目的探讨Eph A2基因表达沉默对胃癌AGS细胞上皮-间质转化的影响机制。方法将对数生长期的胃癌AGS细胞接种于6孔板并分为Eph A2 si RNA组、阴性对照组和空白对照组。采用Eph A2 si RNA转染胃癌AGS细胞,采用实时定量聚合酶链反应检测转染...目的探讨Eph A2基因表达沉默对胃癌AGS细胞上皮-间质转化的影响机制。方法将对数生长期的胃癌AGS细胞接种于6孔板并分为Eph A2 si RNA组、阴性对照组和空白对照组。采用Eph A2 si RNA转染胃癌AGS细胞,采用实时定量聚合酶链反应检测转染细胞Eph A2的表达,采用相差显微镜观察细胞形态的变化,采用Transwell实验检测转染细胞的侵袭能力,应用蛋白质印迹法检测转染细胞E-cadherin和vimentin蛋白的表达。结果 Eph A2 si RNA组的Eph A2 m RNA相对表达量(0.343±0.035)明显低于阴性对照组(0.950±0.036)和空白对照组(0.997±0.065),差异均有统计学意义(P<0.05);Eph A2 si RNA组胃癌AGS细胞呈上皮细胞样,阴性对照组和空白对照组细胞呈间质样细胞;Eph A2si RNA组的侵袭细胞数[(29.1±2.6)个]明显少于阴性对照组[(52.2±2.6)个]和空白对照组[(56.2±4.0)个],差异均有统计学意义(P<0.05);Eph A2 si RNA组E-cadherin蛋白的表达量较阴性对照组和空白对照的E-cadherin蛋白的表达量明显上调,而vimentin蛋白的表达量明显下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论沉默AGS细胞Eph A2的表达能够抑制胃癌细胞由上皮样细胞向间质样细胞转化,降低AGS细胞的侵袭力,上调上皮性标志物E-cadherin的表达,下调间质性标志物vimentin的表达。展开更多
文摘目的探讨Eph A2基因表达沉默对胃癌AGS细胞上皮-间质转化的影响机制。方法将对数生长期的胃癌AGS细胞接种于6孔板并分为Eph A2 si RNA组、阴性对照组和空白对照组。采用Eph A2 si RNA转染胃癌AGS细胞,采用实时定量聚合酶链反应检测转染细胞Eph A2的表达,采用相差显微镜观察细胞形态的变化,采用Transwell实验检测转染细胞的侵袭能力,应用蛋白质印迹法检测转染细胞E-cadherin和vimentin蛋白的表达。结果 Eph A2 si RNA组的Eph A2 m RNA相对表达量(0.343±0.035)明显低于阴性对照组(0.950±0.036)和空白对照组(0.997±0.065),差异均有统计学意义(P<0.05);Eph A2 si RNA组胃癌AGS细胞呈上皮细胞样,阴性对照组和空白对照组细胞呈间质样细胞;Eph A2si RNA组的侵袭细胞数[(29.1±2.6)个]明显少于阴性对照组[(52.2±2.6)个]和空白对照组[(56.2±4.0)个],差异均有统计学意义(P<0.05);Eph A2 si RNA组E-cadherin蛋白的表达量较阴性对照组和空白对照的E-cadherin蛋白的表达量明显上调,而vimentin蛋白的表达量明显下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论沉默AGS细胞Eph A2的表达能够抑制胃癌细胞由上皮样细胞向间质样细胞转化,降低AGS细胞的侵袭力,上调上皮性标志物E-cadherin的表达,下调间质性标志物vimentin的表达。
