湖南地区5018例地中海贫血基因突变类型的分析

目的:了解湖南地区地中海贫血基因突变类型及其分布特征,更好的为本地区地中海贫血的产前筛查和产前诊断提供参考依据,降低出生缺陷。方法:选取2017年6月至2018年12月在湖南省妇幼保健院进行婚检、孕检或贫血查因的5018例患者,采用反向斑点膜条杂交法(RDB)同时检测α地中海贫血常见6种基因型和β地中海贫血常见17种点突变,对检测结果进行统计分析。结果:共检出α地中海贫血基因突变携带者889例(55.9%),其中静止型α地中海贫血385例,轻型α地中海贫血488例,Hb H病16例,以--^SEA/αα基因型最常见。确诊β地中海贫血基因突变携带者664例(41.7%),663例(99.8%)为杂合子,以IVS-Ⅱ-654、CD41-42、CD17为主,1例(0.2%)为复合杂合突变。确诊α地中海贫血复合β地中海贫血携带者38例(2.4%)。结论:湖南地区地中海贫血的基因突变构成比具有区域性特征,α地中海贫血以--^SEA/αα基因型为主;β地中海贫血以IVS-Ⅱ-654、CD41-42和CD17为主要突变类型;αβ复合型地中海贫血的频率较高。

7例完全型雄激素不敏感综合征患者的临床及遗传学分析

目的:探讨完全型雄激素不敏感综合征(CAIS)患者的临床和分子遗传特征。方法:收集7例CAIS患者及家族相关成员的临床资料,提取外周血全基因组DNA,用特异性引物-聚合酶链反应(PCR)扩增AR基因的8个外显子,扩增产物Sanger测序后与基因库中正常人的序列进行比对,查找可能存在的致病突变。应用Mutation taster、PolyPhen-2等生物信息学软件预测突变对蛋白功能的影响。结果:7例CAIS患者的AR基因均检测到突变,并且在家系中共分离,其中有4个突变未报道过:p.Y764N、p.Q876X、p.A356Efs*123、p.S704R。3例行腹腔镜探查术及性腺活检,病理检查结果证实性腺为睾丸。结论:CAIS患者常因原发闭经就诊而被发现,多数存在异常性激素水平,家系中常有多例患者,呈X连锁隐性遗传模式。AR基因的检测有助于CAIS患者的确诊并有助于CAIS家庭的生殖咨询。

白化病的分子遗传学研究进展

白化病是一类罕见的遗传性疾病,具有特征性的视觉系统缺陷,表现为视力差,并伴发不同程度的色素缺失,其色素缺失可累及眼睛、皮肤和毛发[即眼皮肤白化病(OCA)]或仅累及眼睛[即眼白化病(OA)]。2013年来,白化病的分子遗传学领域取得重大进展,陆续定位了3个新的OCA位点(OCA5、OCA6和OCA7),并确定了2个OCA相关基因(C10orf11和SLC24A5)。

4063例叶酸代谢关键酶基因多态性特点及其与同型半胱氨酸的相关性

目的探讨备孕夫妇叶酸代谢酶基因多态性分布特征及其与同型半胱氨酸(Hcy)的关系,为指导个体化叶酸增补方案提供理论依据。方法随机抽取2020年7月至2022年6月符合生育政策并计划怀孕的夫妇基本资料及外周血,最终4063例纳入研究,采集其外周血测定5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)rs1801133、rs1801131位点和甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)rs1801394位点的基因型及血清Hcy水平,进一步展开分析。结果本研究受检人群叶酸代谢酶基因多态性分布符合HW遗传平衡,其中MTHFR rs1801133和rs1801131位点存在连锁不平衡(D’=0.98,r2=0.14)。MTHFR基因rs1801133位点的CC、CT及TT基因型频率分别为42.31%、44.47%和13.22%;MTHFR基因rs1801131位点的AA、AC及CC基因型频率分别为62.15%、33.20%和4.65%;MTRR基因rs1801394的AA、AG及GG基因型频率分别为55.06%、38.59%和6.35%。不同叶酸代谢酶基因型/叶酸代谢障碍风险人群之间Hcy水平差异无统计学意义(P>0.05);男性在相同叶酸代谢酶基因型/叶酸代谢障碍风险下Hcy水平更高(P<0.001);35岁以下MTHFR rs1801133位点CC基因型、rs1801131位点AC和CC基因型的人群Hcy水平更高(P<0.05)。结论桃源县叶酸代谢酶基因多态性分布具有自身特点,未来需要结合遗传因素和环境因素格外关注备孕期男性及非高龄人群(<35岁)并进行叶酸补充指导和监测,这可能成为进一步降低新生儿出生缺陷的重要途径。

