表皮葡萄球菌对氟喹诺酮类药物摄入的研究

目的 探讨耐药表皮葡萄球菌中是否存在主动外排系统,以揭示表皮葡萄球菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制。方法 应用荧光法检测表皮葡萄球菌耐药株和敏感株对环丙沙星、司帕沙星的累积量以及加入利血平和碳酰氰间氯苯腙(CCCP)后对环丙沙星、司帕沙星累积量的变化情况。结果 表皮葡萄球菌临床株和敏感株中加入CCCP后菌体内环丙沙星、司帕沙星的累积量变化不大,而利血平可以使SR79菌体内环丙沙星的累积量显著上升。结论 表皮葡萄球菌中可能存在针对亲水性氟喹诺酮药物的主动外排系统。

钩端螺旋体LipL21基因真核表达载体pcDNA3.1(+)/LipL21的构建与鉴定

目的构建钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL21基因片段的真核表达载体,寻找新的预防钩端螺旋体感染的候选疫苗。方法应用PCR技术从钩端螺旋体黄疸出血群赖型56601株基因组模板中扩增LipL21基因,纯化回收后克隆入pUCm-T载体,再亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)。结果双酶切及测序鉴定证明成功构建了LipL21真核表达载体pcDNA3.1(+)/LipL21,DNA测序显示重组质粒含有561 bp的目的基因片段,读码框架正确,无碱基错配及移码突变。测序后结果经与GenBank登录的序列做blast比较,载体上所连目的基因片段序列与GenBank登录的LipL21基因序列完全一致。结论成功构建了钩端螺旋体LipL21基因真核表达载体pcDNA3.1(+)/LipL21。