低剂量阿奇霉素对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者气道中肿瘤坏死因子-α的影响及疗效

目的观察低剂量阿奇霉素对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者气道中肿瘤坏死因子(TNF)-α的影响及疗效。方法应用前瞻、随机分组、自身前后对照方法,稳定期COPD(Ⅲ~Ⅳ级)患者52例分为常规组(基础治疗)和治疗组(基础治疗+阿奇霉素0.25 g/d),比较治疗前和治疗3、6个月后患者气道中TNF-α浓度、肺功能、运动耐量和生活质量。结果 41例受试者完成实验,其中常规组22例,治疗组19例。两组患者气道中TNF-α浓度随治疗时间延长依次降低,而6 min步行距离(6MWD)和深吸气量(IC)依次增加,以治疗组幅度较大;与治疗前比较,治疗组6个月后差异均有统计学意义;两组同时点比较,6个月后TNF-α浓度和6MWD差异均有统计学意义(P【0.05)。TNF-α浓度与IC或6MWD均呈负相关性。两组患者无明显不良反应。结论低剂量阿奇霉素可能抑制稳定期COPD患者气道中炎症促进因子(如TNF-α),降低气道炎症反应,改善肺泡过度充气,提高运动耐力,具有较好的安全性。

苏拉明联合紫杉醇对LA795肺腺癌小鼠移植瘤生长的抑制作用及机制

目的观察苏拉明联合紫杉醇对LA795肺腺癌小鼠移植瘤生长的抑制作用,并探讨其作用机制。方法将32只皮下接种LA795肺腺癌细胞T739小鼠随机分为对照组、紫杉醇组、苏拉明组和联合组,每组8只。观察移植瘤生长情况,饲养24 d后处死小鼠,剥离皮下移植瘤,采用免疫组化检测移植瘤组织中血管生成素-2(Ang-2)和微血管密度(MVD)。结果紫杉醇组、苏拉明组和联合组移植瘤的生长明显受到抑制,以联合组生长最慢。对照组移植瘤质量大于其他3组(P<0.05)。紫杉醇组和苏拉明组移植瘤质量大于联合组(P<0.05);苏拉明组、紫杉醇组及联合组的抑瘤率分别为22.638%、25.629%及54.109%,其Q值为1.274(>1.15)。苏拉明组和联合组移植瘤组织内Ang-2的表达均低于对照组和紫杉醇组(P<0.05)。对照组移植瘤组织内MVD高于其他3组(P<0.05);紫杉醇组或苏拉明组移植瘤组织内MVD高于联合组(P<0.05)。移植瘤组织中Ang-2表达、MVD与移植瘤质量均呈正相关(r=0.468、0.526,P<0.01)。结论苏拉明可下调肿瘤组织Ang-2表达,抑制肿瘤内微血管形成,与紫杉醇联合对LA795肺腺癌小鼠皮下移植瘤生长发挥协同抑制作用。

川芎嗪治疗慢性肺心病严重心衰患者临床疗效及安全性分析

目的分析川芎嗪治疗慢性肺心病严重心衰患者的临床疗效及安全性。方法随机将该院2016年9月至2017年11月收治的78例慢性肺心病严重心衰患者作为研究对象,回顾性分析其病历资料,依据治疗差异将其分成两组,其中一组采用常规对症治疗,为对照组,另一组在此基础上给予磷酸川芎嗪治疗,为研究组,比较两组患者的治疗效果。结果研究组的治疗有效率为92.50%(37/40),明显高于对照组的76.32%(29/38),数据比较差异存在统计学意义(P<0.05);研究组患者各项血液流变学指标均优于对照组,数据比较差异具有统计学意义(P<0.05);研究组不良反应发生率为7.50%(3/40),低于对照组的26.32%(10/38),数据比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论磷酸川芎嗪治疗慢性肺心病严重心衰疗效显著,可有效改善患者血液流变学指标,且不良反应较少,安全可靠,可以在临床中进行推广。

