二氢杨梅素通过抑制铁自噬而抑制铁超载诱导的肝星状细胞活化

目的肝星状细胞(HSCs)是肝纤维化(HF)过程中细胞外基质(ECM)的主要来源,在HF的发生发展中起着重要作用。二氢杨梅素(DMY)具有保肝作用,但机制不清。本研究观察了DMY对枸橼酸铁铵(FAC)诱导HSC-T6细胞活化的影响,并探讨了可能的机制。方法采用MTT法检测细胞活力,ELISA法检测培养上清中ECM主要成分的含量,普鲁士蓝染色观察HSC-T6细胞铁沉积,比色法测定HSC-T6细胞总铁含量,钙黄绿素法检测细胞内游离铁水平,透射电镜观察HSC-T6细胞超微结构。蛋白质免疫印迹法检测铁蛋白重链1(FTH1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、核受体辅活化子4(NCOA4)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)和p62/SQSTM1的表达。结果与FAC组比较,DMY+FAC组细胞培养液中ECM主要成分、细胞内总铁和游离铁水平、细胞中α-SMA、NCOA4和LC3-Ⅱ表达以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均显著降低,而FTH1和p62蛋白表达显著上调。雷帕霉素部分阻断DMY抑制FAC诱导的HSCs活化的作用。结论DMY可抑制铁超载诱导的HSCs活化,其机制可能与抑制铁自噬有关。