:AE-L能部分逆转A549/DDP细胞的多药耐药(MDR),其机制与增加细胞内药物浓度有关。

芦荟大黄素对人肺腺癌细胞顺铂多药耐药性的逆转作用

目的:以耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/DDP为研究对象,检测芦荟大黄素(aloe emodin,AE)能否逆转其对顺铂(DDP)的耐药性。方法:采用MTT法检测药物细胞毒性作用及耐药细胞逆转倍数,电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定细胞内顺铂浓度。结果:芦荟大黄素5mg·L-1能增加A549/DDP细胞对DDP的敏感性,使DDP的半数抑制质量浓度IC50由16.81mg·L-1降至5.86mg·L-1;能提高DDP在A549/DDP细胞内的浓度。结论:AE能部分逆转A549/DDP细胞的MDR,其机制与增加细胞内药物浓度有关。

C反应蛋白诱导外周血内皮祖细胞衰老及非诺贝特的保护作用

目的研究非诺贝特对C反应蛋白诱导的外周血内皮祖细胞衰老的影响及可能机制。方法随机将分离培养的内皮祖细胞分为4组:①对照组;②C反应蛋白各浓度组(1.0、2.5、5.0 mg/L);③C反应蛋白(5.0 mg/L)+非诺贝特(10.0μmol/L)组;④非诺贝特组(10.0μmol/L)。加入不同浓度的C反应蛋白干预,或预先加入非诺贝特作用4 h,再加入5 mg/L C反应蛋白,培养7天后行SA-β-半乳糖苷酶染色,检测细胞衰老并计数每组衰老细胞数。逆转录-聚合酶链反应检测人端粒酶逆转录酶mRNA表达。免疫印迹杂交法半定量测定内皮型一氧化氮合酶蛋白表达。结果 (1)不同浓度的C反应蛋白与内皮祖细胞培养后,C反应蛋白促进内皮祖细胞的衰老,且C反应蛋白对内皮祖细胞衰老的影响随着C反应蛋白浓度的增加而增加,5 mg/L C反应蛋白组对内皮祖细胞衰老的影响最显著(P<0.01)。加入10μmol/L非诺贝特后能减少C反应蛋白诱导的衰老细胞数量(P<0.01)。(2)C反应蛋白作用内皮祖细胞后人端粒酶逆转录酶mRNA表达随着C反应蛋白作用浓度的增加而下降,加入非诺贝特10μmol/L后可以明显逆转C反应蛋白诱导的人端粒酶逆转录酶mRNA表达下调(P<0.01)。(3)C反应蛋白抑制内皮型一氧化氮合酶蛋白表达,但在加入10μmol/L非诺贝特后能明显上调内皮型一氧化氮合酶蛋白表达(P<0.01)。结论 (1)C反应蛋白削弱内皮祖细胞的内皮型一氧化氮合酶表达,引起人端粒酶逆转录酶的逆转录下降,从而使端粒酶活性下降,最后加速内皮祖细胞的衰老,从而影响内皮祖细胞的功能。(2)非诺贝特活化人端粒酶逆转录酶,抑制C反应蛋白诱导的细胞衰老,可能与内皮型一氧化氮合酶表达上调有关,从而起到保护内皮祖细胞的作用。

痛风颗粒治疗痛风性关节炎的实验研究

目的观察痛风颗粒对急性发作期痛风性关节炎大鼠的治疗作用,初步探讨其作用机制。方法用痛风颗粒治疗尿酸钠诱导的急性痛风性关节炎模型大鼠,并设有空白对照组、模型对照组、西药对照组,观察治疗前后受试关节周径、关节腔组织和血浆中前列腺素E2(PGE2)含量、关节腔积液中白细胞数量的变化。结果用药后,模型大鼠受试关节周径明显缩小,肿胀率下降(P<0.05,P<0.01),关节周围组织和血浆PGE2含量及关节腔积液中白细胞数量下降(P<0.05,P<0.01)。结论痛风颗粒可以有效抑制急性痛风性关节炎模型大鼠关节肿胀。其作用机制可能是通过抑制白细胞向炎症局部的聚集和炎症递质PGE2的分泌。

