脓毒症相关肺损伤中内质网应激诱导的铁死亡机制研究

目的探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中内质网应激(ERs)诱导的铁死亡机制。方法为了确定LPS对小鼠毛细血管肺泡上皮细胞(MLE12细胞)氧化应激和Fe 2+水平的影响,用LPS(0、1、2、5μg/ml)处理细胞24 h。将MLE12细胞分为对照(Con)组、脱铁抑制剂(Fer-1)组、LPS组和LPS+Fer-1组以验证铁死亡在脂多糖(LPS)诱导的细胞死亡中的作用。LPS+Fer-1组用10μmol/L Fer-1预处理6 h,随后将细胞暴露于5μg/ml LPS 24 h;Con组用融媒DMSO处理24 h,Fer-1组用10μmol/L Fer-1预处理6 h,随后用DMSO处理24 h;LPS组将细胞暴露于5μg/ml LPS 24 h。将MLE12细胞分为Con+载体(Vector)组、Con+序列相似性家族134成员B(FAM134B)组、LPS+Vector组、LPS+FAM134B组,细胞用Vector或FAM134B过表达质粒转染48 h后,暴露或不暴露于5μg/ml LPS 24 h。使用CCK-8法测定细胞活力;测量不同组的丙二醛(MDA)、谷胱甘肽和铁的水平,以及铁死亡标志物[环加氧酶2(PTGS2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)]和ERs标志物[葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、活化转录因子4(ATF4)和C/EBP同源蛋白(CHOP)]的蛋白水平;为了进一步证实体外细胞实验结果,将40只小鼠随机分成Con+Vector组、Con+FAM134B组、LPS+Vector组、LPS+FAM134B组,每组10只,在LPS+Vector组、LPS+FAM134B组小鼠中建立LPS诱导的脓毒症模型,并通过免疫荧光染色和蛋白质印迹评估肺组织中GPX4和ERs水平。结果LPS处理的MLE12细胞中PTGS2和MDA水平以剂量依赖性增加,GPX4和谷胱甘肽(GSH)水平剂量依赖性降低;与LPS组相比,LPS+Fer-1组细胞活力、GPX4和GSH水平增加(P<0.05),PTGS2蛋白水平和MDA水平降低(P<0.05);与LPS+Vector组相比,LPS+FAM134B组细胞活力增加(P<0.05),MDA水平和PTGS2蛋白水平降低(P<0.05),GPX4和GSH水平增加(P<0.05);动物实验中,与LPS+Vector组相比,LPS+FAM134B组小鼠肺组织中4-HNE、ATF4和CHOP表达水平降低(P<0.05),GPX4、FAM134B表达水平增加(P<0.05)。结论LPS以剂量依赖的方式诱导MLE12细胞铁死亡和ERs通过激活内质网自噬相关FAM134B受体有助于抑制ERs,并减轻细胞铁死亡。

急性呼吸窘迫综合征患者血清HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平对临床预后的预测价值

目的探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、白细胞介素-34(IL-34)、血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)水平对临床预后的预测价值。方法选取2021年6月至2023年6月该院97例急性呼吸窘迫综合征患者作为观察组,另选取同期该院的体检健康者97例作为对照组。比较两组HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平。对比分析不同预后患者临床资料及血清HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平,并分析预后影响因素。分析预后影响因素对预后的预测价值,并评价血清HMGB1、IL-34、ANGPTL4联合检测对预后的预测价值。结果观察组血清HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。死亡组患者氧合指数(PaO2/FiO2)低于存活组,急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、Murray肺损伤评分(MLIS)及HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平均高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。PaO2/FiO2、APACHEⅡ评分、MLIS及HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平均为ARDS患者预后影响因素(P<0.05)。PaO2/FiO2、APACHEⅡ评分、MLIS及HMGB1、IL-34、ANGPTL4预测预后的曲线下面积(AUC)分别为0.779、0.799、0.808、0.844、0.772、0.822,各预后影响因素的AUC比较,差异无统计学意义(P>0.05);受试者工作特征曲线分析显示,血清HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平联合预测ARDS患者预后的AUC为0.915(95%CI:0.841~0.962),明显高于各指标单独预测AUC。结论ARDS患者血清HMGB1、IL-34、ANGPTL4水平联合检测对其预后具有一定预测价值。

