烟草青枯病拮抗内生细菌的分离、鉴定及其田间防效

从病区健康烟草植株茎杆内分离到一株对烟草青枯罗尔氏菌（Ralstonia Solarbocarum）有强拮抗作用的内生细菌，命名为B-001菌株．拮抗性研究表明，B-001菌株对多种革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌以及病原真菌均有较强的抑制作用．形态和生理生化特征初步表明菌株B-001为芽孢杆菌属（Bacillus）细菌．经扩增、测序得到B-001的16S rDNA序列，GenBank接收号为DQ444283．用ClustalX进行多重序列对比，并通过MEGA3方法构建16SrDNA系统发育树，表明：菌株B-001与Bacillus subtilis（DQ415893）的相似性为99．2％，并处于同一分支；结合形态和生理生化指标，将其鉴定为枯草芽孢杆菌（B．subtilis）．2005和2006年在湖南省桂阳县、宁乡县进行了田间试验，防效在40．03％-78．14％，防治效果良好，且明显优于农用链霉素．

内生枯草芽孢杆菌B-001菌株抗菌肽纯化与性质

An antagonistic peptide,H16,produced by endophytic Bacillus subtilis B-001 was purified via ammonium sulphate precipitation,DEAE-Sepharose FF chromatography,FPLC Phenyl FF chromatography and HPLC C18 chromatography.The peptide showed strong antagonistic activity to Ralstonia solanacearum.LC-ESI-MS analysis showed molecular weight of the peptide was 7 367.4 Da,which was the same with that by SDS-PAGE.It was thermostable and not sensitive to proteinases.