饲料质量与健康养殖科研工作设想

作者从饲料、畜产品质量安全检测科研工作者的视角提出要加强饲料营养基础研究,提高饲料产品质量;进行饲料原料质量检测与鉴别研究,从源头确保饲料产品的质量安全;开展健康养殖试验,提高畜禽水产品质量安全的科研工作设想。这3方面的科研工作相互关联,需要有机结合在一起才能达到最佳效果。

饲料、养殖、畜产品质量安全的思考

0引言众所周知,提高饲料质量和发展健康养殖是提高畜产品质量安全的必由之路。科学配制和使用人工配合饲料不仅是提高饲料营养物质的均衡性与全面性、提高饲料的利用率和养殖生产效率及养殖产量的基本保证,同时还是保证市场的畜产品供应、提高人们生活水平与质量的重要举措。没有工业化的饲料生产就没有现代化的养殖业,也没有人们生活水平的日益改善与提高。目前饲料产品的质量仍然有待进一步提高,但这不是养殖中存在问题的全部,养殖模式、养殖管理与养殖品种也各有其责。

湖南部分地区乳源金黄色葡萄球菌耐药性及溶血性分析

为调查湖南省部分地区奶牛场生鲜乳源金黄色葡萄球菌的耐药性及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的检出情况,同时调查金黄色葡萄球菌溶血素基因型与溶血表型的分布情况及二者的关系。采用肉汤稀释法对分离自湖南省部分地区奶牛场生鲜乳的54株金黄色葡萄球菌进行18种常见抗菌药物耐药性检测,采用绵羊血琼脂平板检测细菌溶血性,并采用PCR方法扩增分离菌株mecA基因及5个溶血素基因。结果显示,54株金黄色葡萄球菌均表现不同程度的耐药,耐药谱型达21种;21株金黄色葡萄球菌表现为多重耐药,最高耐药重数为9重;对青霉素耐药最严重,耐药率达85.19%,对头孢西丁、苯唑西林、克林霉素、庆大霉素及大环内酯类药物(红霉素、替米考星)耐药率在20%~30%之间,对多西环素与万古霉素敏感;从24株分离菌中检出mecA基因,鉴定为MRSA。54株分离株在羊血琼脂平板上主要以β和γ溶血为主,α、β及γ溶血率分别为12.9%、44.4%和42.6%;各溶血素基因检出率分别为98.1%(hla)、94.4%(hlb)、96.3%(hld)、40.7%(hlg1)和98.1%(hlg2),所有菌株均能检测到3种及以上的溶血素基因。结果表明,湖南省部分地区生鲜乳源金黄色葡萄球菌耐药情况较为严重,存在部分比例的MRSA,且金黄色葡萄球菌溶血素基因型与溶血表型之间无明显对应关系。

试论饲料及畜产品安全监察体系建设

饲料及畜产品质量安全监察体系,是保证食品安全的前提条件之一。近年来所发生的"瘦肉精"、三聚氰胺事件,都与饲料及畜产品的质量有关。这也充分说明了该体系的重要性。经过多年的建设,我国已建立了国家、省、市(县级)三级饲料及畜产品质量安全监察体系。但还存在机构不健全、人员不足、设备不配套、经费紧张、职责不明等诸多问题。为保证食品安全,保障人民的身心健康,应从机构、人员、设备、投资方式、职责等方面入手,建立一个机构健全、职责明确、功能齐全、保障有力的饲料及畜产品质量安全监察体系。

高效液相色谱法测定饲料中环丙氨嗪的含量

本实验建立饲料中环丙氨嗪含量的分析方法。试样采用1%三氯乙酸/乙腈(20:80)溶液提取,经MCX固相萃取柱净化,采用磷酸缓冲盐+甲醇+乙腈(93:5:2)为流动相洗脱,C_(18)色谱柱(4.6×250 mm,5μm)分离,在检测波长214 nm下进行测定,外标法定量。在浓度0.2-50.0 mg/L范围内线性关系良好(R≥0.999),在0.5μg/kg、5μg/kg和50μg/kg添加水平下,平均回收率为75.3%-97.9%,相对标准偏差均少于10%,方法定量限0.5 mg/kg。该方法灵敏、简单、重复性好,适用于饲料中环丙氨嗪的测定。

