低促性腺激素性性功能不全妇女IVF-ET治疗中的方法及疗效分析

目的:分析低促性腺激素性性功能不全(HH)患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的治疗方法及疗效分析。方法:回顾性分析了接受IVF-ET治疗的40例HH患者共60个IVF-ET周期,收集同期因输卵管因素和/或男方因素接受IVF-ET治疗的134例患者共140个周期的病历资料作为对照组。对这两组患者进行回顾性分析,对治疗方法、临床结局进行分析总结。将HH患者分成妊娠组与未妊娠组,比较各组间差异。结果:经控制性超促排卵(COH)治疗后,发现卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的使用量及使用天数HH组都明显高于对照组(FSH:55.0±2.5支vs 36.9±1.0支;LH:28.3±1.7支vs 5.9±0.2支;治疗天数:13.8±0.4dvs 10.4±0.1d;P均<0.05)。治疗后卵泡刺激素(FSH)、雌激素(E2)、孕酮(P)的水平无统计学差异。获卵数、优胚数及冻胚数等无统计学差异,妊娠结局在两组间也无统计学差异(妊娠率:42.1%vs 53.6%;流产率:16.7%vs 26.7%)。HH患者中比较妊娠与未妊娠后发现在年龄、体重指数和药物使用剂量及天数方面无明显差异,而妊娠组获卵数(6.6±0.5个vs 8.8±0.7个)、成熟卵母细胞(MII)数(5.5±0.5个vs 7.3±0.7个)及受精率(4.9±0.5%vs 6.7±0.7%)妊娠组低于未妊娠组,有统计学差异。结论:HH患者处于长时间促性腺激素缺乏状态,IVF-ET的治疗过程中药物使用剂量更多、时间更长,但妊娠结局与正常女性相似。

自然妊娠后黄体功能不足的治疗及妊娠结局

正常育龄妇女月经中期下成熟卵泡排卵,残存的卵泡结构形成黄体分泌雌、孕激素,为胚胎的种植和生长提供必要的条件。正常情况下不需要保胎治疗,但有异常状态时会用药物保胎。自然妊娠后性激素保胎治疗中的很多问题一直存在争议。本文回顾性分析了在临床中接受孕激素保胎治疗的患者,就用药过程中的问题进行分析探讨。1对象与方法1.1研究对象收集2010年7月-2014年10月在北京协和医院妇科门诊接受黄体支持治疗的患者共233例,

母鼠长期低剂量锰染毒对子代大鼠睾丸氧化应激状态及生精细胞凋亡的影响

目的探讨氯化锰长期低剂量染毒对子代大鼠睾丸中氧化应激状态及生精细胞凋亡的影响。方法健康雌性SD大鼠32只随机分为对照组,低、中、高剂量组,每组8只。锰染毒组分别腹腔注射2、4和8 mg/kg MnCl_2·4H_2O,对照组腹腔注射等容生理盐水,1次/d,5 d/周,共8周。与正常雄性SD大鼠交配受孕后,雌鼠在妊娠期和哺乳期继续染毒。每组随机取8只12周龄子代雄性大鼠断头处死后取材,HE染色观察睾丸生精小管结构;q RT-PCR、免疫组织化学、Western blot分别检测叉头蛋白转录因子O 3a(Fox O3a)、与Bcl-2相互作用的细胞死亡调节子(Bim)、半胱天冬酶9(Caspase-9)m RNA和蛋白的表达;TUNEL技术检测生精细胞凋亡。结果 (1)HE染色可见各锰染毒组睾丸生精小管呈现不同程度的形态学改变。随着锰染毒剂量的增加,生精细胞层数逐渐减少,各级生精细胞排列紊乱、数量减少或缺如,管腔内成熟的精子数目减少;(2)中、高剂量组精子密度、精子活动率降低,而精子畸形率上升(P<0.05);(3)各锰染毒组大鼠睾丸组织内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性随锰染毒剂量的增加而降低(P<0.05);而睾丸组织内丙二醛(MDA)含量和活性氧(ROS)水平随锰染毒剂量的增加逐渐升高(P<0.05);(4)在m RNA和蛋白水平,Fox O3a的表达随锰染毒剂量的增加逐渐上升(P<0.05);低剂量组Bim m RNA表达量未见变化,但在中、高剂量组则降低,而细胞死亡调节因子表达量则随锰染毒剂量的增加逐渐增加(P<0.05);(5)Caspase-9 m RNA和蛋白表达量在各锰染毒组均升高,且随锰染毒剂量的增加逐渐增加(P<0.05);(6)各锰染毒组大鼠均可见生精细胞凋亡,其凋亡指数高于对照组,且随锰染毒剂量的增加而上升(P<0.05)。结论长期低剂量锰染毒可抑制子代大鼠睾丸内抗氧化酶活性或(和)增加MDA含量,提高睾丸组织ROS水平,促进Fox O3a和Bim表达,启动Caspase-9信号通路,最终导致子代大鼠生精细胞的凋亡。

