紫花白芨组织培养技术研究

为建立白芨种子高效实用的组织培养技术体系,以紫花大种白芨成熟未开裂蒴果为外植体,进行组培快繁技术研究。结果表明:外植体表面清洁后,在5%次氯酸钠溶液中浸泡15 min,之后将种子接种于萌发培养基,配方为MS+6-BA(1.0 mg·L^(-1))。种子萌发并形成绿色原球茎即可转入幼苗营养生长培养基,配方为MS+6-BA(2.0 mg·L^(-1))+NAA(0.5 mg·L^(-1))。幼苗生长到3 cm以上时,接入生根培养基中,配方为1/2MS+6-BA(0.1 mg·L^(-1))+NAA(0.5 mg·L^(-1))。待其根系长度达到1 cm后,可进行炼苗移栽。

嘉宝果全光照喷雾扦插繁殖技术研究

以嘉宝果当年生枝条为插穗,开展扦插时期、扦插基质、生根剂种类及其浓度对嘉宝果全光照喷雾扦插成活影响的研究。结果表明:嘉宝果在湖南浏阳地区的扦插时间以6月底最佳,扦插成活率91.1%以上;扦插基质以泥炭土与珍珠岩按体积比2∶1配制最为适宜,扦插成活率达90.7%;植物生根剂宜选择KIBA,用其1 000 mg·L^(-1)浓度溶液速沾插穗基部30 s,扦插成活率在90.8%以上。

郁闭林分下华重楼光合特性研究

林药模式是最具林业特色的林下经济发展模式之一,而发展好林药首先就必须选择出适宜在林荫下生长的道地品种、大宗品种。本文以在郁闭林分中正常生长的华重楼健康植株为材料,运用Li-6400便携式光合作用测定系统对其光合作用日变化、光响应特性及CO_2响应特性进行研究。结果表明:华重楼光合作用日变化表现为典型的双峰曲线,具有明显的午休现象,且既受气孔因素限制,也受非气孔因素限制。影响华重楼光合日变化的主要因子为大气CO_2浓度和叶面大气压亏缺等。华重楼的光补偿点为3.93μmol·m^(-2)s^(-1),光饱和点为455μmol·m^(-2)s^(-1),表观量子效率为0.067 3μmol·m^(-2)s^(-1),验证了华重楼为典型的阴生植物,且利用弱光的能力较强。华重楼CO_2补偿点为168.31μmol·mol-1,CO_2饱和点为2 225μmol·mol-1,羧化速率为0.008 9μmol·mol-1,为典型的C3植物。

山银花组织培养继代增殖过程中内源激素含量变化的研究

以山银花良种‘金翠蕾’为试验材料,分析组培苗继代增殖过程中内源激素含量的变化。结果表明:内源ZR、ABA和GA3在组培苗继代增殖分化丛芽过程中起主要调控作用,内源ZR、GA3含量较高和内源ABA含量较低有利于其继代增殖分化丛芽,内源IAA含量高也有助于组培苗继代增殖分化和生长;内源IPA含量较高可促进组培苗启动培养,但与增殖分化丛芽的关系不紧密。在一个培养周期中,组培苗GA3/ZR值主导其增殖分化丛芽,GA3/ZR值较高有利于组培苗增殖分化和生长,增殖分化盛期时则需要GA3/ZR值保持较低的水平;虽然GA3/ABA值也呈现了相似的效应,但作用没有GA3/ZR值明显。在继代增殖培养的前4个周期中,保持较高水平的GA3/ABA值和IPA/ABA值能促进外植体启动培养和组培苗增殖分化丛芽。

多花黄精不同种源种实形态性状遗传变异研究

旨在阐明多花黄精种实形态性状在种源水平上的遗传变异规律,为多花黄精优良种源选择提供理论依据。以栽植在同质栽培园的18个多花黄精种源为材料,比较了不同种源多花黄精浆果、种子的纵径、横径、侧径等形态性状,以及单果重和种子千粒重等性状的差异。多花黄精种实形态性状及其单果鲜重和种子千粒重在不同种源间均存在着极显著差异;多花黄精浆果形态性状两两之间存在极显著正相关关系,种子形态性状两两之间也存在显著或极显著正相关关系,但绝大多数浆果形态性状与种子形态性状之间的相关性不显著;多花黄精种实形态性状在种源水平上不存在明显的地理变异模式;多花黄精种子形态性状在种源水平上的广义遗传力达到强度遗传范围,能比较稳定地遗传。可以考虑利用种子千粒重这一指标作为多花黄精优良种源选择的间接指标。

