2020—2021年湖南省某医院分离自重症监护室的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的分子流行病学特征分析

目的研究2020—2021年湖南省某三甲医院重症监护室(ICU)分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)菌株的科室分布、药敏特征、碳青霉烯酶耐药基因、毒力基因、荚膜血清型以及ST分型,为CRKP感染的临床治疗提供科学依据。方法收集2020年1月至2021年12月郴州市第一人民医院8个ICU分离的75株CRKP菌株,应用MALDI-TOF质谱仪和VITEK-2 Compact药敏分析仪分别进行菌种鉴定和药敏试验,采用改良碳青霉烯灭活试验检测碳青霉烯酶表型,用wzi基因测序法进行荚膜血清型测定,运用Sanger测序对碳青霉烯类耐药基因和毒力基因进行分析,采用多位点序列分型(MLST)检测ST分型。结果75株CRKP菌株主要分布在老年内科ICU(28.0%)和脑外科ICU(20.0%);CRKP对替加环素和头孢他啶-阿维巴坦的耐药率分别为6.7%(5/75)和16.0%(12/75),对碳青霉烯类、头孢菌素、β内酰胺类-β内酰胺酶抑制剂复方制剂和左氧氟沙星耐药率高(>96.0%);61株(81.3%)携带bla_(KPC-2)耐药基因,11株(14.7%)携带bla_(NDM-1)基因,1株(1.3%)携带bla_(NDM-5)基因,2株(2.7%)携带bla_(OXA-48)基因;ST分型前三位的主要为ST11型(54.7%,41/75)、ST1883(13.3%,10/75)、ST307(6.7%,5/75),所有ST11型和ST1883型CRKP均携带bla_(KPC-2);主要流行的荚膜血清型为KL64(38.7%,29/75)和KL47(25.3%,19/75);主要携带的毒力基因是rmpA2(48.0%,36/75)、iroN(38.7%,23/75)和iucA(37.3%,15/75)。结论该院ICU的CRKP菌株细菌耐药程度高,以ST11-KL64型和ST11-KL47型为主,大多数菌株携带bla_(KPC-2)基因和毒力基因。应该加强监测CRKP分子流行病学分析和酶型检测,从而指导临床CRKP感染的个体化和精准化治疗。

百日咳患儿血清IFN-γ、IL-5水平及其与免疫状态的关系

目的探讨百日咳患儿血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-5(IL-5)水平及其与免疫状态的关系。方法选取2021年1月至2023年12月该院儿科收治的300例百日咳患儿临床资料进行回顾性分析,根据患儿不同免疫状态分为未免疫组、部分免疫组和完全免疫组。比较3组患儿入院时血清IFN-γ、IL-5水平,并根据患儿年龄及完全免疫患儿接种时长进行分组,观察不同分组状况下患儿血清IFN-γ、IL-5水平。采用多因素Logistic回归分析百日咳患儿血清IFN-γ、IL-5水平及其与免疫状态的关系。结果完全免疫组患儿血清IFN-γ水平高于未免疫组和部分免疫组,血清IL-5水平低于未免疫组和部分免疫组,差异均有统计学意义(P<0.05);部分免疫组患儿IFN-γ水平高于未免疫组,血清IL-5水平低于未免疫组,差异均有统计学意义(P<0.05);>3~6岁患儿血清IFN-γ水平高于其他年龄段患儿,IL-5水平低于其他年龄段患儿,差异均有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,调整受试者白细胞计数、淋巴细胞比例后,与完全免疫患儿比较,部分免疫患儿和未免疫患儿血清IFN-γ每增加一个单位,认为百日咳患儿免疫功能下降风险增加0.886倍(95%CI:0.836~0.938);部分免疫患儿和未免疫患儿血清IL-5每增加一个单位,认为百日咳患儿免疫功能下降风险增加1.255倍(95%CI:0.161~1.357);完全免疫状态下不同接种时长患儿血清IFN-γ、IL-5水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论不同免疫状态的百日咳患儿血清IFN-γ、IL-5水平存在一定差异,二者水平在一定程度上与患儿的免疫状态有关。