长期低剂量锰染毒对子代大鼠生精细胞细胞周期阻滞和凋亡的影响

目的探讨氯化锰长期低剂量染毒对子代大鼠生精细胞细胞周期及细胞凋亡的影响。方法健康雌性SD大鼠32只随机分为对照组和锰染毒组,每组8只。锰染毒组腹腔注射2、4和8 mg/kgMnCl_2·4H_2O,对照组腹腔注射等容生理盐水,1次/d,5次/周,共8周。与正常雄性SD大鼠交配受孕后,雌鼠在妊娠期和哺乳期继续染毒。每组随机取8只12周龄子代雄性大鼠断头处死后取材,HE染色观察睾丸生精小管结构;Western Blot检测FOXO3A、P16、P21、CDK2、CDK4、CDK6、BIM和Caspase-9的表达;TU-NEL法检测生精细胞凋亡。结果随锰染毒剂量的增加,生精小管呈现生精细胞层数减少、生精细胞排列紊乱、数量减少等变化;随锰染毒剂量的增加,睾丸组织FOXO3A的表达逐渐上升;P16、P21表达量逐渐增加;CDK2、CDK4则逐渐降低,CDK6的表达未见明显改变;BIM、Caspase-9表达及生精细胞凋亡指数均随锰染毒剂量的增加逐渐增加。结论长期低剂量锰染毒可能通过诱导FOXO3A表达,引起子代大鼠生精细胞的细胞周期阻滞和细胞凋亡。

孕酮回植激活Akt/GSK3β信号通路逆转月经发生

目的探讨在孕酮撤退月经模型小鼠月经发生的关键时期前,回植孕酮对蛋白激酶B/糖原合成激酶3β(Akt/GSK3β)信号通路的影响。方法 30只成熟去势雌性C57BL/6J小鼠在建成小鼠孕酮撤退月经模型的基础上,随机分为3组:孕酮撤退后12h组(12h组)、孕酮撤退后16h组(16h组),以及在孕酮撤退后12h回植孕酮皮埋管4h组(回植孕酮组),每组10只。通过qRT-PCR法检测子宫内膜组织中Akt、GSK3βmRNA表达,Western blotting和免疫组织化学检测总Akt(t-Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)(Ser473)和p-GSK3β(Ser9)蛋白的表达。结果与12h组相比,回植孕酮组和16h组中Akt mRNA表达显著下降(P均<0.05),而回植孕酮组和16h组无显著性差异(P>0.05);12h组的GSK3βmRNA表达量显著高于回植孕酮组和16h组(P均<0.05)。与12h组相比,p-Akt、p-GSK3β蛋白在回植孕酮组表达量显著增高(P均<0.05);而16h组子宫内膜组织中p-Akt、p-GSK3β蛋白表达量亦显著低于12h组和回植孕酮组(P均<0.05)。免疫组化结果显示,p-Akt和p-GSK3β蛋白在小鼠子宫组织中表达分布呈现相似的模式,主要广泛散在表达于蜕膜化区域的基质细胞及腺上皮和腔上皮细胞中,在蜕膜化区域周边稍有集中分布呈带的趋势。结论在月经发生关键时期之前回植孕酮可能通过非转录机制快速激活Akt/GSK3β信号通路及其下游级联反应,从而逆转月经发生。

精子DNA损伤对IVF-ET/ICSI助孕患者妊娠结局的影响

目的探讨精子DNA损伤对IVF-ET/ICSI患者妊娠结局的影响。方法纳入2019年8月至2020年9月在娄底市中心医院行IVF-ET/ICSI患者63周期,根据DFI的高低分为三组,A组:DFI<25%(n=34),B组:25%≤DFI≤35%(n=18),C组:DFI>35%(n=11),比较三组精液常规分析(禁欲时间、精子浓度、总活力、PR%)及正常受精率、卵裂率、可利用胚胎率、优质胚胎率、囊胚形成率、着床率与临床妊娠率的差异。结果三组一般资料(男女双方年龄、BMI)比较,差异无统计学意义(P>0.05);A组和B组禁欲时间及精子浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05),C组精子总活力及PR%低于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05);相关性分析表明,精子DFI与总活力、PR%呈负相关(r分别为-0.362、-0.290,P<0.05);精子DFI与禁欲时间、精子浓度无相关性(P>0.05);三组正常受精率、卵裂率及可利用胚胎率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);B组优质胚胎率、囊胚形成率均低于A组,差异有统计学意义(P<0.05);C组优质胚胎率、囊胚形成率、着床率及临床妊娠率均低于A组,差异有统计学意义(P<0.05);其余各组各指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论精子DNA损伤与精子总活力、PR%呈负相关性;精子DNA损伤增加可能会导致IVF-ET/ICSI患者着床率和临床妊娠率下降。

长期低剂量锰染毒对子代大鼠睾丸生精细胞线粒体状态和细胞凋亡的影响

目的探讨长期低剂量氯化锰染毒对子代大鼠睾丸生精细胞线粒体形态和凋亡的影响。方法健康雌性SD大鼠32只分为对照组、低、中、高剂量组。腹腔注射2、4和8mg/kg MnCl2·4H2O或生理盐水,1次/天,5天/周,共8周,并在妊娠期和哺乳期继续染毒。每组8只12周龄子代大鼠断头处死后,观察睾丸生精小管结构和生精细胞线粒体形态、视神经萎缩蛋白1(Opa1)、动力相关蛋白1(Drp1)、半胱氨酸蛋白酶9(Caspase9)表达和细胞凋亡情况。结果随锰染毒剂量增加,生精细胞层数逐渐减少,细胞排列紊乱、数量减少;中、高剂量组可见线粒体分离、肿胀等表现;中、高剂量组Opa1显著降低(P<0.05,P<0.01),Drp1、Caspase9则随锰染毒剂量增加而递增(P<0.05,P<0.01);锰染毒组生精细胞凋亡指数随锰染毒剂量增加而上升(P<0.05)。结论长期低剂量锰染毒可调节Opa1/Drp1基因表达而影响线粒体功能,导致子代大鼠生精细胞凋亡。