青藤碱通过调节血红素氧合酶-1表达和自噬抑制脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症

目的:探讨青藤碱对脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症的影响和机制。方法:以小鼠RAW264.7巨噬细胞为研究对象,在有或无血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)抑制剂Znpp处理下,采用青藤碱和/或脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理RAW264.7巨噬细胞。应用Real-time PCR检测细胞炎症因子TNF-α和IL-6 mRNA表达,ELISA检测细胞炎症因子TNF-α和IL-6水平,免疫荧光试验分析细胞自噬情况,Western印迹检测细胞HO-1蛋白表达。结果:与对照组相比,LPS作用后RAW264.7细胞炎症因子TNF-α和IL-6表达和释放增多,自噬相关蛋白LC3绿色荧光聚集,HO-1表达水平升高(P<0.05);与LPS组相比,加用青藤碱处理能减少TNF-α和IL-6表达和释放,进一步促进LC3绿色荧光聚集,增加HO-1水平(P<0.05);用HO-1抑制剂Znpp预处理后,青藤碱对LPS诱导TNF-α和IL-6表达和释放的抑制作用减弱,LC3绿色荧光聚集减少(P<0.05)。结论:青藤碱能减轻LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症,其机制可能与HO-1介导的自噬激活有关,这为青藤碱应用于炎症反应的防治提供了实验基础和理论依据。

大蒜素对脓毒症小鼠急性肝损伤的作用

目的 探讨大蒜素对脓毒症小鼠急性肝损伤的作用及机制。方法 按照随机数字表将8周龄雄性Balb/c小鼠随机分为3组:假手术组、模型组和实验组,每组8只。用盲肠结扎穿刺法建立脓毒症小鼠模型。实验组在造模后用大蒜素(30 mg·kg-1,ip)干预,假手术组和模型组给予等量0. 9%Na Cl。以全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性;酶联免疫吸附法检测肝组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平;以免疫印迹检测肝组织中自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)和Beclin-1的表达。结果 正常组、模型组和实验组的血清GPT分别为(25. 65±4. 26),(195. 54±22. 65)和(95. 28±11. 74) U·L-1;这3组的GOT分别为(7. 42±1. 15),(86. 37±8. 53)和(40. 95±5. 28) U·L-1;这3组肝组织的TNF-α水平分别为(48. 26±10. 35),(213. 86±34. 38)和(103. 27±20. 28)pg·mg-1;这3组的IL-6水平分别为(72. 58±15. 65),(764. 38±75. 37)和(435. 36±54. 27) pg·mg-1;这3组的LC3 II/I相对表达量分别为0. 57±0. 12,1. 59±0. 18和3. 85±0. 45;这3组的Beclin-1的相对表达量分别为0. 46±0. 08,1. 08±0. 15和2. 36±0. 25。以上指标:模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01);实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01)。结论 大蒜素对CLP诱导的肝损伤具有一定的保护作用,其机制可能与增加自噬有关。