标本溶血、脂血对实验室检验的影响及对比分析

目的:通过研究血清标本发生溶血和脂血后对实验室检测结果的影响,并探讨避免出现溶血与脂血的有效措施,提供实验室检验的准确度。方法:选取100例健康的体检者的血清为研究样本,将每个人的血清样本平均分为3等份,置入3根真空采血管中,分别设为对照组、溶血组、脂血组。其中,对照组样本即采血后的标准样本,不做任何特殊处理,溶血组通过人工捣碎的方法制作成溶血血清标本,脂血组为通过注射20%浓度的脂肪酸注射液制备成的4%的脂血血清。通过对上述样本进行常规实验室检验,统计这100例受检者3组样本的实验室检测指标结果,通过统计学方法检验其差异性是否有统计学意义。结果:溶血组在ALT(谷丙转氨酶)、AST(谷草转氨酶)、BUN(尿素氮)、ALB(血清白蛋白)、GLU(血糖)等各项指标的检测值均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);脂血组在TBIL(总胆红素)、GLU(血糖)等项目的检测值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:溶血和脂血现象均会对实验室检验结果产生影响,且溶血较脂血影响程度更大更广泛。

郴州地区A群链球菌耐药性检测

目的了解A群链球在农村人群中的分布情况及其耐药性。方法收集湖南省郴州地区主要服务于农村人口的各二级医院、感染性疾病病人中分离的131株A群链球菌、并作药敏试验。结果131株A群链球菌主要来源于痰标本,占72.5%,其次为泌尿生殖道和各种脓性分泌物,各占9.2%。药敏试验结果对万古霉素100%感,对青霉素耐药率达20%,对氨苄、苯唑、头孢唑啉、头孢哌酮耐药率分别为41.7%、51.2%、14.6%、4.0%,对红霉素、复方新诺明耐药。结论基层医院对于化脓性感染性疾病需根据药敏试验结果用药,提高抗生素合理使用率为当务之急。

不同时段临床标本微生物的检验阳性率的结果分析

目的:分析不同时段临床标本微生物检验阳性率变化及其原因。方法收集2012年1~2014年1月,我院检验科收检标本2000份,比较不同时期标本微生物检验阳性率变化,并分析引起阳性率差异的因素及控制对策。结果2013~2014年,血培养标本阳性检出率较2012~2013年显著提高(<0.05),而呼吸道标本、其他标本的以及整体阳性检出率显著降低(<0.05),两个阶段的粪便标本阳性率无明显差异(>0.05);影响标本阳性率的因素主要有标本采集不规范(53.54%)、未应用无菌容器(3.15%)采集时机不当(9.45%)、标示不清(7.87%)、保存不当(4.72%)及检验过程质控不良(7.09%)等有关。结论分析不同时段微生物标本检验阳性率变化影响因素,强化质控措施,加强检验人员专业素养,对于提高微生物检验准确性具有重要意义。

郴州地区急性下呼吸道感染住院儿童中人腺病毒分型及流行病学特点分析

目的:通过了解郴州地区急性下呼吸道感染住院儿童中人腺病毒(Hadv)型别分布特征,以及人腺病毒引起的儿童急性下呼吸道感染的临床特点,为儿童人腺病毒防控提供依据。方法:选取郴州市第一人民医院儿童医院呼吸内科2021年1月1日-9月30日收治的518例诊断为急性下呼吸道感染儿童的鼻拭子标本,采用PCR-荧光探针法检测待测样本中的人腺病毒以及3、7型别鉴定,并收集患儿呼吸道病毒常规筛查等相关临床资料。结果:本组患儿中人腺病毒阳性率为10.04%(52/518),其中3型人腺病毒(Hadv-3)占28.85%(15/52),7型人腺病毒(Hadv-7)占46.15%(24/52),未明确分型(Hadv)占25.00%(13/52);52例人腺病毒阳性患儿中5例为单纯感染,47例为混合感染,主要和呼吸道合胞病毒或人鼻病毒混合感染;52例人腺病毒阳性患儿中诊断为肺炎46例,支气管炎3例,咳喘待查3例;人腺病毒感染患儿与非感染患儿的临床症状差异无统计学意义(P>0.05)。结论:郴州地区急性下呼吸道感染儿童中人腺病毒阳性率较高,同时主要类型为3、7型人腺病毒。