妇科千金片对急性盆腔炎模型大鼠ICAM-1与MMP-2的影响

目的观察妇科千金片对急性盆腔炎模型大鼠子宫、卵巢、输卵管细胞间黏附分子1(ICAM-1)与基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响,探讨该药治疗盆腔炎的机制。方法将80只雌性Wistar大鼠随机分为8组,除空白组和假手术组外,其他各组建立急性盆腔炎模型,给药21 d后取子宫、输卵管、卵巢,免疫组织化学法观察ICAM-1与MMP-2表达情况。结果与空白组和假手术组比较,模型组大鼠子宫、卵巢、输卵管组织ICAM-1表达升高,MMP-2表达降低(P<0.05);与模型组比较,妇科千金片中、高剂量组和妇炎康组、罗红霉素组大鼠子宫、卵巢、输卵管组织ICAM-1表达下降,MMP-2表达升高(P<0.05);与罗红霉素组和妇炎康组比较,妇科千金片高剂量组大鼠子宫、卵巢、输卵管组织ICAM-1和MMP-2阳性细胞数差异无统计学意义。结论妇科千金片可能通过调节大鼠盆腔组织MMP-2和ICAM-1表达,降解细胞外基质,减轻盆腔组织炎症反应。

竹节参皂苷IVa甲酯对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖影响及机制研究

目的:探讨竹节参皂苷IVa甲酯(chikusetsu saponin iva methyl,CSIM)对血管紧张素II(angiotensin,Ang-II)刺激的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响及机制研究。方法:以大鼠血管平滑肌细胞为实验对象,建立Ang-II刺激的VSMCs增殖模型。MTT法检测CSIM对VSMCs的毒性;CCK-8法、Brd U法检测CSIM对VSMCs增殖的影响,划痕实验检测CSIM对VSMCs迁移力的影响,免疫蛋白印迹法检测PTEN、NF-κB蛋白表达水平。结果:3μmol/L的CSIM可显著抑制Ang-II诱导的VSMCs增殖(P<0.05)与迁移(P<0.05),并伴随着PTEN蛋白的明显上调(P<0.05)及NF-κB蛋白表达的显著性降低(P<0.05)。结论:CSIM抑制Ang-II诱导的VSMCs增殖与迁移,其机制可能与上调PTEN蛋白,降低NF-κB蛋白表达有关。

喉咽清口服液对大鼠急性咽炎及炎症因子影响的实验研究

目的观察传统工艺制备的喉咽清口服液（喉咽清1）与膜分离技术制备的喉咽清口服液（喉咽清2）对辣椒素诱导的急性咽炎模型大鼠的作用及其对炎症因子的影响,并初步探讨作用机制.方法50只雄性Wistar大鼠按体重分层随机分为空白组、模型组、双黄连组、喉咽清1组和喉咽清2组共5组.以在大鼠左侧咽喉部涂抹辣椒素法制备急性咽炎大鼠模型.造模3d后各动物均灌胃给药,每天1次,连续7d,于d7给药后40min取材、制备咽喉黏膜组织样本后处死动物.显微镜下观察黏膜组织病理形态,并进行黏膜炎症评分;ELISA法测定样本TNF-α、IL-1β和IL-6;Westernblot法检测样本MCP-1、Cox-2、NF-кB蛋白表达.结果喉咽清口服液明显降低模型大鼠咽喉黏膜组织中TNF-α、IL-1β和IL-6水平（P均〈0.05）,使NF-κB、COX-2和MCP-1的蛋白表达显著下降（P均〈0.05）,且与阳性药比较差异均无统计学意义.结论喉咽清口服液具有抗辣椒素所致大鼠急性咽炎的作用,其抗炎机制可能与抑制NF-κB、COX-2、MCP-1等相关细胞通路相关.

