高浓度他克莫司抑制人骨髓间质干细胞增殖及向成骨细胞分化(英文)

目的探讨他克莫司（FK506）对人骨髓间质干细胞（hBMSCs）增殖及向成骨细胞分化的影响。方法 FK506 0.001-5μmo.lL-1处理hBMSCs细胞中,雌二醇0.01μmol·L^-1或咖啡因100μmol·L^-1为阳性对照组,作用24 h后用BrdU掺入法检测细胞增殖,在促成骨细胞分化液中作用8 d后用比色法检测碱性磷酸酶（ALP）活性,作用12 d后用邻甲酚酞络合法检测钙沉积量;通过检测磷酸盐释放量间接反映钙调神经磷酸酶（CaN）活性,Western印迹法检测核心结合因子α1亚基（Cbfα1）表达。结果与DMSO对照组相比,FK506 0.001-0.01μmol·L^-1促进细胞增殖,但对ALP活性及钙沉积量无影响;FK506 0.5-5μmo·lL^-1呈浓度依赖性地抑制细胞增殖,显著抑制ALP活性及减少钙沉积量（P〈0.05）。此外,FK5060.1-5μmo·lL^-1浓度依赖性地降低CaN活性,与相同浓度FK506呈浓度依赖性地下调Cbfα1的表达效应相一致。结论高浓度FK506可通过CaN/Cbfα1通路抑制hBMSCs增殖及向成骨细胞成骨分化。