慢性阻塞性肺疾病合并呼吸衰竭患者无创机械通气治疗失败的影响因素及应对策略

目的分析无创机械通气(NIMV)治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并呼吸衰竭患者失败的相关因素,并分析其应对策略,为提高治疗效果提供依据。方法回顾性分析2020年1月至2023年8月期间在湖南省脑科医院(湖南省第二人民医院)进行NIMV治疗的120例COPD伴呼吸衰竭患者的临床资料,根据NIMV治疗是否成功分为成功组(89例,治疗成功),失败组患者为(31例,治疗失败)。对两组患者临床基本资料并进行单因素分析,同时采用多因素Logistic回归分析筛选出治疗失败的影响因素。结果失败组中年龄>60岁的患者占比高于成功组,失败组机械通气时间长于成功组,动脉血氧分压(PaO_(2))低于成功组,二氧化碳分压(PaCO_(2))水平、C-反应蛋白(CRP)水平、入院时急性生理学及慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分均高于成功组;多因素Logistic回归分析结果显示,年龄>60岁、机械通气时间长、治疗前PaO_(2)水平低、治疗前PaCO_(2)水平高、治疗前CRP水平高、入院时APACHEⅡ评分高均为NIMV治疗COPD合并呼吸衰竭患者失败的影响因素(OR=2.748、1.784、1.756、1.675、1.531、1.120,均P<0.05)。结论年龄>60岁、机械通气时间长、治疗前PaO_(2)水平低、治疗前PaCO_(2)水平高、治疗前CRP水平高、入院时APACHEⅡ评分高均为NIMV治疗COPD合并呼吸衰竭患者影响因素,可针对上述因素给予针对性干预措施,提高COPD合并呼吸衰竭患者NIMV治疗成功率。

不同时期颅骨修补术对重型颅脑外伤患者的临床价值分析

探讨和分析不同时期颅骨修补术对重型颅脑外伤去大骨瓣减压术患者的临床效果。选取我院2015年7月～2017年7月收治的重型颅脑外伤去大骨瓣减压术后患者98例,随机分为早期组52例和晚期组46例,早期组在去大骨瓣减压术后1个月～3个月行颅骨修补术,晚期组在术后6个月后行颅骨修补术,比较两组术后神经功能、脑组织血流变化和并发症发生情况。早期组患者Karnofsky (KPS)评分和功能独立性测量(FIM)评分明显优于对照组(P<0.05或P<0.01),患者患侧大脑中动脉(MCA)和颈内动脉(ICA)的血流速度明显高于晚期组(P<0.05),早期组颅骨修补术后颅内血肿、颅内感染、皮下积液和切口愈合障碍等并发症发生率明显低于晚期组(χ2=6.56,P<0.05)。重型颅脑外伤去大骨瓣减压术后早期完成颅骨修补术能明显改善神经功能和增加脑血液循环,减少并发症的发生,提高患者生命质量。

Resistin促进急性胰腺炎病情加重的作用机制

目的分析抵抗素(Resistin)对雨蛙素(caerulein,CN)诱导的小鼠重症急性胰腺炎(SAP)模型的影响,并探讨其恶化机制。方法将BALB/C小鼠随机分为5组:对照组、CN组、Resistin+CN组、sh-Resistin+CN组和Resistin+CN+3-MA组,每组10只。对Resistin+CN组、sh-Resistin+CN组和Resistin+CN+3-MA组小鼠施用携带Resistin、sh-Resistin的AVV病毒载体;除对照组外,其他4组通过以1 h间隔腹膜内注射10次CN(100μg·kg^(-1))诱导CN胰腺炎模型;Resistin+CN+3-MA组在最后1次CN注射后2 h通过腹膜内注射3-MA(20 mg·kg^(-1))。采用干化学法测量血清淀粉酶、酶比色法检测脂肪酶活性。胰腺切片苏木精和伊红(HE)染色后进行胰腺组织病理学评分,采用TUNEL法测定胰腺组织细胞凋亡、透射电子显微镜观察胰腺自噬、Western Blot检测胰腺组织中Resistin表达。结果与CN组相比,Resistin+CN组的血清淀粉酶、脂肪酶活性,胰腺组织病理学评分和TUNEL阳性细胞百分比显著增加(P<0.05);sh-Resistin+CN组小鼠的血清淀粉酶、脂肪酶活性,胰腺组织病理学评分和TUNEL阳性细胞百分比显著降低(P<0.05)。与CN组相比,Resistin+CN组中每个细胞质区域的自噬泡百分比显著增加,sh-Resistin+CN组的自噬泡百分比显著降低。Resistin+CN组胰腺组织中P62、LC3Ⅱ水平较CN组显著增加,而sh-Resistin+CN组胰腺组织中P62、LC3Ⅱ水平较CN组显著降低。与Resistin+CN组相比,Resistin+CN+3-MA组的胰腺组织学评分以及胰腺组织中P62、LC3Ⅱ水平和自噬泡百分比均显著降低(P<0.05)。结论Resistin通过诱导自噬受损在SAP发展中发挥重要作用。

