茵陈色原酮对结肠癌细胞增殖迁移的作用及其机制研究

目的:探讨茵陈色原酮(capillarisin,Cap)对结肠癌细胞增殖及迁移能力的影响及其机制。方法:采用不同浓度的Cap体外干预结肠癌细胞SW620及正常结肠细胞FHC,CCK-8比色法检测细胞增殖活性,Transwell迁移实验检测细胞迁移能力,实时定量PCR(q PCR)法检测癌基因(K-ras、c-Src、c-Myc)的m RNA表达,Western blot检测细胞上皮-间质转化(EMT)标志蛋白(Ecadherin、Vimentin)表达。结果:与DMSO对照组相比,各组Cap可显著抑制结肠癌细胞SW620增殖活性及迁移细胞数(P<0.05),但对正常结肠细胞FHC增殖及迁移作用无显著差异(P>0.05);与5-FU组相比,各组Cap对于正常结肠细胞FHC的增殖及迁移活性抑制作用显著减小(P<0.05)。与DMSO对照组相比,各组Cap可显著降低结肠癌细胞K-ras、c-Src、c-Myc的m RNA水平。与DMSO对照组相比,Cap高剂量组可提高结肠癌细胞上皮标志物E-cadherin蛋白表达,降低间质标志物Vimentin蛋白表达。结论:Cap可能通过抑制癌基因(K-ras、c-Src、c-Myc)m RNA表达抑制结肠癌细胞增殖,通过逆转EMT过程抑制结肠癌细胞转移。与5-FU相比,Cap可能具有更好的应用安全性,具有开发为新一代天然抗肿瘤单体药物的前景。

PDCA循环法在提高肾脏细针穿刺活检组织制片质量中的应用

PDCA循环法是质量管理的一个通用工具,主要用于企业产品质量的改进,近年来逐渐被应用到医院管理领域并取得了实效[1]。在临床病理工作中,对肾脏细针穿刺活检的病理制片质量与诊断准确率的要求较高。为提高肾脏细针穿刺活检组织制片质量的优良率,保证报告的准确性和及时性,我科自2016年8月开始将PDCA循环法应用到肾脏细针穿刺活检组织制片中,针对存在的问题,制定适合本病理科的规范化肾脏细针穿刺活检组织制片流程,对制片质量进行持续改进,经过1年的实践操作,取得了明显成效,现报道如下。

结肠癌相关转录因子1表达在结直肠癌早期筛查及预后评估中的作用

目的 :分析结肠癌相关转录因子1(CCAT-1)m RNA在结直肠癌患者外周血中的表达水平与临床病理特征及预后生存的关联,探讨CCAT-1在结直肠癌早期筛查及病程预后评估中的作用。方法:采用实时定量PCR法(q PCR)检测结直肠癌(60例)、结直肠腺瘤(30例)及健康志愿者(30例)外周血中CCAT-1 m RNA表达,采用ROC曲线判断CCAT-1对结直肠癌的诊断价值,计算Youden指数确定CCAT-1对结直肠癌的诊断阈值;采用双变量相关(bivariate correlation)Pearson检验分析CCAT-1m RNA表达水平与结直肠癌患者临床病理特征;采用Kaplan-Meier生存分析(Log-rank检验)分析CCAT-1 m RNA表达与结直肠癌患者3年生存率的相关性,绘制生存曲线。结果:结直肠癌患者外周血CCAT-1 m RNA水平相对于结直肠腺瘤患者(P<0.01)、健康志愿者(P<0.01)显著高表达,CCAT-1 m RNA在健康志愿者、结直肠腺瘤及结直肠癌患者外周血中的表达量呈逐渐递增趋势;结直肠癌患者外周血CCAT-1 m RNA表达量与肿瘤直径(P<0.05)、分化程度(P<0.01)、原发灶浸润深度(P<0.01)、淋巴结转移数(P<0.01)、远处转移(P<0.05)及TNM分期(P<0.05)呈显著正相关,与3年生存率呈负相关(P<0.05);CCAT-1 m RNA高表达组生存时间显著低于低表达组(P<0.01)。结论:CCAT-1可作为一种有价值的结直肠癌早期筛查及预后评估的标志物。

