肝纤维化发病机制的研究进展

肝纤维化是对慢性肝损伤的一种修复反应,肝纤维化的特征改变是肝脏内细胞外基质(extrace llular matrix,ECM)的过度沉积。肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)的活化被认为是这一过程中的关键事件。在纤维形成过程中,促纤维形成细胞、细胞因子、生长因子、酶及其抑制因子发挥了十分重要的作用。

血水草生物碱杀螺、灭蚴作用的研究

目的研究血水草生物碱(ECA)杀灭钉螺及日本血吸虫尾蚴的作用。方法观察实验室及现场浸泡杀螺效果;钉螺接触药物上爬情况;浸泡杀螺卵效果;浸杀尾蚴防护血吸虫感染的作用。结果浸泡72h钉螺死亡率100％的血水草生物碱溶液的浓度及温度分别为:1.25mg/L,30℃;2.5 mg/L、5 mg/L、10 mg/L均为25℃。水温 26℃～28℃现场灭螺10mg/L,72h钉螺死亡率84％;20 mg/L,72h死亡率达92％。5mg/L溶液螺卵浸泡72h孵出率为0％～10％。5mg/L ECA溶液明显抑制钉螺上爬,20mg/L时钉螺静止不动。结论血水草有杀灭钉螺、螺卵及日本血吸虫尾蚴的作用,是一种有研究前景的植物杀螺、灭蚴剂。

噬菌体肽库筛选转化生长因子βⅡ型受体亲和肽

目的:从噬菌体随机肽库中筛选转化生长因子β(TGF-β)Ⅱ型受体的亲和短肽。方法:以重组可溶性人TGF-βⅡ型受体作为靶标,应用噬菌体随机十二肽库进行筛选,经过3轮淘选,提取阳性噬菌体克隆ssDNA,测序并进行序列分析。结果:通过筛选噬菌体获得富集,挑选10个能与人TGF-βⅡ型受体特异性结合的噬菌体克隆,测序得到4个核酸序列,未发现共有保守序列。结论:通过噬菌体肽库技术能筛选出与TGF-βⅡ型受体结合的噬菌体展示肽,为进一步研究TGF-βⅡ型受体亲和短肽及在抗肝纤维化中的作用提供依据。

干细胞因子基因cDNA克隆及其在造血干细胞中的表达

目的:克隆人干细胞因子基因cDNA,构建真核表达载体并转导脐带血造血干细胞,观察干细胞因子在造血干细胞中的表达,从而为脐血造血干细胞扩增及移植奠定实验基础。方法:实验于2005-09/12在承德医学院基础医学研究所和湖南师范大学医学院寄生虫病研究室完成。①实验材料:健康胎儿脐带由承德医学院附属医院提供,产妇均签署知情同意书;pcDNA3.1.大肠杆菌E.coliDH5α由本室保存;pUCm-T vector (promega公司);BamHⅠ,XbaⅠ(New England BioLabs公司):②实验方法:无菌收集胎儿脐带,胶原酶+胰蛋白酶+乙二胺四乙酸联合消化,分离培养人脐带内皮细胞。从上述含脐带内皮细胞的培养液中分离提取干细胞因子mRNA,用反转录-聚合酶链反应扩增干细胞因子cDNA.纯化的PCR产物与载体pUCm-T加入连接反应体系,构建及克隆pUCm-T/SCF质粒,其与pcDNA3.1分别进行BamHⅠ、XbaⅠ双酶切反应,产物经琼脂糖凝胶电泳后回收干细胞因子cDNA和pcDNA3.1片段,构建真核表达型载体pcDNA3.1/SCF。以密度梯度法+免疫磁珠法分离收集人脐血CD34^+造血干细胞.导入pcDNA3.1/SCF,设立未转导对照组。③实验评估:转导后1～7 d检测两组细胞上清液中干细胞因子水平的表达。结果:①人于细胞因子基因cDNA克隆:扩增的人干细胞因子基因cDNA理论上应为690 bp,实际PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后,紫外线下可见-预期大小的条带,证明干细胞因子mRNA提取成功,反转录合成的cDNA完整。②分泌型真核表达质粒pcDNA3.1/SCF的构建:BamHⅠ和XbaⅠ双酶切后电泳可见690 bp的插入片段,与干细胞因子基因序列相同,表明分泌型真核表达质粒pcDNA3.1/SCF构建成功。③脐血造血干细胞培养上清中的干细胞因子水平:培养第1～7天.转导pcDNA3.1/SCF的脐血造血干细胞上清中的干细胞因子表达水平均明显高于未转导对照组(P<0.01)。结论:成功克隆人干细胞因子基因cDNA,并构建了重组质粒pcDNA3.1/SCF,该质粒转导脐血造血干细胞后.能在短期内有效表达。

