HPV E6/E7 mRNA和HPV-DNA检测在不同年龄阶段女性宫颈癌早期筛查的临床价值

目的:观察HPV E6/E7 mRNA和HPV-DNA对不同年龄阶段女性宫颈癌的筛查价值。方法:选取2020年2月至2024年2月期间本院收治的因宫颈疾患接受宫颈活检的患者为研究对象,同时以因其他良性疾病行子宫切除术的患者为对照。根据宫颈癌患者的年龄分布分为>50岁组和≤50岁组。采用HPV E6/E7 mRNA和HPV-DNA技术对标本进行定量测定。比较不同组别、不同年龄组患者HPV E6/E7 mRNA检测结果和HPV DNA检测结果的差异。结果:宫颈癌患者的HPV E6/E7 mRNA阳性率高于宫颈癌前病变组和对照组,且mRNA拷贝数较宫颈癌前病变组和对照组多,差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌患者的HPV DNA检测阳性率明显高于宫颈癌前病变组和对照组,DNA拷贝数较宫颈癌前病变组和对照组多,差异有统计学意义(P<0.05);年龄>50岁和年龄≤50岁宫颈癌患者的HPV E6/E7 mRNA阳性率和mRNA拷贝数均无明显差异(P>0.05);年龄>50岁和年龄≤50岁宫颈癌患者的HPV DNA阳性率和DNA拷贝数均无明显差异(P>0.05)。结论:HPV E6/E7 mRNA和HPV-DNA的表达和拷贝数均与宫颈癌病变有关,是有效的筛查指标,而不同年龄段宫颈癌患者的HPV E6/E7 mRNA和HPV-DNA检测结果无明显差异。

1株携带bla_(NDM-1)的临床多重耐药豚鼠气单胞菌的基因组及表型鉴定

目的分析从粪便筛查分离出的产NDM-1型碳青霉烯酶的豚鼠气单胞菌(XX182)的抗菌药物耐药表型和基因组特征,阐明该菌株的抗菌药物耐药机制及其耐药性转移的能力。方法肉汤微量稀释法检测该菌株的抗菌药物敏感性,PCR检测碳青霉烯酶耐药基因亚型(bla_(NDM)、bla_(VIM)、bla_(IMP)、bla_(KPC)),接合试验检测耐药基因的可转移性,通过全基因组测序(WGS)和生物信息学分析明确该菌株的基因组特征。结果该菌株对头孢菌素、碳青霉烯类、环丙沙星和多黏菌素耐药,对替加环素、阿米卡星和氨曲南敏感。该菌株携带多种抗菌药物耐药基因,主要包括bla_(NDM-1)、bla_(MOX-6)、bla_(RSA-1)、bla_(TEM-1)、aac(3)-Ⅱd、cmlA5、arr-2等。毒力因子分析发现其携带有极鞭毛、侧鞭毛、Ⅵ型分泌系统(T6SS)和溶血素A等毒力因子。结论该豚鼠气单胞菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药主要由产NDM-1型碳青霉烯酶导致,且bla_(NDM-1)耐药基因位于不可接合质粒上。尽管目前气单胞菌属对碳青霉烯类耐药率较低,但仍应加强对该克隆菌株的监测。

时间分辨荧光免疫测定在HBsAg检测中的应用

目的探讨时间分辨荧光免疫测定法(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)在乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检测中的应用价值。方法标本用两种方法检测后,对低浓度标本和稀释后的高浓度标本双份复检。结果973例标本中,阳性检出例数为TRFIA法79例,ELISA法73例,高浓度标本复检两法均为6例,低浓度标本复检,TRFIA法11例,ELISA法7例。结论TRFIA法比ELISA法灵敏度更高,线性范围更宽,在高浓度和低浓度标本检测中更具优势。

铜绿假单胞菌β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的探讨铜绿假单胞菌β-内酰胺酶的检测及耐药性分析。方法抽取铜绿假单胞菌株123株,对其展开体外药敏试验,对耐药率进行统计,而后对β-内酰胺酶进行检测,对比分析β-内酰胺酶阳性与阴性菌株的耐药率。结果经统计发现,本组123株铜绿假单胞菌株中,检出产金属β-内酰胺酶菌株26株,阳性率为21.14%;金属β-内酰胺酶阳性菌株对头孢哌酮、头孢曲松、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、哌拉西林、头孢吡肟、亚胺培南的耐药率分别为100.00%、100.00%、73.08%、26.92%、69.23%、76.92%、100.00%、80.77%、100.00%,均明显高于金属β-内酰胺酶阴性菌株的30.93%、63.92%、10.31%、8.25%、1.03%、21.65%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物存在明显耐药性的主要机制为产金属β-内酰胺酶,因此临床用药过程中,及时展开细菌培养和药敏试验的意义重大,能够有效促进临床合理用药,减少耐药性的发生。

