胶质纤维酸性蛋白和脑特异性蛋白产物9.5检测对外源性颅脑损伤患者早期诊断的应用价值

目的探讨脑外伤颅内出血早期诊断模型的构建与临床应用价值。方法选取2020年7月至2021年1月在该院急诊科入院的319例经临床诊断为颅脑损伤患者血清样本,其中具有CT诊断结果或格拉斯哥评分新鲜外源性脑损伤样本53例,对照组为该院在此期间确诊为其他非外源性脑损伤的血清样本266例,健康对照组115例,采用磁微粒化学发光法检测患者血清中的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和脑特异性蛋白产物9.5(PGP9.5)。以临床诊断结论判为外源性脑损伤的样本为阳性,判定为其他非外源性的脑损伤样本为阴性。利用单因素和二元逻辑Logistic回归方程分析外源性脑外伤的危险因素。应用定量数据统计血清中的GAFP和PGP9.5在外源性脑外伤、非外源性脑外伤和健康体检者的中位数,方差齐性检验在不同组别之间的差异,根据相关性分析两者之间的相关系数,采用受试者工作特征(ROC)曲线来评价两者和两者联合检测的灵敏度、特异度和相关性。结果外源性脑损伤血清GAFP和PGP9.5的浓度水平均高于对照组非外源性脑损伤患者和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),非外源性脑损伤血清GFAP浓度水平高于健康体检组,差异有统计学意义(P<0.05),PGP9.5的浓度水平均非外源性脑损伤患者与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);Spearman秩相关分析显示,血清GFAP和PGP9.5水平与外源性脑损伤(r=0.53、0.52,P<0.05)呈正相关,年龄与外源性脑损伤的(r=-0.27,P<0.05)呈负相关;血清PGP9.5、GFAP水平与外源性脑损伤程度(r=0.735、0.603、P<0.05)。二元Logistic回归分析结果表明,外源性脑损伤患者的年龄(OR=0.944,95%CI 0.920~0.969,P<0.05)、GFAP(OR=1.015,95%CI 0.996~1.035,P<0.05)、PGP9.5(OR=1.001,95%CI 0.999~1.003,P<0.05)为外源性颅脑损伤的独立的危险因素;ROC曲线分析结果显示,血清中的GFAP、PGP9.5诊断外源性颅脑损伤患者的灵敏度分别为0.909、0.943,特异度分别为0.891、0.891,GFAP、PGP9.5诊断外源性颅脑损伤患者曲线下面积(AUC)分别为0.909、0.907。血清GFAP和PGP9.5临床诊断具有良好的相关性。结论通过对实验组和对照组的结果进行分析得出,在早期外源性颅脑损伤患者诊断中,GFAP和PGP9.5单项诊断均具有较高的灵敏度和特异度,PGP9.5诊断的价值更高,有利于疾病的早期诊断和降低医疗负担。

过表达miR-199-3p/5p诱导胰腺癌细胞BxPC-3、Panc-1铁死亡的作用机制

目的 探讨过表达miR-199-3p/5p诱导胰腺癌细胞BxPC-3和Panc-1铁死亡的作用机制。方法 瞬时转染miR-199-3p/5p模拟物和抑制物至BxPC-3、Panc-1细胞中。qRT-PCR检测细胞中miR-199-3p/5p表达水平;Western blotting检测SCL7A11、BTRC、TFRC蛋白水平。谷胱甘肽(GSH)、Fe^(2+)、脂质过氧化物(LPO)试剂盒检测细胞GSH、Fe^(2+)、LPO水平。免疫共沉淀检测BTRC、TFRC泛素化水平。双荧光素酶报告实验检测miR-199与靶基因的相互作用。结果 转染miR-199-3p/5p模拟物后,胰腺癌BxPC-3、Panc-1细胞株中miR-199-3p/5p、TFRC蛋白水平显著上调;SLC7A11、BTRC蛋白水平显著降低;LPO、Fe^(2+)含量升高,GSH含量降低。过表达BTRC能够显著降低TFRC蛋白水平。miR-199-3p靶向结合SLC7A11,miR-199-5p靶向结合BTRC。结论 过表达miR-199-3p/5p诱导胰腺癌细胞BxPC-3和PANC-1铁死亡,可能与靶向抑制BTRC、SLC7A11促进LPO累积有关。

