土鳖虫超微粉体中游离氨基酸的测定及指纹图谱研究

目的建立土鳖虫超微粉体的游离氨基酸的HPLC指纹图谱,考察其主要氨基酸的量。方法采用异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生,梯度洗脱进行色谱分离,固定相为依利特Hypersil BDS C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相A乙腈-水(4∶1),流动相B醋酸钠缓冲溶液(pH=6.5)-乙腈(97∶3),检测波长为254 nm,体积流量为1 mL/min,柱温为30℃。结果初步建立了土鳖虫超微粉体中游离氨基酸的HPLC指纹图谱,标定了24个共有峰,同时定量分析了6种氨基酸成分。结论建立的方法分离效果好,灵敏、准确、简单,可作为土鳖虫超微粉体质量评价的方法。

ELK-1/JNK/c-Fos对左归降糖解郁方(ZGJTJYF)体外培养的模拟糖尿病并发抑郁症(DD)大鼠海马神经元凋亡中的作用

目的:研究信号通路ELK-1/JNK/c-Fos在左归降糖解郁方(ZGJTJYF)对模拟糖尿病并发抑郁症(DD)环境下抗海马神经元凋亡中的作用。方法:原代培养海马神经元,加入高糖(150 mmol/L)+皮质酮(200μmol/L),构建DD体外细胞模型;将培养的海马神经元细胞随机分为5组:空白血清组、正常组、左归降糖解郁方含药血清组、阳性药(二甲双胍+氟西汀)含药血清组和模型组(每组3个复孔)。模型组和正常组给予等量培养液,其余组加入相应体积分数10%的相应血清,均干预18 h。分别采用Hoechst染色、高内涵细胞成像分析技术和RT-PCR技术分别检测海马神经元凋亡情况及检测凋亡相关ELK-1、JNK和c-Fos蛋白和基因的表达。结果:与空白组比较,模型组细胞凋亡明显,其海马神经元凋亡数量明显增多,ELK-1、JNK和c-Fos的mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,左归降糖解郁方含药血清组和阳性药含药血清组大鼠海马神经元可见局部亮点明显减少,凋亡细胞数显著减少,ELK-1、JNK和c-Fos蛋白及mRNA表达均明显下调(P<0.05),且神经网络及树突连接情况得到明显改善。结论:左归降糖解郁方可以减低DD环境下海马神经元中Elk-1、JNK、c-fos表达而起到抗凋亡的效果。

土鳖虫超微粉体中尿嘧啶、次黄嘌呤的含量测定

目的建立HPLC同时测定土鳖虫超微粉体中核苷类成分尿嘧啶、次黄嘌呤含量的方法。方法色谱柱为Hypersil C18 BDS柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.05 mol/L磷酸氢二铵水溶液,检测波长为254 nm,流速为0.4 mL/min,柱温为25℃。结果尿嘧啶、次黄嘌呤分别在0.044～0.22μg、0.042～0.21μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为95.93%、97.32%,RSD分别为2.9%、3.0%。结论建立的方法简单、重复性好、准确可靠,可用于土鳖虫中尿嘧啶、次黄嘌呤的含量测定。