湖南省地中海贫血不同筛查模式的成本效果分析

目的对国内5种常见的地中海贫血(简称地贫)筛查模式以及基因筛查模式的成本和应用效果进行分析,筛选出地贫最优筛查模式,为湖南省地贫防控项目的实施提供依据。方法选取2020年6月至2021年4月湖南省14个市及自治州的12971对夫妻作为研究对象,以基因检测结果作为确诊依据,对血常规、血红蛋白电泳结果进行分析,采用阳性预测值、阴性预测值、约登指数和成本效果等分别评价平均红细胞体积(mean corpuscular volume,MCV)界值分别为80 fl和82 fl标准下5种地贫筛查模式的筛查效能,并通过控制血常规、血红蛋白电泳价格,使用敏感性分析测算基因筛查模式可行性。5种地贫筛查模式分别为:模式一:女方进行血常规检测,若为阳性,则配偶进行血常规检测,若配偶为阳性,则夫妻双方进行地贫基因检测;模式二:夫妻双方进行血常规与血红蛋白电泳筛查,若一方或双方任一结果阳性,则夫妻双方进行地贫基因检测;模式三:夫妻双方进行血常规检测,若双方任一阳性,则双方进行血红蛋白电泳检测,若双方任一阳性,则夫妻双方进行地贫基因检测;模式四:女方进行血常规与血红蛋白电泳筛查,若任意一项为阳性,则女方进行地贫基因检测,若基因检测结果阳性,则配偶进行地贫基因检测;模式五:夫妻双方进行血常规检测,若双方任一阳性,则双方进行血红蛋白电泳检测,若双方血红蛋白电泳检测结果均为阳性,则夫妻双方进行地贫基因检测。基因检测模式:女方进行地贫基因检测,若为阳性,则配偶进行地贫基因检测。结果当MCV<80 fl时,5种地贫筛查模式的约登指数分别为0.551、0.639、0.898、0.555、0.356;当MCV<82 fl时,分别为0.549、0.629、0.851、0.548、0.356。采用MCV<80 fl作为血常规筛查指标时,5种筛查模式漏诊率分别为44.44%、0.00、0.00、18.52%、62.96%,成本效果分别为21709元/对、250939元/对、76870元/对、138463元/对、92860元/对。敏感性分析显示,当基因检测价格低于55元时,基因检查模式成本效果低于模式三。结论MCV<80 fl可考虑作为湖南省血常规筛查阳性判断标准,模式三(即夫妻双方进行血常规检测,若双方任一阳性,则双方进行血红蛋白电泳检测,若双方任一阳性,则夫妻双方进行地贫基因检测)成本效果最优。随着基因检测价格的下调,基因筛查模式有一定的优势。