CNRIP1启动子区去甲基化对结肠癌细胞糖酵解及增殖、迁移活性的影响

目的:探讨CNRIP1启动子区去甲基化对结肠癌细胞糖酵解途径、细胞增殖及迁移活性的影响。方法:采用5-氮杂胞苷(5-aza C)降低结肠癌细胞SW620 CNRIP1启动子区甲基化水平,以未干预细胞作对照。用亚硫酸盐测序法检测细胞CNRIP1启动子区甲基化水平;分别采用qRT-PCR、Western blot法检测细胞中CNRIP1、糖酵解途径关键酶HK2、PKM2、LDH-A mRNA及蛋白表达水平,生化法检测细胞培养液中乳酸水平;分别采用CCK-8比色法、Transwell法检测细胞增殖及迁移能力。结果:与未干预组细胞相比,5-aza C干预组细胞CNRIP1启动子区甲基化水平降低,CNRIP1 mRNA及蛋白表达升高,HK2、PKM2、LDH-A mRNA和蛋白表达水平及细胞培养液中乳酸水平均降低,细胞增殖及迁移能力均减弱(P均<0.05)。结论:CNRIP1去甲基化可抑制糖酵解途径,从而降低结肠癌细胞的增殖及迁移能力。

高血糖状态结直肠癌相关基因的验证及其诊疗效能评估

目的验证高血糖状态结直肠癌相关基因表达并评估其诊断价值。方法收集109例结直肠癌患者肿瘤组织、远端正常肠黏膜组织及外周血样本、30例糖尿病患者及30名健康志愿者外周血样本,采用实时荧光定量PCR法检测上述样本葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1 (NOX1)、癌胚抗原相关的细胞黏附分子5(CEACAM5)、热休克蛋白60 (HSP60)、组蛋白去乙酰化酶1 (HDAC1)基因mRNA表达,采用Pearson相关性分析基因表达与临床病理参数的关联;采用诊断试验方法计算上述基因在结直肠癌患者血清中表达的灵敏度、特异度、准确度、预测性、正确指数、似然比,绘制受试者工作特征曲线,并计算受试者工作特征曲线下面积,评价多基因联合检测的诊断效能。结果 GRP78 (P=0. 001)、NOX1 (P=0. 022)、CEACAM5 (P=0. 000)、HSP60 (P=0. 044)、HDAC1 (P=0. 047)基因mRNA表达分别与空腹血糖状态呈显著正相关;与正常血糖状态结直肠癌肿瘤组织及血清相比,高血糖状态结直肠癌肿瘤组织及血清中的NOX1 (P=0. 000,P=0. 008)及HDAC1 (P=0. 000,P=0. 037) mRNA表达均显著增高; NOX1mRNA表达与结直肠癌肿瘤直径呈显著正相关(P=0. 013),HDAC1 mRNA表达与结直肠癌发病部位(P=0. 049)、原发灶浸润深度(P=0. 025)、TNM分期(P=0. 042)均呈显著正相关; NOX1、CEACAM5、HDAC1的受试者工作特征曲线下面积分别为0. 931、0. 852、0. 860 (P均=0. 000); NOX1、HDAC1 mRNA在高血糖状态结直肠癌患者血清中表达的特异度、准确度及阴性预测值均在90%以上。联合检测NOX1、CEACAM5、HDAC1表达的灵敏度为98. 82%,特异度为99. 93%。结论联合检测高血糖状态结直肠癌相关基因可提高高血糖人群早期筛查结直肠癌的诊断效能。

两种血性胸腔积液的细胞蜡块制作方法对制片结果的影响

目的:比较传统细胞蜡块制作法(简称传统法)与改良细胞蜡块制作法(简称改良法)在血性胸腔积液中对苏木精-伊红(HE)制片及免疫组化制片结果的影响。方法:选取2018年1月至2021年1月湖州师范学院附属第一医院临床送检的渗出性血性胸腔积液患者样本55例,分别运用传统细胞蜡块制作法与改良细胞蜡块制作法进行制片,比较HE制片及免疫组化制片的优良率。结果:运用传统法的HE制片优良率为74.5%,免疫组化制片优良率为76.4%;运用改良法的HE制片优良率为94.6%,免疫组化制片优良率为92.7%。改良法的HE制片及免疫组化制片不良率均显著小于传统法(χ^(2)=8.419,P=0.004;χ^(2)=5.636,P=0.018)。结论:运用改良法制作血性胸腔积液样本细胞蜡块具有较好的制片效果。