补阳还五汤精简方对大脑中动脉阻塞模型大鼠海马组织Cdk5的调控

目的评价补阳还五汤精简方对大脑中动脉阻塞(MCAO)模型大鼠海马组织周期素依赖性蛋白激酶5(cyclin-dependent kinase 5,Cdk5)的调控。方法将♂SD大鼠随机分为假手术组、MCAO模型组、补阳还五汤干预组(灌胃3.15 g·kg^(-1))及补阳还五汤精简方干预组(灌胃2.41 g·kg^(-1)),每组按给药后1、3、7、14、28 d再各分5小组。采用免疫组化法、Western blot法和RT-PCR法考察不同时间点各组大鼠海马组织中Cdk5的表达。结果 MCAO模型大鼠海马组织中,脑缺血后1 d即出现Cdk5上调趋势,并随着脑缺血的加剧,Cdk5的表达继续上调,其中mRNA及蛋白水平在7~14 d达最大,28 d则出现下降趋势,与各时间点假手术组比较P<0.01,提示脑缺血损伤将激活Cdk5信号转导途径;补阳还五汤精简方干预后的3、7、14、28 d均能明显降低Cdk5的表达,与各时间点模型组比较P<0.05,且随着干预时间的延长,下调趋势越明显,干预28 d后,Cdk5的表达接近假手术组,提示补阳还五汤精简方可下调Cdk5的异常表达,与补阳还五汤原方比,两方对Cdk5的调控差异无统计学意义(P>0.05)。结论补阳还五汤精简方可能通过调控Cdk5的表达水平对脑缺血海马组织发挥保护作用。

糖尿病并发抑郁症“虚、瘀、郁”的中医病机探讨

糖尿病并发抑郁症发病率广、危害性大、治疗难度高,中医立足整体、辨证论治疗效独特,而紧扣糖尿病并发抑郁症以"虚"为本、"瘀、郁"为标的中医病机特点,对于防治该病的理法方药研究意义重大。

理中汤超微颗粒与传统饮片临床疗效比较研究

目的对不同剂量理中汤超微配方颗粒与传统饮片治疗胃脘痛的临床疗效进行比较研究。方法将60例符合中医脾胃虚寒证诊断标准的胃脘痛患者随机分为传统汤剂组、1/3剂量组和1/5剂量组,分别予传统理中汤饮片制剂、1/3剂量的超微配方颗粒和1/5剂量的超微配方颗粒。比较分析3组用药1个疗程后的临床疗效。结果 3组在年龄、病程、治疗前证候积分、胃脘痛疾病疗效和证候疗效方面,组间比较差异无统计学意义(P>0.05),3组均能降低胃脘痛的严重程度、频率和持续时间,治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论传统理中汤饮片制剂、1/3剂量超微配方颗粒和1/5剂量超微配方颗粒治疗胃脘痛的疗效无明显差异,且1/3剂量组与传统汤剂组的疗效十分接近。

黄连温胆汤加味治疗卒中后抑郁症的临床研究

目的分析黄连温胆汤加味对卒中后抑郁症(post-stroke depression, PSD)患者抑郁状态、认知功能障碍、神经功能及血液流变学指标的影响。方法回顾性收集本院诊治的PSD患者88例,分为对照组和观察组各44例。对照组予以常规神经内科治疗,配合心理疏导,观察组在对照组基础上予以黄连温胆汤加味治疗,观察比较2组抑郁状态、认知功能障碍、神经功能及血液流变学指标等。结果 2组患者在治疗2周及4周后, HAMD评分、NIHSS评分均低于治疗前,且观察组明显低于对照组(P<0.05);而两组MMSE评分均比治疗前升高(P<0.05),且观察组明显高于对照组(P<0.05);经1个月治疗后,2组全血黏度、红细胞沉降等指标均比治疗前降低(P<0.05),且观察组降低程度比对照组明显(P<0.05)。疗效上观察组总有效率为86.37%,明显高于对照组的69.18%(P<0.05)。结论对PSD患者实施神经内科常规治疗、心理疏导,联合黄连温胆汤加味有助于降低其认知功能障碍、改善患者情绪、稳定血液流变学指标、促进神经功能恢复,疗效确切,值得临床开展应用。

