胚胎干细胞梗死区中心和周边移植治疗急性心肌梗死(英文)

背景：现有治疗手段不足以补充梗死心肌，研究表明干细胞移植有可能促使心肌和血管再生．改善心功能和预后。目的：观察急性心肌梗死区中心和周边移植胚胎干细胞后心肌组织形态学及血液动力学的变化。设计、时间及地点：随机对照动物观察，于2007—03／2008—10在中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系神经生物学实验室完成。材料：SPF级Wistar大鼠40只，随机分为4组：正常对照组、梗死模型组、中心移植组、周边移植组，10只，组。胚胎干细胞-D3株fembryonicstemcells-D3，ES—D3）、布法罗大鼠肝细胞均由中国科学院上海细胞所提供。方法：ES-D3细胞复苏后，以（2．0～5．0）×10^7一种植于培养瓶中，加入含布法罗大鼠肝细胞的条件培养基体外培养分化。除正常对照组外，余3组结扎冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死模型。造模后1周接受细胞移植，ES-D3细胞于移植前1d进行BrdU标记，以胚胎干细胞培养基调整密度至1×10^7L^-1。中心移植组在梗死区选3个点，每点注入10μL细胞悬液（含10^4个细胞）至心室壁内：周边移植组在梗死区周边选3个点同法注入等量细胞悬液。主要观察指标：免疫组化及血流动力学指标检测结果。结果：布法罗大鼠肝细胞条件培养基体外培养的ES-D3细胞，呈相对规则的巢状集落样生长，分化8d即可见部分拟胚体出现自发的节律性收缩活动，心肌肌钙蛋白T免疫染色呈阳性，电镜下可见肌管、肌纤维等肌性结构，证实己分化为心肌细胞。周边移植组BrdU免疫荧光染色呈阳性。而中心移植组呈阴性，进一步对BrdU免疫荧光染色阳性细胞行双抗染色，可见心肌肌钙蛋白T呈阳性表达。移植后4周与正常对照组比较，梗死模型组左室收缩、dp／dmax均减小（P〈0．01），左室舒张末期压上升（P〈0．01），左室质量、左室质量指数均升高（P〈0．01）。与梗死模型组比较，中心移植组各项血流动力学指标无明显变化（P〉0．05）；周边移植组左室收缩压、±dp／dtmax均显著升高（P〈0．01），左室舒张末期压显著减小（P〈0．01），左室质量、左室质量指数、梗死面积均显著减小（P〈0．01）。结论：急性心肌梗死后于梗死周边区移植胚胎干细胞可以阻止心室重构、减少瘢痕面积、改善心功能。

标本固定对组织总RNA和病毒RNA的影响

目的:探讨固定剂、固定时间及温度对RNA病毒感染组织总RNA的完整性、得率及病毒RNA扩增的影响。方法:实验于2004-01/2006-09在武汉大学公共卫生学院流行病学实验室及武汉大学医学院病毒研究所实验室完成。取汉坦病毒76-118株接种乳鼠的感染组织.以沉淀脱水类固定剂[本积分数为1的甲醇、体积分数为0.75的乙醇、体积分数为1的丙酮以及醛类固定剂4%的多聚甲醛磷酸缓冲液(4%PFA)、体积分数为0.1的甲醛共5种固定剂,分别在4℃和室温下固定病毒感染组织6,12.24 h和48 h。从固定后的标本中直接提取组织总RNA,检测RNA完整性及组织总RNA得率。用巢式RT-PCR扩增病毒RNA序列.电泳检测PCR产物并行灰度扫描。对RNA得率及PCR产物电泳所测灰度值进行统计学分析.反映各种固定方式对病毒RNA和细胞总RNA降解的影响。结果:①RNA完整性:与立即冰冻或新鲜组织比较,体积分数为1的甲醇固定24 h,RNA完整性损伤不明显;体积分数为0.75的乙醇、体积分数为1的丙酮固定12 h后RNA开始出现损伤带.24 h出现明显的损伤;而体积分数为0.1的甲醛、4% PFA固定6 h就开始出现明显的损伤.固定24 h几乎很难看清RNA条带。②RNA得率析因分析结果显示,不同固定剂、固定时间、固定温度下固定的组织中所提RNA的得率差异有显著性(P<0.01),并有显著性交互作用(P<0.01)4℃甲醇固定6 h的RNA得率最高,体积分数为0.1的甲醛在室温下固定48 h得率最低。③固定后标本巢式RT-PCR,除体积分数为0.1的甲醛固定48 h后扩增结果不稳定外,其余各固定方式均能扩增出特异性带。对电泳结果进行灰度扫描时.与甲醛相比.甲醇、乙醇和丙酮固定的标本中扩增的产物电泳条带更亮,灰度值更高(P<0.01)。结论:①对RNA完整性的保存沉淀脱水类固定剂明显优于醛类固定剂。②对RNA病毒感染组织固定时间不宜偏长.固定过程的温度宜选用4℃。