健康教育对苯丙酮尿症患儿治疗依从性的影响

目的分析健康教育对苯丙酮尿症患儿治疗依从性的影响。方法选取医院2013年1月至2019年3月收治的苯丙酮尿症患儿60例,按饮食和用药指导方式的不同分为常规照看组与健康教育组,各30例。两组患儿均给予常规护理,健康教育组患儿加用健康教育护理干预模式。结果护理干预结束后,健康教育组患儿的合理喂养率及按时按量服药依从性分别为100.00%和93.33%,均显著高于常规照看组的43.33%和56.67%(P<0.05);健康教育组患儿护理完成半年后的血浆苯丙氨酸浓度及血清酪氨酸质量浓度分别为(0.32±0.05)mmol/L和(8.74±1.33)μg/mL,均显著高于常规照看组的(0.56±0.08)mmol/L和(9.39±1.05)μg/mL(P<0.05)。结论在苯丙酮尿症患儿的治疗中,采用健康教育模式比单一的常规护理更能提升患儿的护理效果与治疗效果,改善预后,同时提高患儿家属对疾病的认知,改善患儿治疗的依从性,控制疾病发展,帮助其尽快恢复,提升生活质量。

湖南省565 182例串联质谱新生儿疾病筛查分析

目的分析湖南省串联质谱新生儿遗传代谢病筛查情况、基因突变特点及随访结果。方法采集2013年3月至2017年9月湖南省565182例活产新生儿足底血,采用非衍生化串联质谱法,开展氨基酸(AAs)、有机酸(OAs)、脂肪酸β氧化代谢障碍疾病(FAODs)新生儿筛查。筛查阳性患儿召回复查,确诊患儿进行相应治疗并随访。结果确诊遗传代谢病(IMDs)107例,总发病率为1∶5282,其中FAODs 65例(1∶8695),AAs 29例(1∶19489),OAs 13例(1∶43476)。排前4位的IMDs为原发肉碱缺乏症(PCD)(44例)、高苯丙氨酸血症(HPA)(17例)、短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(SCADD)(12例)和希特林蛋白缺乏症(NICCD)(6例),其他疾病少见。PCD相关SLC22A5基因热点突变c.51C>G(25.3%)、c.1400C>G(23.0%)、c.760C>T(13.8%);HPA相关PAH基因热点突变c.728G>A(22.2%)、c.721C>T(14.8%);SCADD相关ACADS基因热点突变c.1031A>G(38.9%);NICCD相关SLC25A13基因热点突c.851_854delGTAT(50.0%)。其他IMDs例数少,热点突变暂不明确。107例患儿随访(26.1±5.6)个月,7例死亡,4例智力发育落后,余96例生长发育正常。结论湖南省IMDs不罕见,早筛查、早干预可改善患儿预后。

2015年湖南省贫困农村地区6～8月龄婴儿辅食添加率相关因素

目的研究贫困农村地区6~8月龄婴儿辅食添加现状及其相关因素。方法2015年8月在湖南省武陵山区和罗霄山区30个贫困县按乡级概率规模抽样(PPS)方法抽取1449名农村6~8月龄婴儿,采用问卷调查婴儿过去24 h喂养情况、基本信息和家庭情况等,按WHO《婴幼儿喂养评估指标》要求计算6~8月龄婴儿辅食添加率;采用多因素非条件Logistic回归模型分析影响6~8月龄婴儿辅食添加的相关因素。结果 6~8月龄婴儿辅食添加率为95.4%(1382/1449)。多因素分析显示,婴儿民族为土家族(OR=2.32,95%CI 1.55~3.47)以及主要看护人喂养知识不合格(OR=1.39,95%CI 1.10~1.75)是影响6~8月龄婴儿辅食添加的危险因素。结论多数湖南贫困农村地区婴儿在6~8月龄时即添加了辅食;土家族、主要看护人辅食喂养知识不合格的婴儿是6~8月龄仍未添加辅食的高危人群。