下丘脑-垂体-肾上腺轴紊乱对焦虑性抑郁模型大鼠海马结构的影响

目的研究下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴紊乱对焦虑性抑郁模型大鼠海马结构的影响,探讨焦虑性抑郁的潜在发病机制。方法将大鼠随机分为空白组、溶媒组、焦虑组、抑郁组和焦虑性抑郁组,每组12只。采用慢性束缚应激联合皮质酮注射方法建立焦虑性抑郁大鼠模型,连续21 d;造模后采用高架十字迷宫(EPM)、旷场实验(OFT)、强迫游泳实验(FST)评价大鼠焦虑和抑郁样行为;HE染色检测大鼠HPA轴各组织及海马病理变化;ELISA检测大鼠血浆中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量;Western blot检测大鼠海马糖皮质激素受体(GR)蛋白表达。结果焦虑性抑郁组大鼠进入开臂的时间、次数及自主活动次数均与焦虑组相当,不动时间显著增加,与对照组及抑郁组比较有显著差异(P<0.01或P<0.05);HPA轴各组织均出现不同程度损伤,海马神经元肿胀,呈空泡状;同时,血浆中CRH、ACTH和CORT含量显著增加(P<0.01或P<0.05),海马GR表达显著下降。结论焦虑性抑郁模型组大鼠具有显著的焦虑及抑郁样行为,其发病机制可能与机体HPA轴紊乱及其引发的脑内海马损伤密切相关。

复方柴金解郁片抗抑郁作用的实验研究

目的初步探讨复方柴金解郁片的抗抑郁作用。方法建立两种小鼠抑郁模型,即小鼠强迫游泳实验和悬尾实验复制应激行为绝望抑郁模型,五羟色胺酸和利血平诱导药物所致抑郁模型;检测小鼠强迫游泳实验和悬尾实验不动时间,五羟色胺酸诱导的抑郁小鼠甩头次数,利血平诱导的抑郁小鼠体温、眼睑闭合、运动不能差异程度。结果小鼠强迫游泳实验和悬尾实验中,与空白对照组比较,复方柴金解郁片2倍或(1倍)剂量组不动时间明显减少(P<0.05)。在五羟色胺酸诱导的小鼠甩头实验中,与空白对照组比较,复方柴金解郁片2倍剂量组甩头次数明显增加(P<0.05或P<0.01)。在利血平诱导的小鼠抑郁实验中,与空白对照组比较,模型组小鼠眼睑不能睁开1/2和运动不能动物数明显增加,1 h后及4 h后其余各组小鼠体温均有所下降(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,复方柴金解郁片2倍或1倍剂量组小鼠眼睑不能睁开1/2和运动不能动物数明显减少,药后1 h及4 h小鼠体温明显上升(P<0.01或P<0.05)。结论复方柴金解郁片对各种小鼠抑郁模型都有明显的抗抑郁作用。

百事乐胶囊抗抑郁作用的实验研究

目的考察百事乐胶囊的抗抑郁作用。方法采用利血平拮抗,悬尾法和强迫游泳法抑郁模型等方法进行研究。实验随机分为模型组、阳性药组(氟西汀,0.013 g/kg),百事乐胶囊高、中、低剂量组(0.8、0.4、0.2 g/kg),灌胃给药,连续给药22 d,观察百事乐抗抑郁作用。结果百事乐胶囊高、中剂量组均能明显对抗利血平引起小鼠眼睑关闭程度,差异有统计学意义(P<0.05);百事乐高、中剂量组动物活动数明显增多,悬尾不动、游泳不动时间明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。结论百事乐胶囊对实验性抑郁模型有一定的抗抑郁作用。

四神丸对脾肾阳虚泄泻模型大鼠实验研究

目的观察四神丸对脾肾阳虚泄泻模型大鼠的影响。方法将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、得舒特组和四神丸组各10只;除正常组外,其余各组均采用灌服大黄水煎液和肌内注射氢化可的松复制脾肾阳虚泄泻大鼠模型,灌胃14 d后观察各组大鼠的一般状态、腹泻指数和脏器指数。结果模型组大鼠的体质量减轻,腹泻指数增加,胸腺、脾、肾、睾丸各脏器指数均出现不同程度的降低或升高,与正常组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);而四神丸组大鼠的体质量增加、腹泻指数降低,各脏器指数也明显改善,与模型组比较有统计学差异(P<0.05或P<0.01);但四神丸组上述指标与得舒特组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论四神丸能有效缓解脾肾阳虚泄泻模型大鼠症状,具有良好的止泻作用。

