从《医学免疫学》整体教育入手培养医学生的科学素质

《医学免疫学》是一门重要的医学基础课程,其内容抽象难懂,在该课程教学的过程中贯彻整体教育的理念和模式,不仅可以帮助学生理解、掌握和使用免疫学的相关知识、理论、技术,更重要的是,通过整体观的贯彻,可以培养医学生的科学素质,使之在今后的学习和工作中具有科学的方法论。

急性阑尾炎患者白细胞分类计数诊断价值及验证

目的通过对721例确诊为急性阑尾炎患者术前白细胞分类计数的回顾性研究,分析白细胞分类计数能否提示该疾病严重程度,寻找阑尾炎穿孔的最佳血常规指标。方法回顾性分析长沙市某大型三甲医院2010年1月~2013年6月普外科行阑尾切除患者共721例,分析白细胞分类计数与急性阑尾炎严重程度的相关性,利用ROC曲线评估白细胞分类计数指标对阑尾炎穿孔的诊断价值,找到最适指标截断值。另设置验证组467例,用以评价截断值的诊断能力。结果随急性阑尾炎严重程度变化幅度最大的是淋巴细胞百分比,提示阑尾炎穿孔的白细胞分类最佳指标是淋巴细胞绝对值,其小于1.83提示可能存在穿孔,灵敏度较高,具有一定的临床参考价值。结论淋巴细胞降低对辅助判断急性阑尾炎严重程度具有重要意义。

程序性细胞死亡蛋白4调控K562细胞活力和凋亡的研究

目的:探讨程序性细胞死亡蛋白4(programmed cell death protein 4,PDCD4)对人类慢性粒细胞白血病细胞系K562细胞活力、凋亡以及基因表达变化的影响。方法:通过慢病毒感染的方法在K562细胞系中过表达PDCD4基因并筛选获得稳定表达的细胞系;采用RT-qPCR和Western blot分别检测PDCD4 mRNA和蛋白的表达水平;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况;应用转录组测序(RNA sequencing,RNA-seq)分析PDCD4过表达组和对照组的基因表达差异及其相关的功能与信号通路,RT-qPCR验证测序结果的准确性。结果:成功建立了稳定过表达PDCD4的K562细胞系;PDCD4过表达可显著抑制K562细胞的活力,引起细胞周期阻滞并促进阿糖胞苷诱导的细胞凋亡(P<0.05);RNA-seq结果显示,在K562细胞中过表达PDCD4可引起大量的基因表达发生变化,表达明显差异的基因共有394个,其中上调16个,下调378个,主要涉及细胞周期、凋亡、细胞自噬和代谢等方面,选取的6个基因的RT-qPCR检测结果和RNA-seq的结果一致。结论:PDCD4可抑制K562细胞活力、阻滞细胞周期进展、促进细胞凋亡;RNA-seq确定了PDCD4对K562细胞基因表达谱的变化。

短程免疫法制备高效价抗血清研究

目的:探索快速制备免疫血清的方法和效果。方法:采用短程免疫法,分别以伤寒沙门菌O抗原和卵黄抗原分组小剂量连续多次免疫家兔后,收集抗血清,用ELISA间接法测定抗体效价。结果:ELISA结果显示伤寒沙门菌O抗原和卵黄抗原抗血清最终分别达到1∶20 480和1∶10 240的高效价。结论:短程免疫法所制备抗血清效价高,亲和力强。

儿童急性淋巴细胞白血病beclin-1的表达及意义

目的:探讨自噬基因beclin-1在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)患者外周血白细胞的表达及意义。方法:选取儿童急性淋巴细胞白血病患者39例,体检正常儿童40例作为对照,收集患者及正常对照外周血标本,分离白细胞,用免疫组化和免疫印迹法检测beclin-1表达,分析比较患者与对照组beclin-1蛋白表达差异。结果:ALL患儿外周血白细胞beclin-1表达阳性率48.7%(19/39),低于正常对照组82.5%(33/40)(P<0.005),Western blot显示患儿阳性标本表达量亦低于对照阳性标本。标危组表达率(59.3%)高于高危组(25.0%),B-ALL与T-ALL的beclin-1表达率差异无显著性(P<0.05)。结论:beclin-1表达率及表达量在ALL患儿外周血白细胞中明显低于正常对照;beclin-1表达率与诊断时免疫学分型无明显关系,标危组表达率高于高危组。beclin-1可能与儿童ALL发生发展相关。

MCP-1基因多态性与卵巢上皮癌易感性的关系研究

目的 通过对单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）基因A-2518G单核苷酸多态性的检测,探讨中国湖南地区汉族人群中MCP-1基因多态性与卵巢上皮癌易感性的关系.方法 采用病例-对照研究方法,选择临床确诊的130例标本,其中包括卵巢上皮癌组织92例,为病例组;正常卵巢组织38例,为对照组.应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）检测卵巢上皮组织中的MCP-1基因A-2518G单核苷酸多态性.结果 在病例组和对照组中MCP-1基因A-2518G单核苷酸多态性均存在AA、AG和GG三种基因型.与对照组相比,病例组中AA（17.40％ vs 15.79％）、AG（44.56％ vs 52.63％）和GG（38.04％ vs 31.58％）基因型频率分布差异均无统计学意义（P＞0.05）.对多个相关因素进行Logistic回归分析显示,尚不能认为MCP-1基因A-2518G单核苷酸多态性与卵巢上皮癌的发病有相关性（P＞0.05）.结论 在中国湖南地区汉族人群中,尚不能认为MCP-1基因A-2518G单核苷酸多态性与卵巢上皮癌的发病有关.