箭叶淫羊藿光合特性研究

运用Li-6400便携式光合作用测定系统对郁闭林分下箭叶淫羊藿的光合作用日变化、光响应特性及CO_2响应特性进行了研究。结果表明:(1)箭叶淫羊藿光合作用日变化表现为单峰曲线,其峰值出现在上午10∶00左右,且影响其日变化的主要因素为叶片蒸腾速率、胞间CO_2浓度、光合有效辐射和大气CO_2浓度等;(2)箭叶淫羊藿的光补偿点为3.6μmol·m^(-2)·s^(-1),光饱和点为433.6μmol·m^(-2)·s^(-1),表观量子效率为0.038μmol·m^(-2)·s^(-1),验证了箭叶淫羊藿为典型的阴生植物,且利用弱光的能力较强;(3)箭叶淫羊藿CO_2补偿点为80.3μmol·mol^(-1),CO_2饱和点为1 656μmol·mol^(-1),羧化速率为0.008μmol·mol^(-1)。

海南重楼光合特性研究

海南重楼为濒危保护植物,野生资源匮乏,在引种后的人工栽培过程中,为向其提供良好的生长条件,充分发挥其光合潜力,需要了解其光合特性。以林下生长的海南重楼为材料,使用LI-6400XT便携式光合仪对其光合作用日变化、光响应特性及CO_(2)响应特性进行测量。海南重楼叶片净光合速率日变化表现为“单峰”曲线,峰值出现在14:00。相关分析和多元逐步回归分析发现,影响海南重楼净光合速率日变化的主要因子为气孔导度。海南重楼的光补偿点为3.04μmol/(m^(2)·s),光饱和点为737.5μmol/(m^(2)·s),表观量子效率为0.0452μmol/(m^(2)·s);海南重楼的CO_(2)补偿点为92.33μmol/mol,CO_(2)饱和点为1687.5μmol/mol,羧化速率为0.0124μmol/mol。测量海南重楼的光合特性,可为其人工栽培的光照条件控制提供参考数据。

不同种源半夏的药用有效成分遗传变异研究

以16个半夏野生种源为材料,测定了各个种源的总有机酸、生物碱和鸟苷含量。结果表明:半夏的总有机酸、生物碱和鸟苷含量在不同种源间的差异均达极显著。半夏的总有机酸、生物碱和鸟苷含量两两之间均未达显著相关水平,且其广义遗传力分别为0.2712、0.2743和0.6660,可以将鸟苷含量作为半夏优良种源选择的可靠指标。半夏的总有机酸、生物碱含量均无明显的地理空间变异模式,而鸟苷含量呈比较明显的纬向变异模式。产地积温越高,半夏的生物碱含量越高,总有机酸含量却越低。函数隶属法综合评价表明新化县、溆浦县、吉首市和永顺县等地为湖南省比较优良的半夏种源。

配方施肥对高肥力区凹叶厚朴生长及药用成分的影响

[目的]为明晰高肥力区凹叶厚朴树体生长及树皮药用成分含量对氮、磷、钾配方施肥的响应,获得氮、磷、钾肥优化的施肥量。[方法]以凹叶厚朴5年生树为研究对象,采用氮、磷、钾“3414”施肥设计进行田间施肥试验,测定不同处理的树高和地径增长量及药用成分厚朴酚、和厚朴酚、总酚的含量,拟合建立树高增长量的肥料效应模型,采用频次分析方法获得优化施肥量。[结果]凹叶厚朴氮、磷、钾配方施肥处理的树高增长量、地径增长量、和厚朴酚、厚朴酚、总酚的含量的平均值比不施肥处理分别提高了84.56%、48.74%、3.40%、3.10%、3.21%。氮、磷、钾对树高和地径生长量的影响均是N>P>K,对树皮厚朴酚、和厚朴酚、总酚含量的影响均是K>N>P。氮、磷、钾对树高增长量的单因素效应为正,氮与磷、氮与钾、磷与钾的交互效应也都是正。[结论]高肥力区凹叶厚朴树高最大增长量的施肥量为氮肥128.63克/株、磷肥79.84克/株、钾肥54.63克/株,树高最大增长量为129.91 cm;最优施肥量为氮肥98.12~123.31克/株、磷肥60.23~74.78克/株、钾肥41.62~51.24克/株,预期树高平均增长量121.22 cm。

