脓毒症急性肾损伤大鼠肾小管细胞结构及Beclin1表达的变化

【目的】观察脓毒症急性肾损伤大鼠肾小管细胞自噬微细结构及自噬相关蛋白Beclin-1表达变化。【方法】取18只SD大鼠，其中12只采用盲肠结扎穿孔（Cecalligation and puncture，CLP）制备脓毒症急性肾损伤模型（脓毒症组），6只为假手术组。采用免疫组织化学和免疫印迹技术检测大鼠肾组织Beclin1表达变化，采用光学和透射电镜技术观察两组大鼠肾组织细胞结构的变化。【结果】脓毒症组急性肾损伤24h后，近髓质和髓质外带的近端小管出现大量散在的自噬细胞；自噬细胞皱缩，核染色质固缩边聚，多数自噬颗粒脱落到小管腔内随尿液排出；Beclin1蛋白在脓毒症组肾脏组织中的表达明显高于假手术组。【结论】大鼠脓毒症急性肾损伤24h后，肾组织Beclin1蛋白表达增高，部分近端小管细胞发生自噬。

脂多糖诱导肾小管上皮细胞 HK-2损伤后自噬相关蛋白LC3、p-Akt 、T-Akt 的表达变化及其意义

【目的】探讨脂多糖诱导肾小管上皮细胞HK‐2损伤后自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3（microtubule‐associated protein light chain 3，LC3）Ⅱ、磷酸化蛋白激酶B （p‐Akt）、总蛋白激酶B （T‐Akt）的表达变化及其意义。【方法】采用脂多糖诱导建立肾小管上皮细胞 HK‐2急性损伤模型，采用Western blot定量法检测损伤后不同时间点自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin‐1和Akt的表达；使用不同浓度的P13K抑制剂LY294002预处理 HK‐2细胞1 h后，Western blot检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p‐Akt 、Beclin‐1的表达情况。【结果】自噬相关蛋白LC3Ⅱ在诱导HK‐2细胞损伤3 h后表达开始逐渐增加，而Beclin‐1无明显变化，p‐Akt表达于损伤后3 h达到高峰，此后逐渐恢复到正常水平；使用P13K抑制剂LY294002预处理 HK‐2后，自噬相关蛋白LC3Ⅱ和Beclin‐1的表达上调、p‐Akt显著下调。【结论】脂多糖导致肾小管上皮细胞 HK‐2损伤后可诱导自噬发生，且P13K／Akt信号通路在其中可能发挥调节作用。