苏拉明联合阿霉素对肺腺癌小鼠移植瘤组织中bFGF和NF-К Bp65表达的调控及意义

目的探讨苏拉明联合阿霉素对肺腺癌小鼠移植瘤组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和核因子-КBp65(NF-КBp65)表达的调控及意义。方法复制肺腺癌LA795细胞的T739小鼠异体移植瘤模型。40只实验小鼠皮下移植处均成瘤,接种后4d随机分为4组,每组10只。对照组:生理盐水0.2mL/只,于接种后第4天开始腹腔注射,1次/d,共16次;阿霉素组:阿霉素[2mg/(kg·d)]溶于0.2mL生理盐水中,于接种后第4、11和18天各腹腔注射一次;苏拉明组:苏拉明[10mg/(kg·d)]溶于0.2mL生理盐水中,余同对照组;联合组(阿霉素+苏拉明):按阿霉素组和苏拉明组用药。24d后处死,取肺组织观察肺转移例数,计数肺转移率及肺转移结节数;收集肿瘤标本固定,用免疫组化和图像分析系统定量检测肿瘤组织bFGF和NF-КBp65的表达,用TUNEL原位凋亡法检测移植瘤组织中肿瘤细胞,计算凋亡指数。结果联合组与苏拉明组肺转移率低于对照组,以联合组最低,联合组差异有显著性,苏拉明组差异无显著性。各治疗组肺转移结节数均低于对照组,以联合组最低,差异均有显著性;bFGF灰度值、NF-КBp65灰度值和凋亡指数均高于对照组,以联合组最高,差异均有显著性。各组间bFGF灰度值与肺转移结节数呈反向变化,直线相关分析显示均呈负相关,NF-КBp65灰度值与凋亡指数呈同向变化,作直线相关分析显示均呈正相关。结论阿霉素可能协同苏拉明通过抑制bFGF和NF-КBp65的表达,从而抑制肿瘤细胞转移,促进肿瘤细胞凋亡。

补中益气丸对重度稳定期慢性阻塞性肺疾病患者的疗效

目的探讨补中益气丸对重度稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的临床疗效。方法收集我科收治的COPD急性加重期的住院患者,经治疗后病情稳定的重度患者85例,按随机数字表分为对照组38例和研究组47例。对照组行常规治疗,研究组在对照组的基础上联合补中益气丸治疗,治疗时间3个月。采用第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1/预计值×100%)评估患者治疗前后的肺功能,采用圣乔治呼吸问卷(SGRQ)评价两组患者的生存质量,观察两组治疗期间急性加重的发生率。结果两组治疗前后FEV1占预计值百分比比较差异无统计学意义(P>0.05),但对照组治疗前后FEV1占预计值百分比的下降幅度比研究组大(P<0.01)。两组治疗前后SGRQ评分比较差异无统计学意义(P>0.05),但对照组治疗前后SGRQ评分的差值小于研究组的差值(P<0.05)。治疗期间,对照组患者急性加重的发生率为26.32%,高于研究组的8.51%(χ~2=4.840,P<0.05)。结论补中益气丸可能有降低重度稳定期COPD患者肺功能下降速度,减少急性加重次数,提高患者生存质量的作用。

IL-12在哮喘动物模型BALF中的动态变化及意义

目的观察哮喘动物模型支气管肺泡灌洗液(branchoalveolar lavage fluids,BLAF)中白介素-12(interleukine-12,IL-12)的动态变化及对嗜酸性细胞(eosinophile,EOS)凋亡指数的影响。方法将62只Wistar大鼠喂养7d后,随机分为正常对照组(6只)、哮喘组(56只),哮喘组又随机各取8只分为7个不同的时相组。哮喘各时相组于第1天及第7天用蛋白粉(ovalbumin,OVA)10 mg、氢氧化铝20 mg和生理盐水制成的2 ml悬液腹腔注射致敏,对照组用生理盐水2 ml腹腔注射;哮喘各时相组第15 d开始均用1%OVA悬液雾化吸入激发,1次/d,1 h/次,共7 d,正常对照组用生理盐水代替1%OVA悬液,余同哮喘组。末次激发后,对照组1 h麻醉,哮喘组分别于1 h、8 h、24 h、48 h、96 h、7 d和14 d麻醉,各组麻醉后行支气管肺泡灌洗(branchoalveolar lavage,BAL),用流式细胞仪测定BLAF中EOS凋亡指数,用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定IL-12浓度。结果哮喘各时相组BALF中,IL-12浓度的动态变化呈双峰,1 h上升,8～24 h迅速回落到低峰,48 h再次上升,96 h达到高峰,此后下降,14 d降至对照组水平;而EOS凋亡指数的动态变化呈双峰,1 h上升,而8 h下降,24 h降至低峰,48～96 h快速上升,达到高峰,随后下降,14 d降至对照组水平;IL-12与EOS凋亡指数呈同步变化,两者作直线相关分析呈正相关。结论在哮喘大鼠气道中,IL-12可能通过调节EOS凋亡指数,从而调节气道的炎症反应。