UHPLC-MS/MS法测定耕地周围地表水中5种除草剂含量

实验研究建立了超高压液相色谱-三重四级杆串联质谱法测定耕地周围地表水中2,4-二氯苯氧乙酸、灭草松、草铵膦、α-萘乙酸、马来酰肼除草剂含量的分析方法。随机采集耕地周围地表水样品,预处理后,取上述水样500 mL,调节酸度为中性,取HLB固相萃取柱,活化完毕后,设定程序,将上述水样以12 mL·min^(-1)的流量过柱,最后用16 mL甲醇洗脱,收集洗脱液;洗脱液于氮吹至近干,加甲醇1 mL定容,涡旋混匀,质谱分析采用多反应监测模式,定性、定量检测。2,4-二氯苯氧乙酸、灭草松、草铵膦、α-萘乙酸、马来酰肼质量浓度在0.004~4.0μg·mL^(-1)范围内呈良好的线性关系,检测限分别为0.21μg·L^(-1)、0.23μg·L^(-1)、0.14μg·L^(-1)、0.25μg·L^(-1)、0.15μg·L^(-1);三水平回收率范围在85.4%~96.6%;2,4-二氯苯氧乙酸、灭草松、草铵膦、α-萘乙酸、马来酰肼重复性RSD分别为3.4%,4.0%,3.2%,2.9%,3.6%,方法重复性良好。实验结果表明,此方法具有快速、准确等特点,方法可以用于耕地周围地表水中2,4-二氯苯氧乙酸、灭草松、草铵膦、α-萘乙酸、马来酰肼等除草剂的监测。

湖南黑猪种质特性及开发利用

湖南黑猪是以杜洛克猪为父本、湖南优良地方品种桃源黑猪为母本，通过杂交合成和继代选育，历经10年培育的瘦肉型母系猪。该项研究于1998年获湖南省科技进步一等奖；1999年经湖南省畜禽品种审定委员会审定，命名为“湖南黑猪”；2001年在湖南娄底市建立湖南黑猪开发与保护中心，开展湖南黑猪持续选育与推广研究工作；2004年获湖南省《畜禽新品种（配套系）证书》。

湖南地区猪源和鸡源沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析

为了了解湖南地区沙门氏菌的耐药表现和基因分布情况,采集了永州、怀化、长沙等地生猪养殖场、屠宰场的猪肛门拭子样本和鸡盲肠样本进行沙门氏菌分离鉴定,并对分离的沙门氏菌进行16种常见兽用抗生素耐药性检测和血清型分析以及β-内酰胺类耐药基因型分析。结果表明:从300份猪肛门拭子样本和170份鸡盲肠样本中总计分离到沙门氏菌69株,血清凝集试验显示其中鼠伤寒沙门氏菌为优势血清型,69株中的48株为鼠伤寒沙门氏菌;猪源和鸡源沙门氏菌都对四环素、氨苄西林、磺胺异恶唑具有很强的耐药性,耐药率在62%以上,其次为阿莫西林/克拉维酸、氟苯尼考,耐药率在40%左右,未有菌株对乙酰甲喹、安普霉素耐药;多重耐药性结果显示每株菌至少对1种抗生素耐药,最高出现了13重耐药菌株,尚未发现对16种抗生素全部耐药的菌株;β-内酰胺类抗生素常见耐药基因检测结果显示,耐药基因检出率普遍不高,其中BlaCTX-M检出率相对较高,为14.49%(10/69)。这表明湖南省部分地区健康来源动物样品中沙门氏菌检出率相对较高,并有一定的多重耐药情况存在,应保持监测。

基于氨基酸数据的真蛋白模型研究

本研究以大量饲料样品的氨基酸分析仪实测数据与其近红外光谱数据的相关性定标,建立了测定饲料中氨基酸含量的近红外法。根据饲料中氨基酸含量与真蛋白含量的相关性建立了基于氨基酸数据的真蛋白模型。从而实现了对饲料进行几分钟的近红外扫描就能得到其氨基酸和真蛋白含量的信息。该方法测得的氨基酸含量和模型测算的真蛋白含量结果准确,适用于对饲料及饲料原料营养价值的快速评价。

饲料中的呕吐毒素及其危害

呕吐毒素广泛存在于饲料及饲料原料中,对各种动物有着不同程度的毒害作用。本文主要对呕吐毒素的污染情况、毒性作用、国内外限量情况进行了阐述,为呕吐毒素进一步研究提供理论基础。

高效液相色谱法测定饲料中氟喹诺酮类药物

实验建立了饲料中氟喹诺酮的高效液相色谱测定方法。饲料中的氟喹诺酮用2%氨水水溶液提取,混合型阴离子固相萃取柱净化,磷酸缓冲液+乙睛=17+83作为流动相,C18色谱柱,荧光检测器检测,激发波长280 nm,发射波长450 nm。该方法的定量限为1 mg/kg。本法操作简单,结果准确,可用于饲料中氟喹诺酮的测定。

高效液相色谱法测定饲料中雌二醇、炔雌醇和己烯雌酚的含量

建立饲料中雌二醇、炔雌醇和己烯雌酚含量测定的高效液相色谱法。采用常用的C18色谱柱(250.0 mm×4.6 mm,5.00μm),以乙腈+水(50+50)为流动相,检测波长205 nm,流速1.0 m L/min,用外标法定量。高效液相色谱方法最低检测限为5.0 mg/kg,0.5~50.0 mg/L质量浓度范围内线性关系良好(r≥0.999),平均回收率超过75.0%,变异系数低于10.0%,可用于饲料中雌二醇、炔雌醇和己烯雌酚含量的测定。

