肺部局限性磨玻璃样阴影与病理类型的相关性研究

目的分析51例肺部局限性磨玻璃样阴影(fGGO)的随访结果,研究fGGO与病理类型的相关性。方法采用多排螺旋CT(MSCT)对fGGO进行定期观察,达到预设标准结束随访,手术明确病理类型;根据CT影像资料,判定fGGO的直径、类型、量化分型、形态。结果 51例患者中,有随访结果的45例。良性病变15例,恶性病变30例。fGGO的大小、类型在炎症性病变、BAC、腺癌、AAH四种病理类型间差异有统计学意义(P<0.01);fGGO病灶周边侵犯在低量化组与高量化组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论 fGGO是肺癌的早期影像学改变,分析fGGO大小、类型、量化及其动态变化有助判断其病理类型及预后,为临床医生提供诊治方案。

TLR信号通路关键因子在肺腺癌组织中的表达与临床意义

目的研究Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)介导的信号通路关键因子:Toll样受体4 (TLR4)、核因子κB(NF-κB)、髓样分化因子88(MyD88)、白介素-1受体相关激酶-1(IRAK1)、IRAK4以及肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在肺腺癌组织中的表达与临床意义。方法分别采用免疫组化SP法和RT-PCR法检测92例肺腺癌组织和30例正常肺组织中TLR4、NF-κB、MyD88、IRAK1、IRAK4、TRAF6的表达情况并作比较分析。结果肺腺癌组织中TLR4、NF-κB、MyD88、IRAK1、IRAK4蛋白的表达水平均明显高于正常肺组织(均P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤大小、分化程度患者TLR4、NF-κB、MyD88、IRAK1、IRAK4蛋白比较差异均无统计学意义(均P>0.05),而不同程度淋巴结转移、临床分期、远处转移患者上述蛋白比较差异均有统计学意义(均P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、临床分期、远处转移患者TRAF6蛋白比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。肺腺癌组织TLR4、NF-κB、MyD88、IRAK1、IRAK4 mRNA的表达水平均明显高于正常肺组织(均P<0.05),而TRAF6 mRNA的表达水平与正常肺组织比较无统计学差异(P>0.05)。结论 TLR4、NF-κB、MyD88、IRAK1、IRAK4在肺腺癌中的高表达与肺腺癌的发生、发展及预后密切相关。

RNA干扰MDR1基因对乳腺癌多细胞球阿霉素敏感性的影响

目的通过RNA干扰沉默MDR1基因,探讨后者在乳腺癌多细胞球阿霉素耐药中的作用。方法用liquid overlay技术培养获得多细胞球(multicellular spheroids,MCS),用脂质体转染法把特异针对MDR1基因的双链小RNA干扰片段导入MCF-7细胞中,采用台盼蓝拒染法检测阿霉素对MCF-7的细胞抑制率,MDR1 mRNA水平及蛋白水平分别用RT-PCR和免疫印迹法检测,用荧光光度计法检测阿霉素在细胞内的蓄积情况。结果多细胞球形成后,阿霉素对MCF-7细胞的抑制率明显减少,MDR1 mRNA及蛋白水平明显升高,阿霉素在细胞内的蓄积量减少;RNA干扰法能明显抑制MDR1基因表达,增加阿霉素在MCS细胞中的蓄积,提高阿霉素对MCS的细胞抑制率。结论多细胞球的形成可以增强MCF-7细胞的阿霉素耐药性,RNA干扰沉默MDR1基因可以部分逆转MCF-7多细胞球的阿霉素耐药。

Caveolin-1过表达诱导喉鳞癌HEp2细胞凋亡

目的探讨caveolin-1对喉鳞状细胞癌细胞系HEp2凋亡的影响。方法通过脂质体法把caveolin-1基因导入喉鳞癌细胞系HEp2细胞,筛选出稳定高表达caveolin-1的克隆,用荧光实时定量反转录-聚合酶链反应(real-timeRT-PCR)和免疫印迹法鉴定;流式细胞仪检测细胞周期与凋亡;Real-time RT-PCR检测survivin的mRNA水平;免疫印迹法检测细胞BCL-2和survivin蛋白的表达;用分光光度法方法检测caspase-3相对活性。结果成功筛选到稳定高表达caveolin-1的克隆,命名为HEp2-CAV1;与对照组相比,更多的HEp2-CAV1细胞处于G0/G1期,凋亡率增加,caspase-3相对活性水平上升2.72倍(P<0.05),survivinmRNA的表达水平减少74%(P<0.01),survivin与BCL-2蛋白表达水平明显减少。结论Caveolin-1能够促进喉鳞状细胞癌细胞株HEp2的凋亡,BCL-2和survivin的表达下调可能是其促凋亡的重要机制之一。

Wnt/β-catenin/c-myc信号通路活化与肺癌分化及转移的关系研究

目的研究肺癌组织标本中Wnt、β-catenin、c-myc蛋白的阳性表达率、mRNA和蛋白的相对表达水平与肺癌不同病理类型、不同分化程度、淋巴结转移与否之间的关系。方法回顾65例肺癌患者的临床资料,以30例正常肺组织标本为正常对照,采用免疫组化染色法检测所有标本中Wnt、β-catenin、c-myc蛋白的阳性表达率,反转录PCR(RT-PCR)法和Western blot法分别检测标本中对应的mRNA和蛋白相对表达水平。结果不同病理类型的肺癌患者Wnt、β-catenin、c-myc的蛋白阳性表达率、mRNA和蛋白的相对表达水平相互比较,差异均无统计学意义(P>0.05);未分化+低分化、伴有淋巴结转移的肺癌患者组织标本的Wnt、β-catenin、c-myc蛋白阳性表达率、mRNA和蛋白相对表达水平均显著高于中分化+高分化、无淋巴结转移的肺癌患者,正常肺组织标本最低,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论 Wnt\β-catenin\c-myc通路活化程度可能与肺癌的发生及分化程度和淋巴结转移之间存在密切的联系,对临床干预治疗具有潜在的研究价值。

Caveolin-1过表达抑制宫颈鳞癌Hela细胞的体外生长研究

目的 探讨转染caveolin-1基因对宫颈鳞状细胞癌Hela细胞株体外生长的影响.方法 用脂质体法把caveolin-1真核表达质粒导入Hela细胞内,筛选出稳定高表达caveolin-1的细胞克隆,并用RT-PCR、细胞免疫荧光和免疫印迹法鉴定.MMT法检测细胞的生长能力,流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡情况,免疫印迹法检测细胞外信号调节激酶（extracellular regulated protein kinases,Erk）1/2的磷酸化水平.结果 转染caveolin-1基因后,成功筛选得到稳定高表达caveolin-1的Hela细胞克隆,与未转染对照组相比,转染后的Hela细胞生长速度明显减慢（P〈0.05）,更多的细胞阻滞在G0/G1期[（68.04±2.57）%vs（53.41±1.01）%],凋亡细胞比例增高[（19.18±2.20）%vs（5.63±0.55）%,P〈0.05],Erk1/2相对磷酸化水平明显下降（0.28±0.05 vs 0.81±0.07,P〈0.05）.结论 caveolin-1基因能够抑制宫颈鳞癌Hela细胞株的生长、促进细胞凋亡;Erk1/2磷酸化水平下降可能在其抑癌机制中发挥重要作用.