氧化苦参碱对哮喘大鼠肺组织中IL-17表达的影响

目的观察不同剂量的氧化苦参碱(Oxymatrine,Oxy)对哮喘大鼠肺组织中IL-17蛋白和IL-17mRNA表达的影响,探讨Oxy治疗哮喘的作用机制。方法清洁级40只SD雌性大鼠按照随机数字表分为5组,每组8只。对照组第1天和第8天各腹腔注射生理盐水2mL,第15天开始应用37℃生理盐水雾化吸入激发,1次/天,60min/次,共7d。哮喘组OVA10mg加生理盐水制成2mL悬液代替生理盐水腹腔注射,1%OVA代替生理盐水雾化吸入激发,余同对照组。Oxy低、中、高剂量组在每次激发前30min分别用Oxy按50、100、150mg/kg腹腔注射,余同哮喘组。末次刺激后24h处死大鼠,取右上肺组织置液氮溶液中速冻,置于-80℃冰箱保存,分别应用Westernblot和RT-PCR检测组织中IL-17蛋白和IL-17mRNA;收集支气管肺泡灌洗液,检测炎症细胞数。结果对照组、Oxy高剂量组、Oxy中剂量组、Oxy低剂量组和哮喘组肺泡灌洗液炎症细胞数依次增加,IL-17蛋白和IL-17mRNA表达依次升高。与哮喘组比较,Oxy低、中、高剂量组和对照组炎症细胞总数和嗜酸性细胞数均下降(P<0.05),IL-17蛋白和IL-17mRNA表达减少(P<0.05)。与对照组比较,Oxy中、低剂量组炎症细胞总数、嗜酸性细胞数、IL-17表达增加(P<0.05),Oxy高剂量组则无明显变化(P>0.05)。结论Oxy可能通过降低哮喘大鼠肺组织中炎症促进因子IL-17蛋白和IL-17mRNA的表达,抑制肺组织炎症反应,Oxy抑制肺组织炎症反应随剂量增加而增强。

氧化苦参碱对哮喘大鼠肺组织IL-10表达的影响

目的:观察不同浓度氧化苦参碱(Oxymatrinem,Oxy)对哮喘大鼠肺组织IL^(-1)0表达的影响,并探讨其作用机制。方法:构建哮喘大鼠模型,将40只清洁级健康雌性SD大鼠随机分成5组,每组8只:A:哮喘组(仅卵蛋白(Ovalbumin,OVA)致敏)、B:低浓度组(Oxy 50 mg/kg)、C:中浓度组(Oxy 100 mg/kg)、D:高浓度组(Oxy 150 mg/kg)、E:对照组(生理盐水),末次激发24 h后处死全部大鼠,取大鼠肺脏,HE染色观察肺组织病理改变,采用RT-PCR、Western Blot测定各组肺组织中IL^(-1)0基因及蛋白水平的表达。结果:HE结果显示,哮喘组可见大量炎症细胞浸润,气管平滑肌明显增厚。对照组肺泡壁薄且光滑,未见明显炎性细胞的浸润,不同浓度氧化苦参碱药物干预组其肺组织炎症细胞浸润及气管平滑肌病变程度随着用药浓度的增高呈逐渐减轻趋势。RT-PCR以及Western blot检测IL^(-1)0发现,哮喘组、氧化苦参碱低浓度组、氧化苦参碱中浓度组与对照组相比IL^(-1)0的表达均有所减低(P<0.05),而氧化苦参碱高浓度组与对照组比较,IL^(-1)0的表达无统计学意义(P>0.05);氧化苦参碱中浓度组、氧化苦参碱高浓度组与哮喘组相比IL^(-1)0的表达均有所增高(P<0.05),氧化苦参碱低浓度组与哮喘组相比IL^(-1)0的表达无统计学意义(P>0.05)。结论:氧化苦参碱抑制、控制哮喘发作可能与促进肺组织中IL^(-1)0基因、蛋白的表达相关,且促进程度在一定范围内与浓度呈正比。