番泻叶超微粉体HPLC指纹图谱的研究

目的采用高效液相色谱方法建立番泻叶超微粉体指纹图谱。方法分离的色谱条件为固定相为依利特Hyper-silODS2柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-1%冰醋酸溶液,检测波长为270 nm,体积流量为1 mL/min,柱温为40℃。结果建立了番泻叶超微粉体的HPLC指纹图谱并标定其25个共有峰。结论建立的番泻叶超微粉体指纹图谱,可用来评价番泻叶的整体质量并为进一步研究提供一定的参考依据。

HPLC法同时测定百事乐胶囊中5种成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定百事乐胶囊中金丝桃苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb_1、姜黄素5种有效成分的含量。方法:采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.1%磷酸溶液-乙腈,梯度洗脱;进样量20 mL;流速1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长348 nm(0~25 min),203 nm(26~64 min),425nm(65~95 min)。结果:金丝桃苷、人参皂苷Rg_1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb_1、姜黄素在6.3~31.5μg/mL、97.5~487.5μg/mL、66~330μg/mL、101~505μg/mL、1~5μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9997、0.9995、0.9996、0.9996、0.9997;平均加样回收率均大于95.0%。结论:该方法简便、准确、灵敏度高,稳定性和重现性良好,可为百事乐胶囊的质量控制提供依据。

四神丸治疗肠道疾病的实验研究进展

四神丸是治疗脾肾阳虚型泄泻的经典方剂,临床用于治疗腹泻型肠易激综合征等多种肠道疾病疗效显著,本文通过回顾近十年来四神丸的实验研究发现,其主要集中于止泻、抗炎和肠保护等方面,以期为进一步研究四神丸的作用机制提供有益借鉴,而以病证结合的动物模型为研究载体将是今后中药复方研究的重点所在。

脑泰方抗血小板活化作用的实验研究

目的观察脑泰方对大鼠血小板活化作用的影响,探讨其抗血栓作用机制。方法采用旋转玻璃球法测定血小板粘附率,采用比浊法测定ADP,ACA,COL诱导的大鼠血小板最大聚集率;采用血栓法观察脑泰方对大鼠血栓形成的影响。结果脑泰方能降低血小板粘附率;降低ADP,ACA,COL诱导的大鼠血小板最大聚集率;减短大鼠体外血栓长度、减轻血栓湿重、干重。结论抗血小板活化、抗血栓形成是脑泰方预防、治疗脑梗死的作用机制之一。

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马腺苷A1受体及谷氨酸转运体的影响

目的：研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症模型大鼠海马腺苷A1受体（adenosine A1 receptor,A1R）及谷氨酸转运体（excitatory amino acid transporter-2,EAAT-2）的影响。方法：建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型,并依据体质量随机分为5组：糖尿病并发抑郁症模型组、阳性药组和左归降糖解郁方高、中、低剂量组,每组10只,另取10只SD大鼠作为正常组。各组灌胃给予相应药物,连续4周。生化法检测各组大鼠血糖值,Openfield实验检测大鼠抑郁样行为,ELISA法检测大鼠海马匀浆液谷氨酸含量,免疫组化检测大鼠海马谷氨酸转运体EAAT-2和腺苷受体A1受体（A1R）的表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠血糖显著增加而活动次数明显减少,海马A1R和EAAT-2表达均显著减少,而谷氨酸含量明显增多。给予左归降糖解郁方干预后,模型大鼠血糖和海马谷氨酸含量均显著降低,抑郁行为明显改善,海马A1R和EAAT-2表达显著增多。结论：左归降糖解郁方可有效调控糖尿病并发抑郁症大鼠海马兴奋性神经递质谷氨酸水平,其可能通过激活腺苷A1受体、上调EAAT-2表达,从而减轻糖尿病并发抑郁症的兴奋性神经毒性,进而产生抗抑郁作用。

