中国城乡不同泌乳阶段母乳维生素A和维生素E含量研究

目的描述我国不同泌乳阶段和城乡母乳维生素A(VA)和维生素E(VE)的含量。方法在全国11个省、市、自治区20个县(区)招募产后6481对健康母婴并采集母乳样本。按调查点和泌乳期分层随机抽取约15%样本共获得924份母乳,采用HPLC法分析VA(视黄醇)和VE(α-生育酚)含量。结果初乳(n=179)、过渡乳(n=170)、早期成熟乳(n=419)及晚期成熟乳(n=156)四个泌乳阶段中,全国母乳VA的P_(50)含量(mg/L)分别为0.61,0.47,0.25和0.19,不同泌乳阶段的差异具有统计学意义(P<0.05)。其中,城市分别为0.68,0.49,0.29和0.23,农村0.57,0.46,0.22和0.18,城乡除成熟乳早期和晚期之间含量差异不显著外,其它阶段两两比较均P<0.05。城乡比较,仅有早期成熟乳城市VA显著高于农村(P<0.01)。全国母乳VE的P_(50)含量(mg/L)分别为6.47,3.66,2.36和2.58;其中,城市分别为6.75,3.60,2.19和2.57,农村6.00,3.99,2.45和2.60,除成熟乳早期和晚期之间含量差异不显著外,其它阶段两两差异均P<0.05。仅有过渡乳VE农村显著高于城市(P<0.05)。结论中国母乳VA和VE含量初乳最高,VA随着泌乳期延长而逐渐降低,VE在成熟乳阶段保持相对稳定。

LC-MS/MS测定人血浆中厄贝沙坦和氢氯噻嗪的含量及其应用

目的建立可同时测定人血浆中厄贝沙坦(irbesartan,IBST)和氢氯噻嗪(hydrochlorothiazide,HCZ)浓度的LC-MS/MS测定方法,并用于厄贝沙坦氢氯噻嗪(IBST/HCZ)片人体生物等效性研究。方法血浆样品经过蛋白沉淀法处理后上样,采用IBST-d4和甲氯噻嗪(chlorothiazide,MCTZ)作为内标。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC®XTERRA RP18(4.6 mm×100 mm,3.5μm),流动相A和B分别为乙腈和5 mmol·L^-1乙酸铵-水,进行梯度洗脱,流速为0.85 mL·min^-1。在电喷雾电离源负离子模式下检测离子对为m/z 427.1→193.1(IBST),m/z 431.2→193.1(IBST-d4),m/z 295.9→268.9(HCZ)和m/z 357.8→322.0(MCTZ)。对健康受试者口服相同剂量的IBST/HCZ片(150 mg/12.5 mg)受试制剂或参比制剂后的血药浓度进行定量分析。结果血浆中内源性物质不干扰待测物定量,IBST、HCZ、IBST-d4、MCTZ之间不存在相互干扰和相互转化。人血浆中IBST和HCZ的定量范围分别为10~4000 ng·mL^-1和1~400 ng·mL^-1,线性关系良好。IBST与内标提取回收率均在95.7%~105.4%,HCZ与内标提取回收率均在95.0%~106.4%;IBST和HCZ的内标归一化基质因子分别为101.2%~102.6%和79.8%~93.6%,变异系数(coefficient of variation,CV)均<5%;批内、批间准确度偏差均<15%,CV均<10%。用本法测定得到的IBST和HCZ的浓度水平及获取的药动学参数与文献报道一致,试验样品再分析复测值与原测值的偏差均<10%。结论本法方便快速、特异性强、灵敏、准确、重复性好、所需样本体积少,充分满足IBST/HCZ片人体生物等效性研究的高通量定量分析需求。

白术生、制品的DCBI-MS鉴别

目的:建立白术生、制品的解吸附电晕束离子化质谱(DCBI-MS)(秒级)快速鉴别方法。方法:采用原位跟踪技术跟踪苍术酮的转化,初步探讨白术的最佳炮制温度;采用DCBI-MS法对白术生、制品的化学成分进行分析。结果 :白术最佳的炮制温度为120~140℃。60批样品中包括对照药材1批,生药材27批,土炒白术19批,麸炒白术13批;与生品相比较,加热炮制品中苍术酮的含量均有不同程度的降低,白术内酯Ⅱ(atractylenolideⅡ)和白术内酯Ⅲ(atractylenolideⅢ)的相对响应丰度值有显著增高;生白术的相似度为0.90~0.95,土炒白术的相似度为0.83~0.90,而麸炒白术的相似度为0.71~0.82,且可直观地将白术生品、土炒白术和麸炒白术分为三类。结论:DCBI-MS法可有效跟踪炮制过程中苍术酮向白术内酯(atractylenolide)Ⅰ~Ⅲ转化的情况,获得其最佳炮制参数,并可有效辨别白术生、制品,可作为炮制条件优化的快速检测工具,为中药材的质量控制提供参考。

LC-MS/MS测定人血浆中依折麦布和总依折麦布的含量及其应用

目的建立人血浆中依折麦布(ezetimibe,EZE)和总依折麦布(total ezetimibe,EZE-T)的LC-MS/MS测定方法,并用于依折麦布片人体生物等效性(bioequivalency,BE)研究。方法分别采用直接沉淀法和酶解后沉淀法处理血浆样品。内标为依折麦布-d4(EZE-d4),色谱柱为Waters ACQUITY UPLC®BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相为0.1%乙酸-乙腈(A),0.1%乙酸-水(B),梯度洗脱,流速0.2 mL·min-1。在ESI源负离子模式下使用离子对m/z 408.2→271.0(EZE)和m/z 412.2→271.1(EZE-d4)进行MRM定量分析。对口服相同剂量受试制剂或参比制剂依折麦布片的健康受试者的血药浓度进行定量分析。结果血浆中内源性物质不干扰待测物定量,EZE、EZE-T及EZE-d4不存在相互干扰和/或相互转化。人血浆中EZE和EZE-T的线性范围分别为0.1~20,1~200 ng·mL-1,线性关系良好。待测物与内标提取回收率均为102.4%~109.8%;内标归一化基质效应因子均为98.5%~99.4%,变异系数(CV)均<5%;批内、批间准确度偏差均<15%,CV均<10%。用本法测定得到的EZE和EZE-T的浓度水平及获取的药动参数与文献报道一致,生物样品再分析复测值与原测值的偏差均<10%。结论本法特异性强、灵敏、准确,重复性好,所需样本体积少,满足依折麦布片人体BE研究的定量分析需求。