芹菜素对血吸虫病小鼠肝纤维化的影响

目的探讨浓度梯度的芹菜素(AP)对血吸虫病肝纤维化的影响。方法建立血吸虫病肝纤维化小鼠动物模型,随机分为6组:正常对照组、吡喹酮组、γ干扰素组、芹菜素低、中、高剂量组。测定小鼠的肝脏或者血液的羟脯氨酸(Hyp)、透明质酸(HA)、血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和层粘连蛋白(Ln)含量,间接反映芹菜素对血吸虫病肝纤维化的影响;应用HE染色、免疫组化法及多媒体病理图文定量分析,观察各实验组小鼠肝脏的病理改变及TGF-β1和PDGF-BB表达变化。结果 Hyp、HA、PCⅢ和LN含量第4 w到第8 w呈降低趋势,且中剂量芹菜素的各项指标最接近空白组,抑制血吸虫病肝纤维化作用最明显。芹菜素剂量水平,未见量效增强关系。HE染色液显示中剂量芹菜素组肝脏变性坏死减轻最为明显,小叶结构最完整。中剂量芹菜素组TGF-β1和PDGF-BB含量与对照组、吡喹酮组、低剂量芹菜素组和高剂量芹菜素组都有显著性差异(P<0.05)。其中中剂量组300 mg/(kg bw.d)综合效果较佳。结论芹菜素中剂量组300 mg/(kg bw.d)对血吸虫病肝纤维化综合效果较佳。[营养学报,2012,34(6):591-594,598]

Ⅱ型转化生长因子β受体亲和肽抗肝纤维化实验研究

目的:探讨Ⅱ型转化生长因子β受体亲和肽在CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型中的抗肝纤维化作用。方法:根据展示肽氨基酸序列合成亲和肽C1;应用CCl4制作小鼠肝纤维化模型;给予亲和肽C1施行干预治疗,同时设立正常对照组、模型组、秋水仙碱组;造模5周后采血并处死小鼠,检测血清中ALT、ALB、TP含量,取肝组织测定羟脯氨酸含量,制作病理组织切片,作HE染色和Masson染色,对肝脏炎症活动度和纤维化程度进行分析。结果:人工合成的Ⅱ型转化生长因子β受体亲和肽C1用于抗肝纤维化治疗能减轻炎症、减少胶原纤维形成,ALT、羟脯氨酸与肝纤维化小鼠模型组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:亲和肽C1可以改善实验性肝纤维化小鼠的肝脏组织结构和肝功能,具有较好的抗肝纤维化作用。

4种黄酮类化合物对CCl_4致小鼠肝纤维化的防治作用

目的探讨芹菜素、根皮苷、原花青素和新橙皮苷二氢查尔酮等黄酮类化合物在CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型中的抗肝纤维化作用。方法将♂昆明种小鼠105只随机均分为正常对照组、CCl4模型组、秋水仙碱组、芹菜素组、根皮苷组、原花青素组、新橙皮苷二氢查尔酮组。给药5周后采血并处死小鼠,测定并比较各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性,总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)及肝组织中的羟辅氨酸(HYP)的含量,计算小鼠的肝指数,观察肝脏的病理变化。结果 4种黄酮类化合物均可使模型小鼠血清中ALT、AST的含量、肝组织中羟脯氨酸的含量降低;病检也证明各组小鼠的肝细胞变性、坏死和肝纤维化均有不同程度的减轻。结论芹菜素、根皮苷、原花青素及新橙皮苷二氢查尔酮有抗CCl4致小鼠肝纤维化的作用。

黑尾鱼央肌肉营养成分分析与营养学评价

黑尾鱼央（Liobagrus nigricauda Regan）属鲇形目（Siluriformes）、鱼央科（Liobagrus）鱼类,广泛分布于长江上游干流及中游湖泊[1]。黑尾鱼央肉质细嫩、味道鲜美,深受当地消费者的喜爱。有关黑尾鱼央的研究较少,且主要集中在分类、形态、生物学和遗传等方面[1-3],有关其肌肉营养成分的研究未见报道。