不同粉体二妙丸HPLC指纹图谱对比研究

目的:分别建立超微粉和细粉二妙丸的HPLC指纹图谱,并对其进行对比研究。方法:采用HPLC对不同粉体形态制备的二妙丸建立指纹图谱,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件"建立标准指纹图谱,对不同粉体二妙丸的指纹图谱进行相似度分析。结果:方法的精密度、重复性及稳定性良好。两种不同粉体形态制备的二妙丸指纹图谱的相似度均大于0.91,两者在共有峰上没明显差别,而峰面积差别明显。结论:该方法稳定准确,建立的HPLC指纹图谱能从整体上反映出二妙丸的化学成分信息,为建立二妙丸质量标准提供参考。

腺苷A1受体激动剂减轻糖尿病并发抑郁症大鼠的认知功能障碍

目的观察腺苷A1受体(A1R)激动剂对糖尿病并发抑郁症大鼠学习记忆功能的影响。方法将大鼠分为对照组、模型组、二甲双胍(Met)组[Met组:灌胃给予二甲双胍(0.18 g/kg) 28 d]和二甲双胍联合腺苷A1受体激动剂(Met+CPA)干预组[Met+CPA组:灌胃给予二甲双胍28 d,于第22天开始腹腔注射CPA(1 mg/kg),注射给药7 d]。观察大鼠血糖水平和学习记忆功能;ELISA检测大鼠海马谷氨酸的含量;用免疫组化法和Western blot检测海马谷氨酸转运体GLT-1和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血糖含量显著升高(P<0.01);学习和记忆功能明显下降(P<0.01);海马中谷氨酸含量明显升高(P<0.01);而GLT-1和BDNF表达显著下降(P<0.01或P<0.05)。与模型组比较,Met组大鼠仅血糖含量显著下降(P<0.01),其余指标均未见显著变化;而Met+CPA组大鼠血糖含量显著下降(P<0.01),认知功能得到明显的改善(P<0.01),海马中谷氨酸含量显著减少(P<0.01),且GLT-1和BDNF表达显著增加(P<0.01或P<0.05)。结论激活腺苷A1受体可有效改善糖尿病并发抑郁症大鼠的认知功能,这可能与其通过减少谷氨酸释放和增加神经营养作用双途径共同减轻神经元兴奋性毒性有关。

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠HPA轴及海马糖皮质激素受体表达的影响

目的:探讨复方中药左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症(diabetes mellitus with depression,DD)大鼠HPA轴及糖皮质激素受体的调控作用,阐明其对海马组织的可能保护机制。方法:采用尾静脉注射STZ联合慢性应激建立DD大鼠模型,并按随机数字表法分为模型组、左归降糖解郁方低、中、高剂量组和阳性药组,同时以正常大鼠为对照组。末次给药后,测定各组大鼠血糖值及抑郁行为,病理切片染色观察大鼠海马组织损伤情况,ELISA试剂盒检测大鼠血浆促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)、促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、皮质酮(corticosterone,CORT)水平,蛋白免疫印迹法(Western-blotting)检测大鼠海马糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)表达。结果:左归降糖解郁方能显著降低模型大鼠的血糖值和抑郁样行为,海马病理损伤情况得以缓解,且血浆ACTH、CORT水平下降,海马GR蛋白表达上升。结论:左归降糖解郁方能明显改善DD大鼠血糖值和抑郁行为,保护海马神经元,其作用可能与上调GR表达密切相关。

超微粉碎技术对苍术粉体理化性质的影响

目的探讨超微粉碎技术对苍术粉体理化性质的影响。方法采用振动磨常温和低温超微粉碎,考察温度对苍术粉体挥发油、苍术素含量及物理性质的影响。结果常温下(20℃)超微粉碎可造成挥发油的损失18.58%,低温(-15℃)粉碎可避免挥发油的损失;与苍术细粉比较,超微粉体红外吸收光谱基本没有改变,低温超微粉碎可较好保留热敏性成分。结论初步表明振动磨低温粉碎可用于苍术超微粉体的制备。