MiR-192-5p在支气管哮喘气道炎症中的作用

目的探讨微小RNA-192-50(miR-192-5p)在支气管哮喘(简称哮喘)患者血浆中的表达,及其对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖、炎性因子的表达以及细胞周期相关蛋白的影响。方法将本院收治的65例急性哮喘患者作为哮喘组,并选取同时期年龄相仿的65例健康人员作为健康对照组。用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测哮喘患者血浆中miR-192-5p的表达水平。将ASMCs随机分为空白组(常规培养,不做任何处理)、模型组(20 ng·mL^(-1)TNF-α处理24 h)、转染对照组(转染模拟物阴性对照mimic-NC后,用20 ng·mL^(-1)TNF-α处理24 h)和转染组(转染miR-192-5p mimic后用20 ng·mL^(-1)TNF-α处理24 h)。用噻唑蓝(MTT)法检测ASMCs的增殖活力;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测ASMCs细胞上清液中炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6水平;用蛋白质印迹法检测细胞周期相关蛋白Cyclin D1和CDK6蛋白的水平。结果miR-192-5p在健康对照组和哮喘组血浆中的相对表达分别为1.01±0.09,0.44±0.05,与健康对照组相比,哮喘组血浆中miR-192-5p显著低表达(P<0.05)。空白组、模型组、转染对照组、转染组ASMCs上清液中IL-1β的水平分别为(132.58±17.41),(519.48±38.94),(509.41±20.34)和(204.14±28.71)pg·mL^(-1),IL-6的水平分别为(86.99±6.83),(639.21±56.25),(656.72±69.35)和(301.86±34.98)pg·mL^(-1),Cyclin D1蛋白的表达水平分别为0.36±0.02,0.95±0.08,0.97±0.09和0.48±0.03;CDK6蛋白的表达水平分别为0.11±0.01,1.04±0.09,1.01±0.08和0.16±0.02。模型组与空白组,转染对照组与转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-192-5p在支气管哮喘患者血浆中表达下调,过表达miR-192-5p抑制TNF-α诱导的ASMCs增殖、炎症和细胞周期相关蛋白。

白藜芦醇下调NF-κB介导的MMP-9表达抑制人NCI-H446细胞的侵袭迁移

目的观察白藜芦醇对肺癌细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养人小细胞肺癌NCI-H446细胞,用不同浓度的白藜芦醇刺激。小室侵袭实验检测NCI-H446细胞的迁移与侵袭;Western blot检测MMP-9表达以及NF-κB p65亚基核转位;荧光素酶报告基因分析MMP-9和NF-κB活性。结果 50 nM白藜芦醇孵育24 h后,其迁移与侵袭率分别降低了37%和33%;Western blot显示,白藜芦醇能抑制p65核转位;此外,白藜芦醇能以剂量依赖性方式抑制MMP-9的转录活性,NF-κB突变后报告基因活性显著降低。结论白藜芦醇可通过抑制NF-κB介导的MMP表达从而抑制NCI-H446细胞侵袭迁移。

苏拉明联合阿霉素对肺腺癌小鼠移植瘤组织中HIF-1α和VEGF表达的调控及意义

目的研究苏拉明联合阿霉素对肺腺癌小鼠移植瘤组织中缺氧诱导因子-1α(H IF-1α)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的调控及对移植瘤增殖的影响。方法复制肺腺癌LA795细胞的T739小鼠异体移植瘤模型。40只实验小鼠皮下移植处均成瘤,接种后4d随机分为4组,10只/组。对照组:生理盐水0.2 m l/只,于接种后第4天开始腹腔注射,1次/d,共16次;阿霉素组:阿霉素(2 mg.kg-1.d-1)溶于0.2 m l生理盐水中,于接种后第4,11,18天各腹腔注射1次;苏拉明组:苏拉明(10 mg.kg-1.d-1)溶于0.2 m l生理盐水中,余同对照组;联合组(阿霉素+苏拉明):按阿霉素组和苏拉明组用药。肿瘤接种后24 d,测量小鼠皮下肿瘤最大长径(a)和横径(b),计算肿瘤体积;处死后剥离皮下肿瘤称湿重,收集肿瘤标本固定,用免疫组化和图像分析系统定量检测肿瘤组织H IF-1α、VEGF、微血管密度(MVD)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果各治疗组肿瘤体积和湿重均低于对照组,其中以联合组最低,差异有统计学意义。苏拉明组和联合组:肿瘤组织中H IF-1α和VEGF的灰度值均高于对照组,MVD的灰度值和PCNA增殖指数均低于对照组;H IF-1α和VEGF的灰度值以联合组最高,MVD和PCNA增殖指数以联合组最低,差异有统计学意义。阿霉素组:H IF-1α和VEGF的灰度值均高于对照组,但差异无统计学意义;低于联合组,差异有统计学意义;MVD低于对照组,但差异无统计学意义;高于联合组,差异有统计学意义;而PCNA增殖指数低于对照组,高于联合组,差异有统计学意义;各组间H IF-1α和VEGF的灰度值与MVD和PCNA增殖指数呈反向变化,直线相关分析显示均呈负相关。结论阿霉素可能协同苏拉明通过抑制H IF-1α和VEGF的表达,从而抑制肿瘤组织新生血管形成和肿瘤细胞增殖。