罕见的4q13.1-13.3微缺失导致患者智力低下及生长发育迟缓表型

目的对1例智力低下、生长发育迟缓及语言发育障碍患儿进行细胞及分子遗传学分析,探讨基因型与表型的关系。方法应用G显带技术分析患儿及其父母的外周血染色体,用单核苷酸多态微阵列芯片(SNP-Array)对患儿进行全基因组拷贝数变异分析,并用荧光原位杂交技术(FISH)验证SNP-Array结果。结果G显带核型分析检测提示患儿核型为46,XY,t(4∶15)(p14;q26.1),高密度SNP-array芯片检测显示患儿在4q13.1-13.3存在11.6 Mb的微缺失;父母亲外周血核型分析未见异常。结论经过SNP-array结合G显带和FISH技术有助于发现染色体微缺失以及进一步分析该综合征表型-基因型关系,为家系再次生育时进行产前诊断提供了可靠的遗传学证据。

5号染色体三体、嵌合三体及单亲二体的临床特征综述

5号染色体属于亚中着丝粒染色体,通常可因亲代生殖细胞减数分裂后期同源染色体不分离,或减数分裂末期和有丝分裂后期姐妹染色单体不分离导致三体或嵌合型三体。完全型5号染色体三体、嵌合型三体及单亲二体[uniparental disomy 5,UPD(5)]无论是在产前胎儿还是活产儿中均是极罕见的。在胚胎发育的不同时期及活产儿生长发育过程中,5号染色体异常的发生时间、发生部位、发生率所导致的临床结局存在异质性,表型可从正常到严重异常。本综述结合既往的文献报道及本单位的数据,对完全型5号染色体三体、嵌合型5号染色体三体、5号染色体单亲二体的产生机制、发生率、临床表型、相关治疗、预后及再发风险等进行总结,以期对5号染色体产前遗传学诊断及遗传咨询提供帮助。

神经发育障碍420例遗传病因学分析

目的探讨神经发育障碍(NDD)患儿的遗传学病因,为其遗传咨询、家庭的再发风险评估及产前诊断提供理论依据。方法根据NDD的诊断标准,收集2016年1月至2018年12月来湖南省妇幼保健院小儿康复科就诊的420例NDD患儿,行染色体核型分析和染色体微阵列(CMA)分析。结果420例NDD患儿中,14例(3.33%,14/420例)染色体异常,均为全面性发育迟缓/智力障碍(GDD/ID),其中13例通过进一步CMA明确了染色体断裂点位置和缺失或重复的片段范围;共在61例(14.52%,61/420例)患儿中发现致病性拷贝数变异(CNVs)。在这些致病性CNVs中,包括已知的综合征31例(50.82%,30/61例),涉及Angelman/Prader-Will综合征(8例)、Williams综合征(3例)、Phelan-McDermid综合征(3例)等16种综合征以及30例具有临床意义的致病性CNVs。另外还结合荧光原位杂交技术(FISH)诊断了1个因10q26与12p13隐匿性重排引起的智力低下家系。结论染色体异常和基因组相关的微缺失重复是NDD患儿重要的遗传学病因,联合应用核型分析、CMA和FISH技术可为NDD患儿提供明确的病因诊断,对患儿的治疗及其父母再生育指导具有重要临床意义。

两例携带idic（Y）（p）女性表型性发育异常患者的遗传学分析

目的对2例携带．dic（Y）（p）女性表型的性发育异常患者进行遗传学分析，探讨其临床表现与核型的相关性。方法应用常规染色体G显带分析患者的核型，荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）确定核型中嵌合体的比例，通过Sanger测序检测外周血中的SRY基因。结果常规G显带核型分析显示例1核型为mos．45，X[38]／46，X，＋mar[151]／47，XY，＋mar[5]／47，X，＋mar×2[2]／46，XY[4]。FISH检测发现其核型中存在12种细胞系，部分细胞系含有SRY基因，其中标记染色体为idic（Y）（p）。未发现SRY基因突变。例2核型为mos．45，X[25]／46，X，＋mar[35]。FISH检测证实标记染色体为未携带SRy基因的idie（Y）（p）。结论携带idie（Y）（p）的患者核型不稳定。女性患者有身材矮小和女性第二性征发育不全等特征。核型分析结合FISH检测可以进一步精确确定idic（Y）的断点，识别复杂的嵌合体类型，可为患者的诊断及预后分析提供依据。