基于菌株生长和菌根苗品质的红汁乳菇菌株筛选

【目的】筛选用于菌根苗接种的高质量红汁乳菇菌株,为提高红汁乳菇产量提供支持。【方法】以10个红汁乳菇菌株(JH1、JH2、JH4、JH5、JH7、JH8、JH10、JH11、JH12、JH13)为研究对象,将菌株分别在PDA和BAF培养基上培养后,测定菌株生长势指标(菌丝生长速度、菌丝生物量);将红汁乳菇液体菌种接种于马尾松幼苗根部合成菌根苗,以不接种为对照(CK),培养210 d后对菌根合成能力(菌根数量、菌根侵染率、菌根化率)和宿主植物生长量(苗高、主根长、地径、干质量)进行测定。对上述9个参数进行相关性分析,并用隶属函数法对菌株性状进行综合评价。【结果】①在PDA固体培养基上,以菌株JH1菌丝生长速度最快,达到3.17 mm/d;在BAF液体培养基上,以菌株JH5的菌丝生物量最大,为3.28 g/L。②所有菌株均能与马尾松根系形成外生菌根,但菌根形态并不相同。接种红汁乳菇菌株JH5的马尾松苗的菌根数量为45.65个/株,菌根化率为90.67%,菌根侵染率为79.60%,显著高于其他9个菌株,表现出较强的合成菌根苗能力。③接种不同红汁乳菇菌株的马尾松苗,在苗高、主根长、地径和干质量等指标上表现各异。接种菌株JH4的马尾松苗高、主根长和干质量表现最优,较对照分别提高24.45%,16.72%和53.33%;接种菌株JH5的马尾松苗地径生长量表现最优,较对照提高5.19%。④相关性分析表明,菌丝生物量与菌根化率和菌根苗干质量呈极显著正相关(P<0.01),菌根数量与菌根化率和菌根苗地径呈极显著正相关(P<0.01)。⑤基于隶属函数法的综合评价结果表明,红汁乳菇JH5为适合培育菌根苗的最佳菌株,JH4和JH7为次优菌株。【结论】筛选出1个优良红汁乳菇菌株JH5,该菌株的生长势和菌根苗品质整体表现较好。

提取方法对缬草精油化学成分及其抗氧化活性的影响

【目的】比较不同方法提取的缬草精油化学成分及其相对含量和抗氧化活性的差异,为缬草精油的质量控制及深度开发利用提供参考。【方法】以缬草根为原材料,分别采用水蒸气蒸馏法、超临界CO_(2)萃取法和亚临界丁烷萃取法提取缬草精油,再利用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)对提取的3种缬草精油分别进行化学成分分析,并结合清除DPPH、OH和ABTS自由基的能力评价3种缬草精油的抗氧化活性。【结果】3种方法提取的缬草精油化学成分及其相对含量差异明显,提取的3种缬草精油共鉴定出87种化合物,主要为烯类、醇类、酯类和醛类化合物。水蒸气蒸馏法提取的缬草精油(SD)鉴定出52种化合物,其中烯类化合物31种,相对含量为46.34%;醇类化合物10种,相对含量为12.23%;酯类化合物4种,相对含量为30.55%。超临界CO_(2)萃取法提取的缬草精油(SFE)鉴定出79种化合物,其中烯类化合物29种,相对含量为30.81%;醇类化合物17种,相对含量为13.38%;酯类化合物13种,相对含量为35.59%;醛类化合物11种,相对含量为7.88%。亚临界丁烷萃取法提取的缬草精油(SBE)鉴定出57种化合物,其中烯类化合物27种,相对含量为27.90%;醇类化合物9种,相对含量为16.20%;酯类化合物9种,相对含量为38.06%。3种缬草精油均含有乙酸龙脑酯、龙脑、氧化喇叭烯(Ⅰ)、百秋李醇、蓝桉醇、缬草醛、塞舌尔烯等42个共同成分,且均以乙酸龙脑酯为主要成分。3种缬草精油均具有清除DPPH、OH和ABTS自由基的能力,显示出较强的抗氧化活性。质量浓度为0.50 mg/mL时,水蒸气蒸馏法提取的缬草精油(SD)对DPPH、OH和ABTS自由基的清除率分别为56.62%,55.33%和56.21%;超临界CO_(2)萃取法提取的缬草精油(SFE)对DPPH、OH和ABTS自由基的清除率分别为82.81%,75.64%和82.56%;亚临界丁烷萃取法提取的缬草精油(SBE)对DPPH、OH和ABTS自由基的清除率分别为70.13%,68.15%和78.64%。3种缬草精油抗氧化活性综合指数依次表现为SFE>SBE>SD。【结论】不同方法提取的缬草精油化学成分及其相对含量存在一定差异,其中超临界CO_(2)萃取法提取的缬草精油化合物种类最多,抗氧化活性最强,是提取缬草精油的优选方法。

