死亡相关蛋白(Thanatos-associated proteins,THAP)家族的许多成员已被证实与细胞增殖、凋亡和癌症密切相关,而THAP8的功能尚不清楚。为了探究THAP8在癌症中的表达,对TCGA和Oncomine数据库进行了分析,发现THAP8 m RNA在肺癌组织的表达...死亡相关蛋白(Thanatos-associated proteins,THAP)家族的许多成员已被证实与细胞增殖、凋亡和癌症密切相关,而THAP8的功能尚不清楚。为了探究THAP8在癌症中的表达,对TCGA和Oncomine数据库进行了分析,发现THAP8 m RNA在肺癌组织的表达显著高于癌旁正常组织;接着采用荧光定量PCR技术分析了22对肺癌和癌旁正常组织中THAP8的表达差异,结果与数据库分析一致。为了探讨THAP8在肺癌组织中高表达的原因,用JASPAR软件预测THAP8启动子上的转录因子结合位点,发现THAP8基因启动子区含有4个缺氧诱导元件。荧光素酶活性分析实验证明,缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)可以结合到THAP8启动子上的缺氧诱导元件并促进THAP8基因的转录。在CoCl_(2)诱导的缺氧模型中,随着CoCl_(2)浓度的增加,HIF-1α和THAP8蛋白的表达水平升高。此外,在Beas-2B细胞中,过表达HIF-1α可以促进THAP8的表达。为了进一步研究THAP8在肺癌细胞中的功能,用慢病毒介导的shRNA敲低THAP8基因,分析THAP8基因沉默对肺癌细胞生物学行为的影响。结果表明:在H460和H1437肺癌细胞中,敲低THAP8基因可显著降低细胞的活力、克隆形成和侵袭能力。这些结果说明:THAP8可以受缺氧诱导,并促进肺癌细胞的活力、克隆形成和侵袭,是一个新的癌基因。展开更多
文摘死亡相关蛋白(Thanatos-associated proteins,THAP)家族的许多成员已被证实与细胞增殖、凋亡和癌症密切相关,而THAP8的功能尚不清楚。为了探究THAP8在癌症中的表达,对TCGA和Oncomine数据库进行了分析,发现THAP8 m RNA在肺癌组织的表达显著高于癌旁正常组织;接着采用荧光定量PCR技术分析了22对肺癌和癌旁正常组织中THAP8的表达差异,结果与数据库分析一致。为了探讨THAP8在肺癌组织中高表达的原因,用JASPAR软件预测THAP8启动子上的转录因子结合位点,发现THAP8基因启动子区含有4个缺氧诱导元件。荧光素酶活性分析实验证明,缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)可以结合到THAP8启动子上的缺氧诱导元件并促进THAP8基因的转录。在CoCl_(2)诱导的缺氧模型中,随着CoCl_(2)浓度的增加,HIF-1α和THAP8蛋白的表达水平升高。此外,在Beas-2B细胞中,过表达HIF-1α可以促进THAP8的表达。为了进一步研究THAP8在肺癌细胞中的功能,用慢病毒介导的shRNA敲低THAP8基因,分析THAP8基因沉默对肺癌细胞生物学行为的影响。结果表明:在H460和H1437肺癌细胞中,敲低THAP8基因可显著降低细胞的活力、克隆形成和侵袭能力。这些结果说明:THAP8可以受缺氧诱导,并促进肺癌细胞的活力、克隆形成和侵袭,是一个新的癌基因。