姜黄素对急性肺损伤大鼠的保护作用及分子机制研究

目的探讨血红素加氧酶(HO-1)在姜黄素减轻脂多糖(LPS)所致急性肺损伤(ALI)中的作用。方法将大鼠随机分为5组:正常组、ALI模型、LPS+姜黄素组、LPS+姜黄素+氯血红素(Hm)组以及LPS+姜黄素+锌原卟啉(ZnPP)组。给药后进行肺组织的形态学观察,并测定丙二醛(MDA)的含量以及HO-1的活性;RT-PCR和Western blot检测HO-1 mRNA和蛋白的表达情况。结果用LPS成功复制出ALI模型,同时,肺组织中MDA含量、HO-1蛋白活性、HO-1 mRNA以及蛋白水平均高于阴性对照组(P均<0.05);姜黄素+LPS组、姜黄素+LPS+Hm组肺组织损伤程度、MDA含量低于LPS模型组,但HO-1活性、mRNA和蛋白水平高于相应LPS组(P均<0.05)。LPS+姜黄素+ZnPP组肺损伤程度、MDA含量高于LPS组,而HO-1活性、mRNA和蛋白水平低于LPS组(P<0.05)。结论姜黄素对ALI的保护作用可能通过增强HO-1活性、上调mRNA和蛋白表达水平而实现的。

哮喘豚鼠气道中血管内皮细胞生长因子和内皮抑素动态变化对气道重塑的影响

目的探讨哮喘豚鼠气道中血管内皮细胞生长因子（VEGF）和内皮抑素（ES）动态变化对气道重塑的作用。方法将40只豚鼠随机分为正常对照组（C组）、生理盐水组（N组）、哮喘3d组（A1组）、哮喘7d组（A2组）和哮喘21d组（A3组），8只／组。C组豚鼠不行任何处理。N组分别于1d和8d腹腔注射生理盐水2ml，15d开始用37℃生理盐水雾化吸入，1次／d，3～5min／次，共3d；A1、A2和A3组用卵蛋白（OVA）10mg、氢氧化铝20mg制成2ml悬液代替生理盐水作腹腔注射，用1％OVA代替生理盐水分别水雾化吸入3d、7d和21d，其他方法同N组。末次激发24h后麻醉行支气管肺泡灌洗，收集支气管肺泡灌洗液（BALF）用酶联免疫（ELISA）法测VEGF和ES浓度。用图像分析仪测定气道内周径（Pi），外周径（Pe），并计算管壁面积（WA），气道平滑肌面积（SMC—A），气道平滑肌细胞数（N），且WA、SMC—A、N均用Pi进行标准化。结果哮喘豚鼠随病程延长，WA／Pi、SMC-A／Pi、N／Pi和气道中VEGF浓度进行性升高，与C组和N组比较，哮喘各组中SMC-A／Pi、N／Pi和VEGF浓度差异有统计学意义，A，和A，组中WA／Pi差异有统计学意义。哮喘豚鼠气道中VEGF浓度与wA／H呈正相关（r=0．51，P〈0．05），VEGF／ES与WA／Pi呈正相关（r=0．78，P〈0．01）。结论VEGF／ES平衡失调可能在哮喘豚鼠气道重塑起重要作用。