高效液相色谱-荧光检测法同时测定血清中的犬尿氨酸和犬尿喹啉酸

建立了在线衍生、双波长高效液相色谱-荧光检测器同时检测血清中犬尿氨酸（kynurenine,Kyn）和犬尿喹啉酸（kynurenic acid,KYNA）含量的方法。血清标本经5%高氯酸溶液去除蛋白质后,上清液直接进样分析测定。采用的色谱柱为Hypersil C8柱;流动相为0.25mol/L醋酸锌-50mmol/L醋酸溶液（含3%乙腈）,流速为1.5mL/min。在0~10min时间段,在激发波长和发射波长分别为365nm和480nm时检测Kyn;10min后,在激发波长和发射波长分别变换为344nm和404nm时检测KYNA。Kyn的保留时间约为8.1min,线性范围为98~19 600nmol/L,最低检出浓度为50nmol/L,平均回收率为94.88%,日内、日间测定值的相对标准偏差（RSD）均低于4%。KYNA的保留时间约为13.0min,线性范围为2.62~1 047nmol/L,最低检出浓度为0.11nmol/L,平均回收率为102.72%,日内、日间测定的RSD均低于4%。苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸和5-羟色胺等物质对目标物的检测无干扰。71例健康成人血清中,Kyn和KYNA含量分别为（1.40±0.34）μmol/L和（24.22±8.67）nmol/L。该方法简便、快速、灵敏、特异,适于临床和科研应用。

肝纤维化指标联合AFP、GGT检测在肝病诊断中的应用价值

目的探讨肝纤维化指标[Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、层黏连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、甘胆酸(CG)]、甲胎蛋白(AFP)与γ-谷氨酰转肽酶(GGT)在肝病诊断中的应用价值。方法选取2017年7月～2018年6月于湖南省郴州市第一人民医院(以下简称"我院")就诊的慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者90例(慢性HBV携带组)、肝硬化患者66例(肝硬化组)和乙肝相关性肝癌患者52例(乙肝相关性肝癌组),选取我院同期健康体检者60例(健康对照组),分别用全自动化学发光分析仪和生化分析仪检测各组肝纤维化指标PCⅢ、Ⅳ-C、LN、HA、CG及AFP与GGT。结果三组患者PCⅢ、Ⅳ-C、HA、CG与AFP均高于健康对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01);肝硬化组和乙肝相关性肝癌患者组LN、GGT均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);慢性HBV携带者组的LN、GGT与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);HA、CG、AFP在各组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肝纤维化指标PCⅢ、Ⅳ-C、LN、HA、CG、GGT与AFP在肝病诊断中具有较大应用价值,对指导临床治疗具有重要价值。

金黄色葡萄球菌感染的临床分布与耐药性

目的探讨金黄色葡萄球菌的临床分布和耐药性。方法回顾性分析2015年郴州市第一人民医院临床标本中分离的977株金黄色葡萄球菌的分布及耐药性,采用VITEK 2Compact系统进行细菌鉴定和药敏试验。结果 977株金黄色葡萄球菌,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌351株;标本来源依次为痰液、分泌物、血液等;抗菌药物耐药率前3位为青霉素(97%)、复方磺胺甲噁唑(95%)、红霉素(58%);对利奈唑胺和万古霉素的敏感率为100%。结论该院分离的金黄色葡萄球菌耐药性严重,治疗感染时应根据实验室药敏结果合理选用抗菌药物。

乙型肝炎病毒血清标志物与HBV DNA定量结果分析

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)血清学检测出现的组合模式与HBVDNA定量之间的关系,正确评价其临床意义。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清标志物,用荧光定量PCR检测HBVDNA含量,依据乙肝病毒标志物阳性出现的模式分为7组A组191例,为HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性(俗称大三阳);B组328例,为HBsAg、HBe-Ab、HBcAb阳性(俗称小三阳);C组26例,为HBsAg、HBeAg阳性;D组54例,为HBsAg、HBcAb阳性;E组35例,HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性;F组11例,为HBsAb、HBcAb阳性;G组10例,为HBcAb阳性。结果各组HBVDNA>1.00ⅹ103拷贝/ml的阳性增高百分率分别为A组98.95%(189/191);B组46.34%(152/328);C组100%(26/26);D组57.41%(31/54);E组20.00%(7/35);F组18.18%(2/11);G组20.00%(2/10)。A组、C组与B、D、E、F、G组间HBVDNA阳性增高率有显著性差异(P<0.01),其他各组间比较有些差异有显著性,有些差异无显著性(P<0.01或P>0.05)。结论正确合理地分析HBV血清学指标出现的类型,与HBVDNA的联合动态检测有助于临床诊断、疗效观察及预后判断。

Galectin-1在鼻咽癌中的表达与意义

目的探讨Galectin-1在人鼻咽癌(NPC)组织中的mRNA和蛋白表达水平,及其在鼻咽癌发病中的意义。方法 Real-time RT-PCR法检测32例鼻咽癌组织及10例正常鼻咽上皮组织中Galectin-1的mRNA表达;免疫组织化学法检测对应组织石蜡切片中Galectin-1的蛋白表达。结果 Galectin-1在鼻咽癌中mRNA和蛋白的表达明显高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05),Galectin-1的高表达在转录水平上受到调节。结论鼻咽癌中Galectin-1基因高表达在NPC发病机制中具有重要意义。