巨幼细胞性贫血细胞形态学诊断分析

目的:通过对巨幼细胞性贫血(MA)细胞形态学的分析以明确MA的临床诊断。方法:对本院血液科2009年6月～2011年6月收治的60例MA患者的临床病例资料进行回顾性分析。结果:血常规中全血细胞减少者32例,5例以粒系细胞显著增生和巨幼变为特征,9例以红系细胞显著增生和巨幼变为特征,其余46例以红系细胞和粒系细胞显著增生和巨幼变为特征。结论:临床上通过对MA患者从血常规、骨髓象进行细胞形态学的分析,结合其临床表现可对其进行有效诊断,并可与再生障碍性贫血、骨髓异常增生综合征及溶血性贫血进行有效鉴别。在治疗上,及时有效补充叶酸或维生素B12可明显改善MA患者的症状。

血栓弹力图对急性脑卒中患者亚低温治疗后凝血功能的监测价值

目的探究血栓弹力图对急性脑卒中患者亚低温治疗后凝血功能的监测价值。方法选择2015年4月~2016年4月在本院接受治疗的86例急性脑卒中患者为研究对象,采用双目盲选法分为研究组和对照组,对照组采用常规治疗方法,研究组采用常规治疗联合亚低温治疗,使用血栓弹力图对两组患者进行监测,对比分析两组患者的血栓弹力图各项监测指标和凝血功能的差异,并分析血栓弹力图指标与凝血功能之间的相关性。结果与治疗前相比,两组患者的血栓弹力图指标与凝血功能指标均有明显变化,组内比较差异均有统计学意义(P<0.05);但是两组患者各项指标在组间比较方面比较差异无统计学意义;对血栓弹力图指标与凝血功能指标进行Persons相关分析,发现血栓弹力图各项指标与急性脑卒中患者各项凝血功能指标之间相关性显著(P<0.05)。结论使用血栓弹力图对急性脑卒中患者亚低温治疗后凝血功能进行监测,能够准确反映出患者的凝血功能的变化情况,为临床治疗提供科学指导,效果显著,值得在临床当中推广运用。

阿托伐他汀对老年高脂血症者内皮功能和hsCRP的影响

[目的]探讨老年高脂血症者应用阿托伐他汀治疗后对血管内皮舒张功能和高敏C-反应蛋白（hs-CRP）的影响.[方法]128 例老年低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C） ≥ 3.37 mmol/L或总胆固醇（TC）≥ 5.18 mmol/L者随机分成阿托伐他汀治疗组65 例及对照组（不接受任何药物治疗）63 例,比较治疗3个月后血脂、血管内皮舒张功能及hs-CRP的变化.[结果]治疗组治疗3个月后与治疗前比较,血脂、hs-CRP 水平和血管内皮依赖性舒张功能有显著改善（ P 〈0.01或 P 〈0.05）;与对照组比较,血脂、血管内皮舒张功能及hs-CRP 水平有明显改善（ P 〈0.01或 P 〈0.05）.[结论]老年高脂血症者应用阿托伐他汀治疗后除改善血脂情况外,可进一步改善内皮依赖性血管舒张功能及减轻炎症反应.

分析孕产妇HBV前S1抗原与血清标志物联合检测结果

目的通过检测孕产妇乙型肝炎病毒感染情况,对孕产妇乙型肝炎预防控制提供依据,并分析HBV前S1抗原和乙型肝炎血清相关标志物联合检测的关系及临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法对2000例孕产妇进行乙型肝炎5项和PreS1-Agc进行检测,并对检测结果进行分析。结果 2000例孕产妇中HBsAg阳性203例,阳性率10.15%;HBsAg阴性血清中未检测出PreS1-Ag;小三阳PreS1-Ag检测阳性。203例HBsAg阳性血清中,PreS1-Ag阳性135例(66.50%),HBeAg阳性68例(33.50%)。结论 PreS1-Ag检测比HBeAg更敏感,是HBV复制的可靠指标之一,与乙型肝炎相关血清标志物联合检测可更准确反映HBV感染与复制状况,及时对孕产妇采取相关措施,对减少母婴传播乙型肝炎,降低新生儿乙型肝炎传播,提高优生优育有着重要意义。

644株老年肺部感染病原菌及耐药性分析

目的:了解引起老年肺部感染的病原菌及耐药性。方法:标本经分离培养,用API细菌鉴定仪鉴定,用相应的ATB药敏试条进行药敏试验。结果:620份老年肺部感染标本分离细菌644株,革兰阴性杆菌为主要病原菌;分离频率居前4位的依次是铜绿假单胞菌、白色念株菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌;肠杆菌科细菌对亚胺培南耐药性最低,非发酵菌中嗜麦芽窄食单胞菌及大肠埃希菌对抗生素呈多重耐药,未发现耐万古霉素的金黄色葡萄球菌。结论:老年肺部感染临床表现危重复杂,死亡率高,治疗时应根据细菌检验报告合理选用抗生素,避免盲目的经验用药,减少或减缓细菌耐药的产生。