土鳖虫提取液对脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究土鳖虫对脑缺血缺氧的保护作用。方法:采用结扎双侧颈总动脉和迷走神经的方法后观察小鼠存活时间;采用化学法测量缺血再灌注小鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合成酶(NOS)活性,一氧化氮(NO)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量。结果:土鳖虫水提取液能明显延长小鼠耐缺氧时间;增强脑组织中SOD的活性,降低NOS活性,增加GSH含量和降低NO、MDA的含量。结论:土鳖虫提取液对脑缺血再灌注小鼠具有一定的保护作用。

异钩藤碱逆转人肺腺癌细胞A549/DDP对顺铂耐药性

目的研究异钩藤碱(IR)在体外对耐药人肺腺癌细胞系A549/DDP对顺铂(DDP)的耐药性。方法采用MTT法检测药物细胞毒性作用及耐药细胞逆转倍数,电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定细胞内顺铂浓度。结果IR无细胞毒浓度组(3.0μg·mL-1)使A549/DDP细胞对DDP的IC50由16.81mg·L-1降至3.36mg·L-1;低细胞毒浓度(8.0μg·mL-1)组的IC50降至2.34mg·L-1;2组均明显提高DDP在A549/DDP细胞内的浓度。结论研究表明IR能部分逆转A549/DDP细胞的MDR,并可增加肿瘤细胞内DDP药物浓度。

依泽替米贝通过小凹蛋白1调节大鼠血管平滑肌细胞内脂质蓄积

目的:观察依泽替米贝(ezeti mibe)对大鼠血管平滑肌细胞内胆固醇蓄积的影响以及相关的作用机制。方法:以原代培养大鼠血管平滑肌细胞(rat VSMCs)为研究对象,以20 mg/L胆固醇:甲基β环糊精复合物(Chol:MβCD)孵育细胞48 h形成荷脂细胞模型。不同浓度的依泽替米贝(3、10、30μmol/L)处理细胞24 h,或以30μmol/L依泽替米贝分别处理细胞不同时间(0、6、12、24、48 h),HPLC检测细胞内TC、游离胆固醇(FC)的含量,Western blotting检测小凹蛋白1(caveolin-1)蛋白的表达。结果:不同浓度依泽替米贝(3、10、30μmol/L)作用于VSMCs源性荷脂细胞不同时间,细胞内TC、FC的含量呈浓度依赖性减少,以30μmol/L浓度孵育24 h作用最强。Chol:MβCD明显减少细胞caveolin-1蛋白表达水平,依泽替米贝能够逆转这种作用。结论:依泽替米贝抑制Chol:MβCD诱导的大鼠平滑肌细胞中胆固醇蓄积作用可能与caveolin-1有关。

依泽替米贝抑制大鼠血管平滑肌细胞荷脂

目的观察依泽替米贝(ezetimibe)对大鼠血管平滑肌细胞内胆固醇蓄积的影响以及相关的作用机制。方法以原代培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)为研究对象,以20 mg/L Chol:MβCD孵育细胞48 h形成荷脂细胞模型。不同浓度的依泽替米贝(3μmol/L、10μmol/L和30μmol/L)处理细胞24 h,或以30μmol/L依泽替米贝分别处理细胞不同时间(0 h、6 h、12 h、24 h和48 h),高效液相色谱法(HPLC)检测细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)的含量,Western Blotting检测小凹蛋白1蛋白的表达。结果不同浓度依泽替米贝(3μmol/L、10μmol/L、30μmol/L)作用于VSMC源性荷脂细胞不同时间,细胞内TC、FC的含量呈浓度依赖性减少,以30μmol/L依泽替米贝孵育24 h作用最强。Chol:MβCD明显减少细胞小凹蛋白1蛋白表达水平,依泽替米贝能够逆转这种作用。结论依泽替米贝抑制Chol:MβCD诱导的大鼠平滑肌细胞中胆固醇蓄积作用可能与小凹蛋白1有关。