二十二碳六烯酸对人胰腺癌细胞生长抑制作用的分析

目的:分析二十二碳六烯酸对人胰腺癌细胞生长的抑制作用。方法:行细胞培养后运用噻唑蓝比色(MTT)法检测人胰腺癌细胞的增殖,采用流式细胞术检测人胰腺癌细胞的凋亡、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、环氧合酶-2(COX-2)的表达,统计分析不同浓度的DHA培养液培养24 h、48 h、72 h人胰腺癌细胞的存活率、凋亡率,并统计分析不同浓度的DHA培养液培养48 h人胰腺癌细胞的细胞周期分布及不同浓度的DHA培养液培养24 h人胰腺癌细胞Bcl-2、COX-2的表达。结果:0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL的DHA培养液培养24 h、48 h、72 h人胰腺癌SW1990、Patu8988细胞的存活率均随DHA培养液浓度的升高而逐渐降低(P<0.05),0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL的DHA培养液培养24 h、48 h、72 h人胰腺癌SW1990、Patu8988细胞的凋亡率均随DHA培养液浓度的升高而逐渐升高(P<0.05)。0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL的DHA培养液培养48 h人胰腺癌SW1990、Patu8988细胞的G_(0)~G_(1)期、G_(2)~M期细胞占比均随DHA培养液浓度的升高而逐渐升高(P<0.05),S期细胞占比均随DHA培养液浓度的升高而逐渐降低(P<0.05)。0μg/mL的DHA培养液培养24 h人胰腺癌SW1990、Patu8988细胞Bcl-2、COX-2的表达水平、蛋白荧光值均高于50μg/mL(P<0.05)。结论:DHA可抑制人胰腺癌细胞的生长,途径可能为下调人胰腺癌细胞中的Bcl-2、COX-2表达。

三七总皂苷减轻过氧化氢诱发的对肾小管上皮细胞的氧化应激损害

目的观察三七总皂苷(PNS)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)的氧化应激损害的保护作用及其机制。方法培养HK-2并分组:正常组(不加任何干预因素),H_(2)O_(2)组(在细胞培养体系中加入终浓度为400μmol/L的H_(2)O_(2),培养6 h)和PNS组(分为3组:先在细胞培养体系中分别加入PNS 25μg/ml、50μg/ml和100μg/ml,培养4 h,再加入终浓度为400μmol/L的H_(2)O_(2),继续培养6 h),观察H_(2)O_(2)刺激HK-2发生凋亡情况。结果与正常组相比,H_(2)O_(2)组细胞存活率降低为(45.67±2.52)%、细胞凋亡率升高至(19.23±1.63)%(均P<0.01),而PNS组各组的细胞存活率分别为(55.12±2.33)%、(65.37±4.72)%和(83.46±1.52)%,细胞凋亡率分别降低至(15.53±0.70)%、(12.53±1.30)%和(7.17±0.35)%,50μg/ml和100μg/ml PNS组的HK-2细胞内活性氧(ROS)水平分别为(845.7±17.79)和(353.3±26.1);3个PNS组中,随着PNS剂量增加,超氧化物歧化物(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性增加,丙二醛(MDA)的生成减少,与H_(2)O_(2)组相比,差异均存在显著统计学意义(均P<0.01)。结论PNS能通过增强细胞内抗氧化酶活力,保护HK-2细胞对抗氧化损伤,随着剂量增加,作用效果增强。

胃癌组织中新型微卫星不稳定性检测及其与人表皮生长因子受体2、P53关系的研究

目的研究胃癌组织人表皮生长因子受体2(HER2)、肿瘤抑制蛋白质P53的表达及其与微卫星不稳定性(MSI)的关系。方法选取湖南师范大学附属岳阳医院2018年1月至2020年10月确诊为胃癌的103例患者作为研究对象.应用免疫组织化学(IHC)法检测患者胃癌及癌旁正常组织HER2、P53,错配修复蛋白表达情况,应用多重荧光PCR(Idylla)检测7个位点的MSI状态。结果本研究中,103例胃癌患者中.IHC法显示微卫星稳定(MSS)患者有77例(74.8%),MSI患者有26例(25.2%),PCR法显示MSS患者有77例,MSI患者有26例。MSI HER2低表达率高于HER2高表达率,MSI HER2低表达率MSS HER2低表达率(P<0.05)。MSI P53低表达率高于P53高表达率,MSI P53低表达率低于MSS低P53表达率(P<0.05)。结论胃癌发生过程中可能存在MSI状态;胃癌的MSI状态可能伴随HER2.P53表达降低,胃癌组织中HER2及P53的表达与MSI状态存在互斥的关系,提示MSI的致癌机制可能与HER2及P53具有较大的差异性。MSI型检测对于治疗药物选择及预后判断都有较强的指导意义。