雷公藤甲素在羊膜复合异体神经移植治疗坐骨神经损伤中的应用

目的:探讨雷公藤甲素对羊膜复合异体神经移植促神经再生和功能恢复的作用。方法:成年SD雄性大鼠30只,随机分3组,切除10mm坐骨神经造模,造模后3组分别采用自体神经移植、异体神经移植加雷公藤药物、异体神经移植。移植术后第24周,观察移植段神经形态学、坐骨神经指数(SFI,术后第8周开始)、胫前肌湿重、单位而积移植神经中段轴突数量和髓鞘厚度。结果:移植术后第24周自体神经移植组和异体神经移植加雷公藤药物组的坐骨神经指数、单位面积移值神经中段轴突数量和髓鞘厚度、胫前肌湿重各项检测指标无显著差异(P>0.05),但再生神经形态和功能恢复良好,检测的各项指标明显优于异体神经移植组(P<0.05)。

人体解剖学实践教学改革及效果评价

目的改革人体解剖学实践教学以提高学生综合素质,并评价改革效果。方法根据地方本科院校特色,构建了培养创新型人才的人体解剖学实践教学体系。除常规的人体解剖学实验室教学外,开展了导师制管理、探索性设计性实验及summer students暑期科研训练等实践活动;实践改革体系中还包含了对实践教学的考核方式的改革。这一教学模式已经在三届预防医学本科的人体解剖学教学中实施,并利用访谈和问卷调查的方式对实践教学改革进行了评价。结果培养创新型人才的人体解剖学实践教学体系提高了学生的多方面能力,其中主要是发现问题和解决问题的能力、获取信息的能力、人际交流和协作能力。结论人体解剖学实践教学体系的改革是提高学生综合实践能力的一种可行方法。

大学新生专业思想影响因素的分析与对策

为了解大一新生专业思想情况并分析其相关影响因素,在湘南地区某新成立的本科院校随机抽取9个专业675名大学一年级新生进行问卷调查。该校学生专业思想比较稳定,中间型,不稳定型的学生分别为29.2%、58.6%、12.2%。志愿选择、所读专业、对专业的认知程度是影响大一新生专业思想稳定的主要因素。针对以上因素并结合本校的实际情况,对开展专业思想教育提出了相应的建议和对策。

大鼠急性心肌梗塞后在不同部位移植胚胎干细胞疗效研究

目的探讨大鼠急性心肌梗塞（AMI）后在不同部位移植胚胎干细胞（ESC）的心肌组织形态学及血液动力学变化。方法Wistar大鼠40只随机分为正常对照组、梗塞未治疗组（梗塞组）、梗塞中心移植组（中心组）、梗塞周边移植组（周边组）共4组。结扎冠状动脉左前降支制成急性心肌梗塞模型，梗塞后1周移植体外分化并经标记的ESCs，移植后4周分别检测组织形态及血流动力学指标的改变。结果周边组移植细胞稳定存活，而中心组移植细胞未能存活。心功能及组织学检测表明中心组与梗塞组无显著差异（P〉0．05）；与梗塞组比较，周边组梗塞面积显著小于梗塞组（P〈0．01），（21．0±1．3）％VS（40．7±2．2）％；左室重量小于梗塞组（P〈0．01），（702．0±24．0）nagVS（882．2±32．6）mg；反应左室收缩功能的指标左室内压最大上升速率和左室内压均大于梗塞组（P〈0．01），分别为（7．9±0．7）X103mmHg／sVS（5．9±0．5）×103mmHg／s和（117．5±10．7）mmHgVS（89．24-8．1）mmHg；而左室舒张末期压力均明显小于梗塞组（P〈0．01），（8．5±0．3）mmHgV8（13．6±1．2）mmI-Ig。结论梗塞周边区移植ESCs可以阻止心室重构、减少瘢痕面积、改善心功能。

郴州市美沙酮维持治疗的海洛因成瘾者基线调查

目的了解进入美沙酮维持治疗门诊吸毒人群的吸毒行为、性行为等特征,为艾滋病防制措施的制定提供依据。方法2006年1-9月,对进入药物维持治疗门诊的177名戒毒人员进行问卷调查,调查其人口学、共用注射器具吸毒行为和性行为等情况。结果男性占83.6%,女性占16.4%,平均年龄为34.75±5.02岁,HIV阳性率为16.7%。在过去1个月有49人(27.7%)与他人共用过吸毒针具,过去3个月被公安部门抓住过有20人(11.3%)。在被调查者中60人(33.9%)有过婚外性行为,而最近1次性行为时仅15人(25%)使用了安全套,未使用的有45人(75%)。结论在进入维持治疗吸毒人群中存在HIV传播的高危性,迫切需要在美沙酮维持治疗的同时进行预防艾滋病的健康教育和行为干预。