湖南省奶牛源金黄色葡萄球菌分离鉴定与耐药性分析

为了掌握湖南省内奶牛源金黄色葡萄球菌的耐药情况,指导临床合理用药,抽取牛乳样品,通过对细菌的分离培养和纯化,采用基质辅助激光电离飞行时间质谱仪和全自动生化鉴定仪进行鉴定,并对分离菌株进行18种抗菌药物耐药性检测,结合耐药表型和mecA基因检测判定MRSA菌株。结果显示,2020-2021年从湖南地区257份牛乳样品中分离出金黄色葡萄球菌39株,89.74%的临床分离菌株表现为不同程度耐药,其中对青霉素耐药最为严重,耐药率达82.05%;对红霉素、克林霉素、替米考星、庆大霉素、头孢西丁耐药率在20%~35%之间;对多西环素及万古霉素绝对敏感,耐药率为0。38.46%分离菌株表现为多重耐药,以7重耐药最多。鉴定出19株MRSA,其中包含15株OS-MRSA和4株OR-MRSA。本研究可为湖南省内奶牛企业制定合理用药措施提供依据。

饲料中巴氯芬的测定——高效液相色谱法

试验建立了饲料中巴氯芬的高效液相色谱测定方法。饲料中的巴氯芬用偏磷酸溶液提取．混合型阳离子固相萃取柱净化，氨化甲醇溶液洗脱，0．1％磷酸水溶液：乙腈（89：11）作为流动相，C18色谱柱进行分离，检测波长为220nm。结果表明，在0．05-5．0μg／mL浓度范围内线性关系良好，r=0．999。该方法的检测限为0．5mg／kg。本法操作简单，结果准确，可用于饲料中巴氯芬的测定。

高效液相色谱紫外检测法测定饲料中N-氨甲酰谷氨酸的含量

本实验建立了高效液相色谱紫外检测法测定饲料中N-氨甲酰谷氨酸含量的方法 。配合饲料样品用水提取后经混合型阴离子固相萃取柱净化富集。以甲醇-0.05%磷酸水溶液（V/V,5∶95）为流动相,C18色谱柱分离,检测波长215 nm。结果表明,在1.5~500μg/m L浓度范围线性关系良好,R2=1,样品回收率为88.6%~101.2%,相对标准偏差为0.69%~2.31%（n=5）,定量限为0.075 mg/g。可见本方法适用于饲料中N-氨甲酰谷氨酸的含量测定。

饲料中硝呋烯腙的测定——高效液相色谱法

试验建立了饲料中硝呋烯腙的高效液相色谱测定方法。饲料中的硝呋烯腙用二甲基亚砜-乙腈溶液提取,混合型阳离子固相萃取柱净化,庚烷磺酸钠、柠檬酸缓冲液＋乙腈=55＋45作为流动相,C18色谱柱,检测波长382 nm。结果表明,在0.05~50μg/ml浓度范围内线性关系良好,r=0.999 9。该方法的定量限为0.05 mg/kg。本法操作简单,结果准确,可用于饲料中硝呋烯腙的测定。

高效液相色谱法测定饲料中癸氧喹酯的含量

本实验建立了高效液相色谱法（HPLC）测定饲料中癸氧喹酯含量的方法。该方法采用C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，粒径5μm），以0.025 mol/L氯化钙溶液＋甲醇（15∶85，V/V）为流动相，激发波长为326 nm，发射波长为384 nm，流速为1.0 mL/min，外标法定量。结果表明，该方法最低检测限为0.5 mg/kg，癸氧喹酯的浓度为0.02～2.0 mg/L时，峰面积与浓度线性关系良好（r=0.99994），平均回收率在80%以上，变异系数小于10%，稳定性、重现性好，可用于饲料中癸氧喹酯的含量测定。

饲料中阿散酸和洛克沙胂测定方法的研究

通过检测条件:提取液、净化、流动相组成、PH值优化,对饲料中阿散酸、洛克沙胂进行高效液相色谱测定,其检测限:阿散酸为2.0mg/kg,洛克沙胂为8.0mg/kg;检测回收率达81.9-99.2%,组内、组间变异系数为2.1-8.5%,符合分析要求。

饲料中洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星的测定——高效液相色谱法

试验建立了饲料中洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星的高效液相色谱测定方法。饲料中的洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星用乙腈-磷酸盐缓冲液(p H7.0)提取,混合型阳离子固相萃取柱净化,氨化甲醇溶液洗脱,0.025mol/L磷酸溶液(三乙胺调p H至3.0)﹕甲醇﹕乙腈(82﹕7﹕11)作为流动相,C18色谱柱进行分离,检测波长为287nm。结果表明,在0.5~50.0μg/m L浓度范围内线性关系良好,r=0.999。该方法的检测限为1.0mg/kg,定量限为5.0mg/kg。本法操作简单,结果准确,可用于饲料中洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星的测定。