老年患者下呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析

目的了解老年患者下呼吸道感染病原菌分布及耐药性,为临床合理用药提供依据。方法对2010年1～12月老年患者下呼吸道感染的痰标本细菌培养及药敏结果进行回顾性分析。结果老年下呼吸道感染患者的病原菌以革兰阴性杆菌为主,占70.5%,主要有铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌;革兰阳性球菌主要为金黄色葡萄球菌,占13.1%;药敏结果显示,革兰阴性杆菌对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星较为敏感,金黄色葡萄球菌对万古霉素均敏感。结论老年下呼吸道感染病原菌以阴性菌为主,且耐药率较高,应根据药敏结果合理选择抗菌药物以减少耐药菌株的产生。

临床真菌感染及其耐药性分析

目的为掌握临床真菌感染及耐药性情况,指导临床抗真菌用药提供依据。方法收集2005年10月- 2006年9月医院门诊和住院患者的各类真菌培养标本1196份,用沙保罗培养基和科玛嘉显色培养基分离真菌,用“天地人”微生物半自动鉴定药敏系统鉴定菌种,用微量肉汤稀释法在“天地人”微生物半自动鉴定药敏系统中做药敏试验。结果分离出359株真菌,以白色假丝酵母菌为主,占82．5%,病房分布以重症监护(ICU)病房(23．1%)、呼吸病房(13．6%)、老年病房(6．4%)为主。耐药性最强的是灰黄霉素,耐药率达86．6%,其次为氟康唑、伊曲康唑,耐药率分别是19．2%、10．6%。两性霉素B抗菌作用最强,耐药率为0,制霉菌素、益康唑次之,耐药率分别是0．56%、0．83%。结论随着侵袭性操作和免疫受损群体的不断增多,增加了真菌感染机会,应重视真菌的耐药性监测,以指导临床合理使用抗真菌药物。

24688例泌尿生殖道感染患者解脲脲原体与人型支原体的临床检测研究

目的了解泌尿生殖道感染患者解脲脲原体(Uu)与人型支原体(Mh)感染现状。方法采用Uu和Mh培养、鉴定一体化试剂盒对24688例泌尿生殖道感染患者进行Uu和Mh检测。结果本地区泌尿生殖道支原体总检出率为67.72%,单纯Uu、Mh及Uu合并Mh检出率分别为56.61%、2.36%、8.75%;女性患者单纯Uu阳性检出率(64.42%)明显高于男性(47.83%)(χ~2=767.82,P<0.01);2012~2016年期间,Uu、Mh支原体感染率呈逐年上升趋势;26~35岁组单纯Uu阳性检出率(60.45%)高于其他年龄组(χ~2=248.29,P<0.01);患者春季单纯Uu阳性检出率(59.34%)高于其他季节(χ~2=59.34,P<0.01)。结论泌尿生殖道感染患者Uu和Mh支原体感染率较高,且以女性感染为主,Uu和Mh合并感染也不可忽视;Uu和Mh感染具有明显的年龄和季节差异。

生存素下调多药耐药蛋白增强人鼻咽癌细胞株对紫杉醇敏感性的研究

目的研究生存素(Survivin)下调多药耐药蛋白(MRP)的表达与鼻咽癌紫杉醇(PTX)耐药性关系,探讨鼻咽癌PTX耐药的分子机制。方法采用免疫组化检测Survivin和MRP在42例鼻咽癌PTX耐药患者与24例PTX非耐药患者中的表达;采用浓度递增法持续诱导建立鼻咽癌化疗耐药细胞株5-8F-PTX(+),绘制细胞生长曲线,测定细胞生长的倍增时间,检测肿瘤细胞的周期分布;采用siRNA技术干扰5-8F-PTX(+)中Survivin的表达后,Western blot法检测Survivin和MRP表达变化,MTT检测不同抗肿瘤药物PTX、顺铂(cDDP)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、长春新碱(VCR)耐药敏感性的变化。结果 Survivin在鼻咽癌化疗耐药患者中阳性表达率为83.3%,明显高于非耐药患者(41.7%),差异有高度统计学意义(P<0.01);MRP在鼻咽癌PTX耐药患者中表达阳性率为88.1%,明显高于非耐药患者(37.5%),差异有高度统计学意义(P<0.01)。5-8F-PTX(+)较5-8F的细胞生长速度明显减慢,5-8F-PTX(+)细胞生长的倍增时间为21 h,亲本5-8F细胞生长的倍增时间为15 h;5-8F-PTX(+)的G2/M期细胞百分比[(23.1±1.3)%]显著高于亲本5-8F细胞[(13.5±0.9)%];Survivin和MRP在PTX耐药细胞株5-8F-PTX(+)细胞株中的表达水平明显高于非耐药的5-8F,siRNA干扰5-8F-PTX(+)中Survivin的表达后,Survivin和MRP表达明显下调,PTX、cDDP、5-FU、VCR耐在siRNA-5-8F-PTX(+)中的IC50值不同程度地下降。结论 Survivin可通过下调MRP的表达增强鼻咽癌细胞对PTX的敏感性。