不同种源多花黄精农艺性状及药用有效成分的差异

以18个多花黄精种源为材料,研究不同种源多花黄精的农艺性状和药用有效成分的差异。结果表明:除根茎长外,不同种源多花黄精的株高、地径等农艺性状及其根茎多糖含量差异均达到显著或极显著水平;不同种源多花黄精的株高、地径、叶面积与其根茎长、根茎粗、根茎鲜质量均呈正相关,根茎多糖含量与株高、地径、根茎粗均呈负相关;多花黄精不同种源间没有明显的地理变异模式;除株高外,多花黄精不同种源的其他农艺性状与药用有效成分含量的遗传方差均小于其环境方差,遗传变异系数也均小于其环境变异系数;除株高和根茎多糖含量外,其他性状的遗传力均比较低;运用隶属函数法综合筛选出石门壶瓶山、沅陵火场、安化仙溪、溆浦低庄和恩施咸丰等5个多花黄精优良种源。

灰毡毛忍冬Lm4CL基因克隆及表达分析

【目的】克隆灰毡毛忍冬4CL基因,分析其在不同组织间的表达水平及与绿原酸含量的相关性。【方法】以灰毡毛忍冬转录组4CL候选基因为参考,采用RACE技术克隆4CL基因全长,并对其理化性质、保守结构域等进行生物信息学分析;用荧光定量PCR方法分析其在不同组织、不同发育阶段的表达特性;采用HPLC法测定灰毡毛忍冬叶、茎和花中绿原酸含量;构建表达载体pCold-Lm4CL,转化大肠杆菌BL 21(DE3),IPTG诱导表达后SDS-PAGE检测。【结果】从灰毡毛忍冬中分离出两个4CL基因,分别命名为Lm4CL1和Lm4CL2,分别编码538和560个氨基酸;氨基酸序列分析表明,Lm4CLs包含4-香豆酸:辅酶A连接酶中的Box I和Box II保守结构域及大多数保守的活性位点,而Lm4CL2中的Box I和Box II有4个氨基酸发生改变;Lm4CL1是没有跨膜结构域的不稳定蛋白,Lm4CL2是有两个跨膜结构域的稳定蛋白。系统发育分析表明,这两个同源基因处于不同的类别,Lm4CL1属于Ⅰ类,Lm4CL2属于Ⅱ类。通过建立三维结构模型分析了Lm4CL蛋白的结构特征,为了解Lm4CL的结构特征提供了基础信息。表达模式分析结果表明,Lm4CL1基因在不同组织、不同发育阶段的表达水平与Lm4CL2基因明显不同。基因表达量与绿原酸含量相关性分析显示,Lm4CL1基因的表达量与绿原酸含量呈负相关(r=-0.63),Lm4CL2基因的表达量与绿原酸含量呈正相关(r=0.94)。SDSPAGE结果显示,Lm4CL1蛋白的大小与预测的蛋白相对分子质量基本一致。【结论】推测Lm4CL1基因与灰毡毛忍冬木质素的合成有关,Lm4CL2基因与灰毡毛忍冬的绿原酸合成有关。