DAPT对食管鳞癌细胞株增殖与凋亡影响机制探讨

目的:观察γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch信号通路对食管鳞状细胞癌细胞株增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采用γ-分泌酶抑制剂DAPT处理培养的食管鳞癌Eca109和TE-1细胞株以阻断Notch信号,分别应用CCK-8试剂和流式细胞术检测两种食管鳞癌细胞株的增殖与凋亡情况;同时采用定量PCR检测细胞Notch受体及靶基因Hes-1mRNA的表达,蛋白质印迹法检测与细胞增殖、凋亡相关蛋白Cyclin D1和Bcl-2的表达。结果:DAPT处理明显抑制了食管鳞癌Eca109和TE-1细胞株增殖,5μmol/L DAPT处理Eca109细胞株72h、TE-1细胞株96h后增殖抑制率分别为(61.8±5.3)%和(59.8±2.9)%,与DMSO对照组(17.2±2.6)%和(7.0±2.1)%相比差异有统计学意义,P=0.000 2和P<0.000 1,且抑制作用呈时间和浓度依赖关系。DAPT可诱导Eca09和TE-1细胞株凋亡,5μmol/L DAPT处理组Eca109细胞凋亡率在24和48h分别为(18.24±2.60)%和(21.77±5.82)%,与相应对照组(10.49±2.27)%和(9.74±3.38)%相比凋亡率增加,差异有统计学意义,P值分别为0.017 8和0.036 4;处理组TE-1细胞凋亡率在24和48h分别为(20.21±5.90)%和(32.14±5.92)%,与相应对照组(8.00±2.84)%和(12.59±3.72)%相比凋亡率增加,差异有统计学意义,P值分别为0.032 1和0.008 4。DAPT处理下调两种细胞株Notch2受体、Notch信号靶基因Hes-1及Cyclin D1的表达水平。DAPT处理可上调Eca109细胞Bcl-2水平,但下调了TE-1细胞中Bcl-2水平。结论:γ-分泌酶抑制剂DAPT可抑制食管鳞癌细胞株增殖并促进其凋亡,其机制可能与DAPT阻断Notch信号活化、调控Cyclin D1和Bcl-2的表达有关,阻断Notch信号通路有望成为食管鳞状细胞癌治疗的新靶点。

Notch信号通路与消化系统肿瘤相关性的研究进展

Notch信号是一种遗传进化上高度保守,反映相邻细胞间通信作用的一种信号通路,其不仅在细胞正常发育、分化增殖和凋亡中起着重要的作用,而且与多种肿瘤的发生和发展具有相关性。食管鳞状细胞癌的发生常伴随Notch-1的低表达,但食管腺癌的发生却与Notch信号的高表达相关,且高表达的Notch信号对胃癌形成具有促进作用,其表达量提高的程度预示胃癌形成风险的高低。结肠癌中Notch-1表达的升高与病理分级、淋巴转移和病程相关,而Notch配体Dll-4可促进结肠癌中新生血管的生成有助于癌细胞的转移和远端浸润,与之相反的是Notch-2却可能起到抑制结肠癌生长的作用。总之,目前Notch信号多被视为致癌因素,可促进肿瘤的生长,但在某些肿瘤中也能够诱导肿瘤细胞分化、抑制肿瘤细胞的增殖,表现为致癌与抑癌两种截然相反的作用。应用γ-分泌酶抑制剂(γ-secretase inhibitor,GSI)、小RNA干扰技术和单克隆抗体等方法阻断Notch信号通路,将成为肿瘤治疗的一个新方向。

短发夹RNA下调Notch2表达对食管鳞癌Eca109细胞增殖的影响

目的 :探讨通过转染短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)下调Notch2表达的方法阻滞Notch2信号通路对食管鳞癌Eca109细胞增殖的影响。方法 :首先应用实时荧光定量-PCR法检测包括食管鳞癌Eca109细胞在内的多种肿瘤细胞中Notch受体的表达水平。然后将无效shRNA(Control-shRNA)和针对Notch2基因的shRNA(Notch2-shRNA)分别转染高表达Notch2的Eca109细胞。实时荧光定量-PCR法检测转染后Notch2及其下游靶基因Hes1的mRNA表达,蛋白质印迹法检测转染后Notch2蛋白的表达,CCK-8(cell counting kit-8)法检测Eca109细胞增殖情况,FCM法检测细胞周期变化。结果:食管鳞癌Eca109细胞中Notch2 mRNA高表达。与Control-shRNA转染组相比,Notch2-shRNA转染后Eca109细胞中Notch2 mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.01),下游靶基因Hes1的mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。Notch2-shRNA转染72 h后,Eca109细胞增殖率明显降低(P<0.05);G0/G1期细胞所占百分率为(70.66±6.25)%,明显高于Control-shRNA组的(45.34±1.88)%和未转染对照组的(47.10±1.70)%(P<0.01)。结论 :Notch2在体外培养的食管鳞癌Eca109细胞中高表达,下调Notch2表达可以通过诱导G0/G1期细胞阻滞而减缓Eca109细胞的体外增殖。