一个MECP2重复综合征家系的遗传学病因分析

目的对1个以智力发育落后、肌张力低下为主要表现的家系进行遗传学分析,明确其遗传学病因。方法抽取该家系两例男性患者及其家系成员的外周血,提取基因组DNA;先对1例患儿行拷贝数变异测序(copy number variation sequencing,CNV-seq),然后用荧光定量PCR验证重复片段;随后对另1例患者及其家系成员行CNV-seq或单核苷酸多态性徽阵列(single nucleotide polymorphism array,SNP array)检测。结果2例男性患者均表现为严重肌张力低下,运动、智力发育落后,特别是语言发育障碍。CNV seq及SNP array分析结果提示2例男性患者存在染色体Xq28重复,片段大小分别为0.26 Mb及0.42 Mb,重复区间内包含MECP2基因,确诊为MECP2重复综合征,CNV seq验证显示先证者母亲及一姐均存在Xq28区域重复,为MECP2重复女性携带者,1名正常男性家系成员不携带Xq28区域重复。结论染色体Xq28区域重复可能为该家系智力发育落后、肌张力低下患者的遗传学病因,确诊为MECP2重复综合征。

一例21q部分三体胎儿的无创产前检测及遗传学诊断

目的对1例无创产前检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)阳性病例进行产前诊断,明确其染色体异常,避免严重出生缺陷患儿出生。方法应用高通量测序技术检测孕妇外周血胎儿游离DNA拷贝数,采用常规G显带核型分析和单核苷酸多态性微阵列芯片(single nucleotide polymorphism array,SNP-array)技术对胎儿行染色体拷贝数分析。结果NIPT提示胎儿21号染色体高风险,胎儿羊水SNP-array分析显示4q34.1q35.2重复15.018 Mb和21号染色体21q11.2q21.1重复7.678 Mb,综合胎儿G显带核型分析、SNP-array结果和父母G显带核型分析提示胎儿携带一条母源性4q和21q易位所产生的衍生染色体,核型为47,XN,+der(21)t(4;21)(q34.1;q21.1)。结论NIPT对于染色体部分重复有一定的研究意义,联合应用多种检测技术尤其是SNP-array对于诊断21部分三体、明确基因型和表型的对应关系至关重要。

一例智力低下伴尿道下裂患儿的遗传学分析

目的对1例智力低下患儿进行遗传学诊断,明确其病因并为家系的遗传咨询和产前诊断提供依据.方法应用单核苷酸多态微阵列芯片(single nucleotide polymorphism-based arrays,SNP-array)对患儿及其父母行基因组DNA扫描分析,结合G显带核型分析及荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)确诊患儿染色体异常片段的来源.结果SNP-array芯片检测显示患儿在2q33.3q36.3区间存在25.7Mb的重复,综合G显带核型分析和FISH检测提示患儿母亲核型为46,XX,ish ins(11;2)(p15;q33q36),患儿携带1条由母亲近2q和11p末端插入易位形成的11号衍生染色体,核型为46,XY,ish der(11)ins(11;2)(p15;q33q36)mat.结论通过SNP-array、G显带和FISH技术诊断本家系的插入易位,明确了患儿病因,为家系的遗传咨询和产前诊断提供了依据.