氮磷钾配方施肥对凹叶厚朴低肥力区幼树生长及药用成分含量的影响

【目的】为探究氮磷钾配方施肥对凹叶厚朴低肥力区幼树生长及药用成分含量的影响及肥料效应,推荐氮磷钾肥最优配比和施肥量。【方法】以低肥力区凹叶厚朴良种‘洪塘营7号’的幼树(5 a)为研究对象,采用“3414”施肥方案设计氮磷钾3因子配方施肥试验,对生长量和药用成分含量进行测定与统计分析,建立了树高生长量与氮磷钾肥料效应模型,采用频次分析方法优化肥料效应方程模型,得到优化施肥量。【结果】氮磷钾配方施肥能显著提高凹叶厚朴低肥力区幼树的树高和地径生长量,且不同程度的提高厚朴酚、和厚朴酚、总酚的含量。氮、磷、钾肥对树高和地径生长量的影响顺序分别是K>N>P、N>P>K,对树皮厚朴酚、和厚朴酚、总酚含量的影响顺序分别是N>P>K、N>K>P和K>P>N。氮肥、磷肥、钾肥对凹叶厚朴幼树树高的单因子影响表现出相似的效应,树高生长量分别随着施肥量的增加呈现先升后降的抛物线曲线。任意两个肥料施用量在一定范围内存在协同促进作用,当二者过量时又表现出拮抗作用。磷肥、氮肥、钾肥对树高生长量的影响为正效应。氮与磷、磷与钾之间存在正交互作用,氮与钾之间则存在负交互作用。【结论】推荐低肥力区凹叶厚朴幼树树高最大生长量的施肥量为氮肥125.44 g/株、磷肥71.13 g/株、钾肥40.22 g/株,树高最大生长量为113.56 cm;最优施肥量为:氮肥85.29~118.56 g/株、磷肥51.17~71.13 g/株、钾肥32.56~45.88 g/株,用这3种施肥量进行组合,容易获得树高的较大生长量。

菌材树种对天麻产量和品质的影响

为解决湖南天麻种植中菌材严重缺乏和菌材滥用等问题,进行菌材树种优化筛选研究。选择油桐、南酸枣、野漆树、盐肤木、拟赤杨、山樱桃、白栎、化香、锥栗、光皮桦、山合欢等11种湖南山地常见树种作菌材,在雪峰山地区林下种植天麻;参照2015版《中国药典》方法提取和测定天麻素、对羟基苯甲醇含量;采用超声波辅助浸提法、蒽酮比色法提取和测定多糖含量;分析以不同树种作菌材栽培所得天麻的产量、折干率及总灰分、天麻素、对羟基苯甲醇、天麻多糖含量及其相关性,并进行综合评价。结果表明:以11个树种作菌材栽培所得天麻的总灰分含量均低于4.5%,天麻素和对羟基苯甲醇总含量均大于0.25%,符合2015年版《中国药典》规定的天麻质量标准,这些树种都可作为栽培天麻的菌材原料树种。树种对天麻的产量和品质影响显著。其中以油桐作菌材所得天麻的鲜质量、干质量最高,分别为7.38 kg·m^(-2)、1.22 kg·m^(-2);以山合欢作菌材所得天麻的鲜质量、干质量均为最低,分别为2.22 kg·m^(-2)、0.36 kg·m^(-2)。天麻素和对羟基苯甲醇的总含量最高的是以野漆树作菌材的天麻,达1.23%,为《中国药典》规定的天麻质量标准的4.9倍;最低的是以油桐为菌材的天麻,其含量仅为0.3%。以化香作菌材栽培的天麻折干率和多糖含量最高,分别为21.39%、45.51%;以野漆树为菌材栽培的天麻折干率和多糖含量最低,分别为13.39%、14.82%。天麻的产量与品质之间、各有效成分含量之间的相关性不大;产量高的天麻,其品质不稳定。根据天麻产量和品质综合聚类分析,可以将11种菌材树种分成3类。运用隶属函数法综合筛选出化香、山樱桃、锥栗、拟赤杨为优选菌材树种。

