复方桐叶烧伤油及其原料脂溶性成分分析

目的对白花泡桐叶脂溶性成分提取方法进行比较并对复方桐叶烧伤油及其原料白花泡桐叶和湘产芝麻油的成分进行比较分析。方法采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)并结合保留指数对超声辅助提取法、索氏提取法提取白花泡桐叶脂溶性成分进行分析,并对湘产芝麻油及复方桐叶烧伤油的成分进行比较分析,用峰面积归一化法测定各化合物的相对百分含量。结果超声辅助提取法鉴定了28个组分,占其总量的89.67%;索氏提取法分离鉴定了44个组分占其总量的98.22%;湘产芝麻油中共鉴定了12个组分,占总样品的99.34%;复方桐叶烧伤油中鉴定了24个组分,占总样品的98.91%。复方桐叶烧伤油主要含有亚油酸、油酸、棕榈酸、β-谷甾醇、芝麻素、α-生育酚、角烯鲨等活性成分,角鲨烯、α-生育酚来自于白花泡桐叶,油酸、芝麻素、β-谷甾醇来自于芝麻油。结论复方桐叶烧伤油各主要成分均来自原料,可为其药理物质基础及原料质量控制标准研究提供科学依据。

湘西桐叶药材熊果酸及齐墩果酸的HPLC法测定

建立一种高效、准确、稳定的桐叶熊果酸和齐墩果酸测定方法,测定湖南省湘西地区桐叶药材中熊果酸和齐墩果酸含量.采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱条件依次为,色谱柱:TADE-PAKAF-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-甲醇-0.5%醋酸铵溶液(体积比61∶18∶21);流速:1 mL/min;检测波长:210 nm;柱温:35℃;进样量:10μL.结果表明:齐墩果酸与熊果酸分离度为1.73,均符合要求;熊果酸和齐墩果酸对照品分别在0.4976~9.9520μg/mL和0.1261~2.5230μg/mL范围内线性关系良好(r均为0.9999);熊果酸、齐墩果酸平均加样回收率分别为99.93%,98.97%;湘西产桐叶含熊果酸4.54~7.07 mg/g,含齐墩果酸2.50~3.20 mg/g.HPLC法分离效果好、灵敏度高、准确度高,是检测桐叶中熊果酸、齐墩果酸含量的科学有效手段.

HPLC法检测药用白花泡桐熊果酸及木犀草素的含量

通过HPLC法比较湘西宏成制药有限责任公司不同中药种子繁殖基地白花泡桐叶中熊果酸和木犀草素的含量。所采用的色谱柱为shim—Pack C18（4．6mm×150mm，5μm），测定熊果酸的流动相为甲醇-水-乙酸（85：15：0．5），流速为1．0mL／min，检测波长210nm；测定木犀草素的流动相为甲醇-水-乙酸（55：44：1），流速为1．0mL／min，检测波长350nm。试验表明，熊果酸在1～15μg范围内线性关系良好，回归方程为Y=0．0206X-0．4666，R=0．9990，平均回收率为96．1％，RSD为1．47％；木犀草素在0．1～1μg范围内线性关系良好，回归方程Y=0．0201X＋0．0020，R=0．9990，平均回收率为96．5％，RSD为1．65％。检测结果表明，宏成公司4号基地白花泡桐叶中熊果酸和木犀草素的含量显著高于其他3个基地白花泡桐。试验为白花泡桐药材质量标准的建立提供理论依据。

药用白花泡桐内生细菌的分离鉴定及抑菌活性检测

为开发新的抑菌活性物质,以湘西药用白花泡桐叶片为材料,采用组织分离法从药用白花泡桐叶片中分离内生细菌,通过对峙培养法检测内生细菌发酵液对2株病原真菌的抑菌活性,根据菌株形态、生理生化特性及16S rRNA基因序列系统发育分析对活性菌株进行鉴定。结果表明:从白花泡桐叶片中筛选出对水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)和烟草拟黑根霉菌(Thielaciopsis basicola)生长有抑菌作用的5株内生细菌,其中,JDB-1菌株抑菌活性最强,其形态特征、生理生化特征与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的特征基本一致,而其16S rRNA基因序列在系统发育树中与枯草芽孢杆菌同属一个类群,序列同源性达99%,即JDB-1菌株为枯草芽孢杆菌。

HPLC测定白花泡桐叶不同月份熊果酸和木犀草素的含量

为了比较湘西宏成制药有限责任公司不同中药种子繁殖基地白花泡桐叶中熊果酸和木犀草索6月到9月间含量的变化，采用Shim—PackC18色谱柱，测定熊果酸的流动相为甲醇-水-乙酸（85：15：0．5），检测波长210nm；测定木犀草索的流动相为甲醇-水-乙酸（60：39：1），检测波长350nm。结果显示，熊果酸的线性范围为1-15μg（r=0．9996），平均回收率为98．3％（RSD=I．10％，n：5）；木犀草素的线性范围为0．01—0．09μg（r=0．9991），平均回收率为98．7％（RSD=2．25％，n=5）；研究结论为7月份的白花泡桐叶中熊果酸和木犀草素含量最高，为药物原料的采收时间的划定提供了理论依据。

桐叶中齐墩果酸和熊果酸的薄层色谱鉴别

目的:建立桐叶齐墩果酸和熊果酸的薄层色谱(TLC)鉴别方法。方法:将点于硅胶G板上的样品点以1%碘-二氯甲烷溶液对斑点进行原位预处理,环已烷-乙酸乙酯-冰醋酸(10∶3∶0.5)为展开剂。结果:桐叶中齐墩果酸和熊果酸能够达到有效的分离和检识。结论:本TLC法简便、可靠,使桐叶鉴别更具客观性和专属性。

