脂联素诱导人成骨细胞的分化

背景：研究表明，脂联素参与骨代谢调节，但具体作用途径尚不明确。目的：实验拟验证脂联素在成骨细胞分化中的作用。设计、时间及地点：对比观察实验，于2006—01／2007—06在中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所实验室完成。材料：正常成人（35—55岁）髂前上棘松质骨用于细胞培养，由湘雅医院和湘雅二医院提供。方法：外科手术取正常成人髂前上棘松质骨进行细胞培养。用3，10，30mg／L脂联索干预48h，或用30mg／L脂联素干预12～18h。主要观察指标：反转录-聚合酶链反应及免疫印迹检测体外培养成骨细胞脂联素受体的表达。放射免疫测定法测定碱性磷酸酶及骨钙索的表达。茜素红染色后显微镜下观察培养16，22d矿化结节形成。结果：①成骨细胞在mRNA及蛋白水平均检测到脂联紊受体1表达。②脂联素能够促进碱性磷酸酶活性增高及骨钙素的分泌，并呈时间剂量依赖性。脂联素诱导骨钙索分泌呈剂量与时间依赖性。③脂联索干预可促进人成骨细胞矿化结节生成，与16d相比，22d矿化结节增多，颜色加深。结论：脂联素可诱导人成骨细胞分化，该作用具有时间和剂量依赖性。

甲状旁腺激素对人成骨样细胞膜型基质金属蛋白酶1表达的调控

背景:甲状旁腺激素是骨代谢的重要调节因子,膜型基质金属蛋白酶1在骨吸收的调控中起重要作用。目的:观察甲状旁腺激素对人成骨样MG-63细胞膜型基质金属蛋白酶1表达的影响。设计、时间及地点:观察对比实验,于2001-03/2002-07在中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所实验室完成。材料:人成骨样MG-63细胞株,甲状旁腺激素(1～34)。方法:分别应用1,10,100nmol/L的甲状旁腺激素(1～34)干预MG-63细胞24h;或分别用10nmol/L甲状旁腺激素(1～34)干预MG-63细胞2,6,24,48h。每干预组设3个平行样本,重复3次。主要观察指标:采用Northern杂交法检测膜型基质金属蛋白酶1 mRNA表达水平;Western杂交法检测膜型基质金属蛋白酶1蛋白表达水平。结果:①1,10,100nmol/L的甲状旁腺激素(1～34)对MG-63细胞膜型基质金属蛋白酶1 mRNA及蛋白的表达有抑制作用,呈剂量依赖性(P<0.05)。②10nmol/L的甲状旁腺激素(1～34)在干预2～48h内对膜型基质金属蛋白酶1 mRNA及蛋白的表达有抑制作用,呈时间依赖性(P<0.05)。结论:甲状旁腺激素具有抑制成骨样细胞膜型基质金属蛋白酶1表达的作用,此可能为甲状旁腺激素诱导骨吸收的作用途径之一。