基于PPARG/FABP4/GPX4通路研究淫羊藿苷诱导HepG2肝癌细胞铁死亡的作用机制

该研究探索了淫羊藿苷诱导肝癌细胞铁死亡的机制。通过生物信息学方法筛选淫羊藿苷的潜在靶点;构建了蛋白-蛋白互作网络与通路富集,利用分子对接技术评估了淫羊藿苷与靶点的结合能力;通过预测患者生存率来构建一套临床预测模型;同时采用cell counting kit-8(CCK-8)、EdU和克隆形成实验检测肝癌细胞的活性和增殖情况;比色法试剂盒及BODIPY 581/591 C1荧光探针用来检测细胞内铁离子和脂质过氧化水平。采用RT-qPCR和Western blot检测GPX4、xCT、PPARG和FABP4的mRNA和蛋白水平,以确定这些铁死亡相关基因在淫羊藿苷效应中的表达变化。通过生物信息学分析筛选出的6个干预靶点AR、AURKA、PPARG、AKR1C3、ALB、NQO1构成一个风险评分系统,有助于评估肝癌患者生存预后。结合患者年龄和TNM分期,开发了1个Nomogram临床预测模型,以预测肝癌患者1、3、5年的生存。实验研究结果发现,淫羊藿苷能有效地抑制肝癌细胞HepG2的活性和增殖,并能显著调节Fe^(2+)、MDA、脂质过氧化ROS水平,降低GSH水平,揭示其潜在的诱导肝癌细胞铁死亡的能力。淫羊藿苷能降低GPX4和xCT的表达(P<0.01),诱导肝癌细胞铁死亡,可能与抑制PPARG、FABP4有关(P<0.01)。综上,淫羊藿苷通过PPARG/FABP4/GPX4通路,诱导肝癌细胞铁死亡,为利用中药淫羊藿苷预防或治疗肝癌提供了实验基础。

石上柏外泌体样纳米囊泡对肝癌细胞增殖、形态、迁移、侵袭、凋亡的影响

目的:探讨石上柏外泌体样纳米囊泡对肝癌细胞的影响。方法:采取改良超高速离心法与蔗糖密度梯度离心法提取并纯化石上柏外泌体样纳米囊泡,应用透射电镜与纳米颗粒跟踪分析技术(NTA)进行鉴定。采用绿色荧光探针(DIO)标记石上柏外泌体样纳米囊泡并观察其被细胞摄取的情况。采用CCK-8法检测不同浓度的石上柏外泌体样纳米囊泡对肝癌细胞活力的影响,并计算对HepG2细胞的半数抑制浓度(IC_(50))值。观察石上柏外泌体样纳米囊泡对不同肝癌细胞形态变化的影响。采用克隆集落实验、划痕迁移实验、Transwell侵袭实验、流式细胞术探究石上柏外泌体样纳米囊泡对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。结果:经证实提取物为外泌体样纳米囊泡,石上柏外泌体样纳米囊泡能明显抑制肝癌细胞活力,抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡(P<0.05)。结论:石上柏外泌体样纳米囊泡对肝癌细胞有一定抑制性,且可能与顺铂协同发挥抑制和促凋亡作用。

基于铁死亡相关基因的生物信息学分析及结肠癌预后模型构建

目的筛选结肠癌(CC)差异预后铁死亡基因(CFRGs)并构建CC预后模型。方法通过癌症基因组图谱(TCGA)、FerrDb数据库获取相关数据,采用生物信息学方法筛选出CFRGs;通过TCGA数据库对所筛选出的CFRGs进行表达差异分析;采用Kaplan-Meier曲线与时间依赖性ROC曲线对所筛选出的CFRGs进行预后分析;采用单因素和多因素Cox回归分析构建CFRGs Nomogram图,并采用Calibration分析验证该模型的预测能力。结果共获取CFRGs 3个,即ALOXE3、CRYAB、CDKN2A;其中ALOXE3、CDKN2A表达上调,CRYAB表达下调。ALOXE3、CRYAB、CDKN2A高表达的CC患者生存结局均较差。联合3个基因的风险评分系统公式为0.172×ALOXE3_(exp)+0.126×CRYAB_(exp)+0.171×CDKN2A_(exp)-0.772,其预测CC患者1、3、5年生存的AUC分别为0.642、0.643、0.593。以年龄、性别、风险评分为因子构建CFRGs Nomogram图,预测能力较好(C指数为0.651);Calibration分析显示其预测的1、3、5年生存率与理想线段吻合良好。结论ALOXE3、CRYAB、CDKN2A与CC患者的生存预后显著相关,联合3个基因构建的风险评分系统和以年龄、性别、风险评分为因子构建的CFRGs Nomogram图均有良好的预测效能。