高效液相色谱法测定复方桐叶烧伤油中熊果酸和齐墩果酸的含量

目的:建立高效液相色谱(HPLC)法测定复方桐叶烧伤油中熊果酸和齐墩果酸的方法。方法:采用HPLC法,TADE-PAK AF-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-甲醇-0.5%醋酸铵溶液(61∶18∶21);流速:1 mL/min;检测波长:210 nm;柱温:35℃;进样量:10μL。理论板数按熊果酸峰计算不低于5000,研究测定复方桐叶烧伤油中的熊果酸和齐墩果酸含量。结果:熊果酸和齐墩果酸对照品分别在0.4976μg~9.952μg和0.1261μg~2.523μg范围内线性关系良好(r均为0.9999),熊果酸和齐墩果酸平均加样回收率分别为100.20%和100.02%。结论:HPLC含量测定方法简单、快速、准确、灵敏、稳定,可用于复方桐叶烧伤油的质量控制。

土家药桐叶与台湾泡桐叶的鉴别研究

目的：为桐叶和台湾泡桐叶药材鉴别提供方法。方法：对桐叶和台湾泡桐叶进行药材性状鉴别、显微特征观察、薄层色谱鉴别。结果：桐叶上表面较光洁，捏之不粘手；台湾泡桐叶表面有较多的毛，捏之粘手。桐叶主脉表皮的分枝状非腺毛分枝2-20分枝，腺毛头部圆球形，薄壁细胞中含草酸钙方晶，海绵组织中含草酸钙簇晶；台湾泡桐叶主脉表皮的分枝状非腺毛2—4分枝，腺毛头部倒圆锥形，薄壁细胞中含草酸钙方形、长方形晶体。桐叶含有齐墩酸酸和熊果酸成分，台湾泡桐叶含有熊果酸成分。结论：本研究结果可以作为桐叶和台湾泡桐叶的鉴别方法。

复方桐叶烧伤油中桐叶麻油两组分同时薄层色谱鉴别

以桐叶药材、熊果酸、芝麻素为对照品,采用薄层色谱方法对复方桐叶烧伤油中的桐叶、麻油进行定性鉴别,并吸取供试品溶液和对照品溶液点于硅胶G薄层板,以环已烷—乙醚—乙酸丁酯—冰醋酸(体积比为20∶5∶4∶0.2)为展开剂进行实验.展开结果显示,供试品溶液色谱中各斑点分离度好、斑点清晰,熊果酸Rf为0.45,芝麻素Rf为0.23,复方桐叶烧伤油供试品色谱与对照药材、对照品色谱在相应位置上显现出相同颜色的斑点.鉴别方法操作简便,重现性好,可用于复方桐叶烧伤油的质量控制.

HPLC法测定复方桐叶烧伤油中芝麻素的含量

利用HPLC法(高效液相色谱分析)测定了复方桐叶烧伤油中芝麻素的含量.实验色谱条件为:TADE-PAK AF-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相甲醇-水(体积比80∶20),流速0.8 mL/min,检测波长287 nm.柱温35℃,进样量10μL.理论板数按芝麻素计算,不低于5 000.实验结果表明,芝麻素对照品在0.020 18~0.403 6 g/L范围内线性关系良好(R^(2)=1),回归方程Y=15 562X+9.37,芝麻素加样回收率103.22%,精密度RSD 0.58%.方法简单、快速、准确、灵敏、稳定,可用于复方桐叶烧伤油中芝麻素含量的检测和质量控制.

HPLC测定不同产地白花泡桐中熊果酸和木犀草素的含量

比较不同产地白花泡桐叶中熊果酸和木犀草素含量。采用Shim-Pack C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）经HPLC法测定含量。测定熊果酸的流动相为甲醇-水-乙酸（85∶15∶0.5）,体积流量为1.0 mL/min,检测波长210 nm;测定木犀草素的流动相为甲醇-水-乙酸（60∶39∶1）,体积流量为1.0 mL/min,检测波长350 nm。结果：熊果酸在1-15μg范围内线性关系良好,回归方程为Y=0.021X＋0.052,r=0.999 6,平均回收率为98.3%;木犀草素在0.01-0.09μg范围内线性关系良好,回归方程为Y=0.001 7X＋0.002 2,r=0.999 1,平均回收率为98.7%。结果显示,宏成制药4号基地白花泡桐叶中熊果酸和木犀草素含量分别为6.57 mg/g和25.5μg/g,显著高于其他地区的样品。本研究结果可为白花泡桐药材质量标准的建立提供实验依据。

白花泡桐内生真菌的分离鉴定及抗菌活性筛选

从白花泡桐根、茎、叶中分离出19株内生真菌,对分离出的真菌分别利用琼脂块法和纸片扩散法进行初选和复选,通过形态学特征观察和rRNA基因ITS序列系统发育分析对抗菌活性菌株进行鉴定。抑菌试验结果显示JSD-8、JM-1和JM-10等3株内生真菌对枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC1.769、大肠杆菌(Escherichia coli)CGMCC1.1103和白色念珠菌(Candida albi-cans)ATCC10123均有一定的抗菌活性。鉴定结果表明,JSD-8、JM-1、JM-10分别属于串珠赤霉菌(Gibberella moniliformis)、长柄链格孢菌(Alternaria longipes)和托姆青霉菌(Penicilium thomii)。