积雪草苷对脑缺血再灌注大鼠Nrf-2/TXNIP/NLRP-3通路及小胶质细胞活化的影响

目的观察积雪草苷(Asiaticoside, ASI)对脑缺血再灌注(Cerebral ischemia reperfusion, CIR)大鼠皮层中核因子相关因子-2(Nuclear factor-erythroid 2-related factor-2,Nrf-2)、氧还蛋白相互作用蛋白(Thiredoxin-interactive protein, TXNIP)、NOD样受体蛋白-3(Nod-like receptor protein-3,NLRP-3)通路蛋白表达水平的影响。方法改良Longa法阻塞大脑中动脉制备CIR大鼠模型,分为CIR组、低、中、高剂量ASI组,15只/组,另取15只不插入线栓为Sham组,低、中、高剂量ASI组分别给予10、20、40 mg/mL ASI溶液灌胃,Sham组、CIR组生理盐水灌胃,容积2 mL·kg-1·d-1,连续3 d,末次给药6 h后麻醉处死大鼠,取脑组织,红四氮唑(triphenyltetrazolium chloride, TTC)法检测脑梗死体积,苏木素伊红(Haematoxylin-eosin, HE)法观察脑皮层病变,免疫荧光法检测脑皮层小胶质细胞活化,试剂盒检测活性氧(Reactive oxygen species, ROS)、总抗氧化能力及白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)水平,Western blot法检测脑皮层组织Nrf-2/TXNIP/NLRP-3通路蛋白表达水平。结果 Sham组大鼠脑皮层组织无损伤;CIR组大鼠脑皮层可见神经元变性、细胞萎缩及炎性细胞浸润等;低、中、高剂量ASI组大鼠脑皮层组织损伤依次减轻,高剂量ASI组仅可见个别神经细胞萎缩。与Sham组比较,CIR组大鼠脑梗死体积、脑皮层钙离子结合蛋白1(Ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1+)活化小胶质细胞、ROS及IL-1β水平、TXNIP、斑点样蛋白(Apotosis-associated speck-like protein, ASC),NLRP-3及天冬氨酸蛋白水解酶(Cysteinyl aspartate specific proteinase 1,Caspase-1)蛋白表达水平升高(P均<0.05),总抗氧化能力、Nrf-2核移位及血红素氧合酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)蛋白表达水平降低(P均<0.05);与CIR组比较,低、中、高剂量ASI组大鼠脑梗死体积、脑皮层Iba1+活化小胶质细胞、ROS及IL-1β水平、TXNIP,ASC,NLRP-3及Caspase-1蛋白表达水平剂量依赖性降低(P均<0.05),总抗氧化能力、Nrf-2核移位及HO-1蛋白表达水平剂量依赖性增高(P均<0.05)。结论 ASI可促进脑皮层中Nrf-2通路蛋白表达,降低氧化应激,抑制TXNIP/NLRP-3通路蛋白表达,抑制IL-1β等释放,减轻小胶质细胞活化,改善CIR所致大鼠脑损伤。