基于天麻产量和品质的菌材优劣评价

目的:筛选出栽培天麻的最佳菌材。方法:选择山樱桃、枳椇、化香、山桐子、青榨槭、野漆树、白栎、水青冈和桤木9种本地修枝材作为菌材开展天麻栽培试验,对试验各处理样品天麻产量、天麻素、对羟基苯甲醇、天麻多糖含量指标进行了测定和分析。结果:以白栎作为菌材栽培天麻,产量为(4.16±0.88)kg/m^(2),天麻素和对羟基苯甲醇总含量达到(0.47±0.07)%,天麻多糖含量为(54.73±3.24)mg/g,其天麻产量和品质指标最佳。采用隶属函数法对各参数进行综合分析,也印证白栎是栽培天麻的首选菌材,山桐子、水青冈、山樱桃为栽培天麻的较优菌材。结论:白栎是栽培天麻的最佳菌材。

施肥对中肥力区凹叶厚朴幼树生长及药用有效成分含量的影响

为了研究施肥对中肥力区凹叶厚朴幼树生长及药用有效成分含量的影响,以中肥力区凹叶厚朴良种“洪塘营7号”的5年生幼树为研究对象,采用“3414”配方施肥设计,测定与统计分析不同施肥处理凹叶厚朴幼树的生长量及其树皮药用有效成分含量,并建立树高生长量与氮、磷、钾肥料效应模型。结果表明:施氮、磷、钾肥对中肥力区凹叶厚朴幼树的生长均有显著促进作用,对幼树树皮药用有效成分含量的影响均没有达到显著水平,但能不同程度地提高厚朴酚、和厚朴酚、总酚的含量。施氮、磷、钾肥对中肥力区凹叶厚朴幼树树高、地径生长量影响的排序分别为氮肥>磷肥>钾肥和磷肥>氮肥>钾肥,对树皮药用有效成分厚朴酚、和厚朴酚、总酚含量影响的排序分别为磷肥>钾肥>氮肥、钾肥>氮肥>磷肥和钾肥>氮肥>磷肥。在中肥力区的凹叶厚朴幼树树高最大生长量为122.02cm,对应的施肥量为N190.80g·株^(-1)、P_(2)O_(5)126.40g·株^(-1)、K_(2)O79.69g·株^(-1)。

遮阴对青牛胆生长与物质分配的影响

为青牛胆高效栽培提供理论依据,以2年生青牛胆扦插苗为试验材料,设置4个光照梯度(全光照、70%遮阴率、80%遮阴率、85%遮阴率),研究其对光环境变化的适应性.结果表明,青牛胆在70%遮光处理下,株高、地径、叶长、叶长宽比、叶片干重、茎干鲜重、块茎干重增加,叶宽、叶面积、比叶面积、折干率减小.而光照过强或过弱都会抑制青牛胆的正常生长.因此,70%遮阴处理较有利于青牛胆的生长.

箭叶淫羊藿文献综述

箭叶淫羊藿为我国传统名贵中药淫羊藿原药之一,具有补肾阳、强筋骨、祛风湿等功效。本文拟对箭叶淫羊藿的资源分布、分类鉴定、化学成分、药理作用、栽培技术、繁殖技术、质量控制、基因研究等方面进行归纳总结,并对存在的问题进行了探讨,以期为箭叶淫羊藿产业健康有序发展提供参考。

遮阴对箭叶淫羊藿生长和药用有效成分含量的影响

以盆栽箭叶淫羊藿为材料,设置遮光率70%、85%和90%等3个梯度,研究遮阴对箭叶淫羊藿的株高、地径、叶片形态性状、叶生物量及药用有效成分含量的影响。结果表明:随着遮光率的提高,箭叶淫羊藿的株高、叶长、叶宽、叶面积、叶鲜质量和叶干质量呈现出先增大后减小的趋势,而其总黄酮、总黄酮醇苷等药用有效成分含量则显示高峰-低谷-次高峰的变化趋势。隶属函数法综合评价结果表明,70%左右的遮光率是箭叶淫羊藿比较适合的遮阴环境。