血清肌红蛋白联合乳酸脱氢酶在重症中暑横纹肌溶解症所致急性肾损伤中的诊断价值

目的探讨血清肌红蛋白(Mb)联合乳酸脱氢酶(LDH)对重症中暑横纹肌溶解症(RM)所致急性肾损伤(AKI)的诊断价值。方法回顾性收集2020年6月至2022年10月本院收治的重症中暑RM患者58例的临床资料。根据是否发生AKI将患者分为非AKI组和AKI组。比较两组患者的实验室指标,观察影响AKI发生的危险因素。采用ROC分析血清指标对AKI的预测效能。结果AKI组肌酸激酶、Mb、LDH、肌酐(Scr)、尿素氮均高于非AKI组(P<0.05)。Mb、LDH、Scr均是影响重症中暑RM患者发生AKI的相关因素(P<0.05)。重症中暑RM伴发AKI患者血清Mb、LDH水平与Scr均呈正相关(r=0.6772;r=0.6816,P<0.05)。血清Mb水平在预测重症中暑RM患者发生AKI时的AUC为0.6692(95%CI:0.5253~0.8131),当约登指数为0.3156时,敏感度为0.4545,特异性为0.8611;血清LDH水平在预测重症中暑RM患者发生AKI时的AUC为0.8277(95%CI:0.7182~0.9371),当约登指数为0.5960时,敏感度为0.8182,特异性为0.7778。血清Mb联合LDH水平在预测重症中暑RM患者发生AKI时的AUC为0.9116(95%CI:0.8219~1.001),当约登指数为0.7878时,敏感度为0.9545,特异性为0.8333。结论血清Mb、LDH水平在重症中暑RM所致AKI患者中有所提高,血清Mb联合LDH对重症中暑RM患者发生AKI具有良好的预测意义。

丹参提取物调控Nrf2/ARE通路改善重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的作用机制

目的探讨丹参提取物调控核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)通路改善重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的作用机制。方法以逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠(1 ml/kg)法建立SAP肺损伤大鼠模型,随机分为模型组、丹参提取物(1.5 g/kg)组、ML385(Nrf2/ARE通路抑制剂,剂量:20 mg/kg)组和丹参提取物(1.5 g/kg)+ML385(20 mg/kg)组。测量腹水量,计算W/D比值(W/D=湿重/干重);以苏木精-伊红(HE)染色检测各组大鼠肺组织病理,并进行Holfbauer评分;以全自动血气分析检测仪检测动脉血气指标;试剂盒检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平和肺组织活性氧(ROS)水平,以蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Nrf2蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠肺组织出现肺泡壁毛细血管明显扩张变厚,肺泡间隔变大,肺间质充血、水肿、炎性细胞大量浸润等病理损伤症状,腹水量、肺组织ROS水平、W/D及Holfbauer评分、PaCO2、血清MDA水平显著升高(P<0.05),PaO2、氧合指数(OI)、血清SOD水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,丹参提取物组大鼠上述病理损伤症状减轻,腹水量、肺组织ROS水平、W/D及Holfbauer评分、PaCO2、血清MDA水平降低(P<0.05),PaO2、OI、血清SOD水平、肺组织Nrf2蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,ML385组大鼠上述病理损伤症状加重,腹水量、肺组织ROS水平、W/D及Holfbauer评分、PaCO2、血清MDA水平升高(P<0.05),PaO2、OI、血清SOD水平、肺组织Nrf2蛋白表达降低(P<0.05)。与丹参提取物组比较,丹参提取物+ML385组大鼠上述病理损伤症状加重,腹水量、肺组织ROS水平、W/D及Holfbauer评分、PaCO2、血清MDA水平升高(P<0.05),PaO2、OI、血清SOD水平、肺组织Nrf2蛋白表达降低(P<0.05)。结论丹参提取物可通过激活Nrf2/ARE信号保护急性胰腺炎肺损伤大鼠的肺组织。