胃癌患者糖脂代谢指标与临床病理学特征的相关性分析

目的探讨胃癌患者糖脂代谢水平与临床病理学特征的相关性。方法收集443例人住湖州师范学院附属第一医院的胃癌患者临床病理参数，统计胃癌患者初入院空腹糖脂代谢指标水平及所占百分比，分析糖脂代谢指标水平与临床病理参数的相关性。结果与糖脂代谢指标正常水平的胃癌患者相比，血清低水平总胆固醇（X^2=7．676）男性胃癌患者显著较少（P〈0．05），低水平高密度脂蛋白（X^2=7．520）、低水平载脂蛋白A1（X^2=6．253）男性胃癌患者均显著较多（P〈0．05）。血清总胆固醇水平与患者年龄（r=-0．116）、肿瘤直径（r=-0．117）及TNM分期（r=-0．111）均呈负相关（P〈0．05）；HDL与肿瘤直径（r=-0．094）、转移淋巴结数量（r=-0．106）、原发灶浸润深度（r=-0．112）、淋巴结转移分级（r=-0．102）及TNM分期（r=-0．107）均呈负相关（P〈0．05）；低密度脂蛋白水平与患者年龄（r=-0．116）呈负相关（P〈0．05）；血清脂蛋白a与肿瘤直径（r=0．170）、转移淋巴结数量（r=0．151）、原发灶浸润深度（r=0．160）、淋巴结转移分级（r=0．153）及TNM分期（r=0．115）均呈正相关（P〈0．05）；载脂蛋白A1与远处转移（r=-0．168）、TNM分期（r=-0．120）均呈负相关（P〈0．05）；载脂蛋白B与远处转移（r=-0．132）呈负相关（P〈0．05）。血糖及三酰甘油水平与胃癌患者临床病理特征无明显关联（P〉0．05）。结论低脂代谢水平、高脂蛋白A血症可能是胃癌恶性程度及进展的代谢特征，监测血脂指标变化可能对胃癌患者病程评估有一定参考价值。

涎腺玻璃样变透明细胞癌临床病理分析

涎腺玻璃样变透明细胞癌（HCCC）较少见,病理诊断中易与其他肿瘤相混淆,现将我们诊断的2例报告如下,并复习有关文献,以提高对这种少见肿瘤的认识.

化疗栓塞对膀胱肿瘤新生血管生成及血管内皮细胞生长因子表达的影响

目的 探讨膀胱动脉化疗栓塞对膀胱肿瘤新生血管生成及血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达的影响。方法 膀胱癌患者30例。临床分期Tis 1例、Ta 2例、T1 6例、T2 11例、T3 9例、T4 1例。病理分级G1 9例、G2 13例、G3 8例。采用丝裂霉素20mg或羟喜树碱10mg联合顺铂60mg经膀胱动脉灌注及明胶海绵栓塞。化疗栓塞前后膀胱镜下取肿瘤组织，免疫组织化学SP法测定VEGF表达及微血管密度（MVD），并进行病理观察及随访。结果 化疗栓塞前后肿瘤VEGF阳性表达率分别为73．33％（22例）及43.33％（13例）；MVD分别为69．81±3．38及56．35±3．26，差异均有统计学意义（P〈0．05）。病理观察栓塞前后瘤体直径分别为（2。17±0．88）及（1．58±0．87）cm，差异有统计学意义（P〈O．05）。化疗栓塞后肿瘤组织明显坏死、退变。30例随访12～36个月，平均24.6个月，5例复发（G1T1、G2T1、G2T3、G3T3、G3T4各1例，单纯移行细胞癌4例、混合癌1例），复发时间为栓塞后6个月1例，6～12个月2例，24～36个月2例。复发组栓塞前后VEGF阳性分别为5例（均为强阳性）及4例（阳性3例、强阳性1例），差异无统计学意义（P〉0．05），但强阳性表达差异有统计学意义（P〈0．05）；MVD值分别为87．35±2．96、72．37±4．11，差异有统计学意义（P〈0．05）。未复发组栓塞后MVD值为53.15±3.50，与复发组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 化疗栓塞能降低膀胱癌组织VEGF表达，减少MVD计数，提示化疗栓塞可影响膀胱癌的分化程度，使肿瘤降级降期，减少术后转移，降低复发率，提高生存率。

遗传性牙龈纤维瘤一家系临床特征及SOS1基因突变筛查

目的检测分析遗传性牙龈纤维瘤病(HGF)一家系患者的临床特点及致病基因。方法通过诊断HGF先证者,收集一个中国汉族非综合征性HGF家系,患者牙龈组织作HE和MASSON染色进行组织病理学分析。采集家族中患者及健康个体的外周血,提取基因组DNA,PCR扩增SOS1基因各外显子并作直接测序,同源性比较分析。结果该中国汉族HGF家系中共有四代10人,其中患者4人(男2人,女2人),符合常染色体显性遗传模式。患者牙龈组织病理显示牙龈黏膜上皮钉突延长,纤维结缔组织增生,MASSON染色显示胶原纤维异常增生。基因突变检测未在SOS1基因外显子区域发现突变点。结论该家系临床特征典型,符合常染色体显性遗传模式。HGF具有一定的遗传异质性,SOS1基因可能不是该中国汉族人HGF家系的致病基因。