三例胎儿游离DNA检测提示16-三体高风险孕妇的产前细胞和分子遗传学分析

目的探讨胎儿游离DNA(cell-free fetal DNA,cffDNA)检测对13-、18-和21-三体以外的常染色体非整倍体的检测效能及其产前诊断策略。方法收集2019年3月至2020年3月在湖南省妇幼保健院医学遗传科就诊的3例cffDNA检测提示16-三体高风险孕妇的病例资料,回顾分析胎儿羊水常规G显带核型分析和单核苷酸多态性微阵列芯片(single nucleotide polymorphism array,SNP-array)以及胎盘和/或皮肤低深度全基因组拷贝数变异测序(copy number variation sequencing,CNV-seq)技术结果。结果(1)病例1、2和3 cffDNA检测均提示16-三体高风险(Z值分别为20.57、24.88和17.87)。(2)病例1和2胎儿羊水常规G显带核型分析未见异常,羊水SNP-array检测病例1提示在16p13.3p12.3和16q22.1q24.3区域分别存在19.2和23.0 Mb杂合度丢失,病例2在16q22.3q24.3区域存在16.0 Mb杂合度丢失;病例3胎儿羊水核型为47,XY,+16[3]/46,XY[97],羊水SNP-array未见5 Mb以上杂合度丢失以及拷贝数变异。(3)病例1和2合并胎儿生长受限,病例3胎儿宫内死亡,均引产。3例病例胎盘胎儿面/母体面中心组织CNV-seq检测均提示胎盘为嵌合型16-三体,16号染色体拷贝数分别为2.56/2.70、2.73/2.82、2.80/2.81。病例1和2引产胎儿皮肤组织CNV-seq检测均提示未见拷贝数变异。结论cffDNA检测对13-、18-和21-三体以外的16-三体具有一定检测效能;cffDNA检测提示16-三体高风险结果行产前诊断核型分析同时,建议结合SNP-array排除低比例嵌合和杂合度丢失。

性发育异常遗传病因学研究新进展

性腺与性发育是一个连续而有序的过程。正常性腺的发育主要取决于两个因素:染色体(XY,XX)和调节宫内胎儿性腺形成、分化和发育的相关因子。一旦在这个过程出现异常,将会导致性发育异常疾病的发生。本文对性发育异常的定义、性发育的遗传基础、常见性发育异常疾病的分类和临床表现进行概述,重点介绍了几个相关致病基因。

40例世界首报外周血染色体异常核型的遗传学分析及其临床研究

目的通过对8852例有反复流产、畸胎、不孕症、先天智力低下等疑染色体异常患者做了外周血染色体核型分析,探讨染色体异常核型与临床疾病之间的关系。方法染色体制备采用外周血淋巴细胞培养法,应用G、C等显带技术。结果共检出异常核型239例(不含多态变异),异常率2.9%。其中40例为世界首报染色体异常核型。结论染色体异常是导致自然流产、智力低下、闭经及胎儿畸形的重要原因,高危孕妇应进行产前筛查及产前诊断,将有助于减少先天缺陷儿的出生,具有重要的临床意义。

湖南地区α地中海贫血基因突变研究

目的调查湖南地区育龄人群中α地中海贫血(α地贫)基因的突变类型及其构成比。方法采集血液学筛查阳性个体及其配偶样本,应用裂口-PCR以及PCR结合反向斑点杂交法进行缺失型和非缺失型α地贫基因分析。结果在1550例检测对象中,314例检测到携带α地贫基因,共计325条突变单体,各突变单体频率为--SEA 54.46%,-α3.7 23.69%,αα^(CS) 8.62%,-α4.2 6.46%,αα^(QS) 4.00%,ααWS 2.15%。结论湖南地区α地贫基因突变构成比具有区域性特征,需在地贫的预防干预中应给予足够重视。

复杂先天性心脏病、多指/趾畸形综合征家系的遗传学分析

目的对1例两次超声提示胎儿复杂先天性心脏病、多指/趾的病例进行遗传学诊断,探讨其发病机制,为遗传咨询及指导生育提供依据。方法应用全外显子测序及Sanger测序验证对该家系进行遗传学诊断。结果单核苷酸多态性微阵列分析未发现致病性拷贝数变异。全外显子测序及Sanger测序验证证实胎儿携带WDPCP基因c.552_553del和c.76-2A>C复合杂合变异,分别来自其父亲和母亲。结论全外显子测序技术在产前超声异常胎儿的诊断中具有重要的临床价值,可为遗传咨询及指导生育提供依据。