CA7000血凝仪试剂盘上试剂使用时间对测定结果的影响

目的探讨CA7000血凝仪试剂盘上试剂使用时间对测定结果的影响。方法将试剂放置CA7000血凝仪试剂盘上,之后在不同时间点(0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h)对同一混合血浆进行凝血酶原时间(PT)、部分活化的凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)测定。结果测定结果显示试剂放置试剂盘后8 h时的TT结果、12 h时的APTT结果、18 h时的FIB结果、36 h时的PT结果分别与0 h时的结果比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在日常工作中,CA7000血凝仪试剂盘上放置试剂的稳定时间不同,根据不同稳定时间配置相应的试剂用量,避免剩余试剂失效而造成浪费。

La(C_7H_5O_3)_2·(C_9H_6NO)抑制Hela细胞生长作用机制研究

目的:观察La(C7H5O3)2·(C9H6NO)对体外培养的Hela细胞的生长抑制作用,并进一步探讨其作用机制。方法:应用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布,Annexin Ⅴ-FITC染色法检测细胞凋亡率。结果:不同浓度的La(C7H5O3)2.(C9H6NO)处理Hela细胞24～96h后,细胞增殖受到显著抑制,并呈浓度及时间依赖性;0.5、1.0、5.0、10.0μmol/L La(C7H5O3)2·(C9H6NO)处理72h后,Hela细胞G0/G1期细胞数量显著增加,S期细胞数量显著减少(P<0.01);各浓度组细胞凋亡率均显著增加(P<0.01)。结论:La(C7H5O3)2·(C9H6NO)对Hela细胞具有生长抑制作用,其机制与阻滞细胞周期及诱导凋亡有关。

采用定量蛋白质组学技术筛选急性髓系白血病HL-60细胞的甲基化相关基因(英文)

目的:筛选人急性髓系白血病细胞株HL-60甲基化沉默基因,为揭示白血病的发病机制及防治提供科学依据。方法:应用荧光差异双向凝胶电泳(two-dimensional fluorescence difference gel electro-phoresis,F-2D-DIGE)分离甲基转移酶抑制剂5-杂氮-2-脱氧胞苷(5-aza-2-dC)处理与未处理的HL-60细胞的总蛋白质,Decyder和PDquest图像分析软件识别差异表达蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术鉴定差异表达蛋白质。结果:建立了5-aza-2-dC处理与未处理的HL-60细胞蛋白质的F-2D-DIGE图谱,图像分析识别了53个差异表达的蛋白质点,质谱分析鉴定了35个差异表达的蛋白质,其中32个蛋白质在5-aza-2-dC处理后的HL-60细胞中表达上调,3个蛋白质表达下调。结论:35个差异表达蛋白可能与甲基化相关,为白血病的表观遗传学研究提供了有价值的信息。

99mTc-DT PA 肾动态显像在糖尿病肾病诊断中的价值

【目的】探讨99m Tc‐DTPA肾动态显像在糖尿病肾病（DN）诊断中的价值。【方法】选择本院185例40～60岁糖尿病（DM ）患者，根据24 h尿白蛋白排泄率（UAER），将其分为DM1组、DM2组、DM3组。应用单光子发射计算机断层扫描仪（SPECT ）肾动态显像技术，以99m Tc‐DTPA为显像剂，对所有患者进行肾功能评估。【结果】DM2组与DM3组患者UAER显著高于DM1组，GFR显著低于DM1组，组间比较均有差异，差异均具有统计学意义（ P ＜00．5）；DM1组、DM2组、DM3组左、右肾曲线高峰时间（Tp）明显高于健康对照组组，差异具有统计学意义（ P ＜00．5）。【结论】综合运用肾动态显像中肾小球滤过率（GFR）、Tp、半排时间（T1／2）等重要参数与UAER ，对DN的早期诊断及分期、治疗具有重要价值。