鼻咽癌来源潜伏膜蛋白1的表达诱发转基因小鼠鼻咽不典型增生

为建立鼻咽癌来源潜伏膜蛋白 1 ( N-L MP1 )转基因小鼠模型 ,从整体的角度研究 N-L MP1的功能 ,进一步阐明 EB病毒在鼻咽癌变过程中的作用 ,应用 DNA重组技术将角质细胞特异性启动子 EDL2与 N-L MP1连接 ,构建转基因 EDL2 -N-L MP1 ;并用显微注射技术 ,将转基因 EDL2 -N-L MP1注射入小鼠受精卵前核 ,再将注射后的受精卵植入假孕母鼠 ,获得转基因鼠 ,然后观察目的基因在鼻咽部的表达和病理变化。本实验共获得 53只转基因鼠 ,PCR法证明其中 6只小鼠有 N-L MP1基因扩增带 ,Southern杂交显示 PCR阳性小鼠有特异的杂交信号 ,整合率为 1 1 .3 % ;1只 4月龄的转基因鼠出现了鼻咽部不典型增生。说明 N-L MP1单独就能诱发小鼠鼻咽部发生癌前病变 ,为 EB病毒可能是鼻咽癌的主要病因提供了有力的证据。

稳定表达鼻咽癌来源潜伏膜蛋白1基因的鼻咽癌细胞系的建立

目的 :建立稳定表达鼻咽癌 (NPC)来源潜伏膜蛋白 1(LMP1)的鼻咽癌细胞系。方法 :利用基因重组技术构建NPC来源LMP1的一般性真核表达载体及上皮特异性表达载体 ,并将其转染鼻咽癌细胞系CNE - 2 ,用PCR、RT -PCR及蛋白印迹等检测N -LMP1在CNE - 2中的整合和表达。结果 :①成功构建了N -LMP1的一般性和上皮特异性表达载体。②N -LMP1基因在CNE - 2细胞中获得了正确表达。结论 :成功建立了稳定表达NPC来源LMP1的鼻咽癌细胞系 ,为进一步研究LMP1在鼻咽癌细胞中的作用机制奠定基础。

鼻咽癌来源LMP1转基因小鼠的制备

本试验利用显微注射技术，制备鼻咽癌来源ＬＭＰ１基因（Ｎ－ＬＭＰ１）的转基因小鼠。共获得１５只首建鼠，经小鼠尾部组织ＤＮＡ分析，ＰＣＲ法证明其中两只小鼠有Ｎ－ＬＭＰ１基因扩增带，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交显示ＰＣＲ阳性小鼠有特异的杂交信号，整合率为１３．３％。Ｎ－ＬＭＰ１转基因小鼠的建立为研究Ｎ－ＬＭＰ１在鼻咽癌变过程中的作用机制奠定了基础。

TP53结构功能及活性调节的最新研究进展

TP5 3是一种广谱肿瘤抑制基因 ,其产物为多功能的转录调节因子 ,可以发挥调节细胞生长、细胞凋亡和DNA修复的作用。对TP5 3的结构与功能的研究一直是TP5 3研究的热点和重点内容。本文阐述了有关该蛋白结构功能及活性调节的最新研究进展。

人鼻咽与鼻咽癌组织p53调节基因差异表达的研究

目的 用cDNAArray比较鼻咽癌组织及正常组织基因表达谱 ,研究鼻咽癌组织内p5 3调节基因表达差异。方法 Atlas人类肿瘤cDNA表达阵列 7742 1滤膜杂交后 ,用AtlasImage 1.0 1a分析膜杂交结果 ,RT PCR反应验证膜杂交结果 ,免疫组化证实基因在蛋白质水平的表达改变。结果 在 5 88个肿瘤相关基因中 ,共有 134个基因表达上调 ,88个基因表达下调。膜上有p5 3调节基因 32种 ,其中 13种显示差异表达 ,有 11个表达上调 ,2个表达下调。结论 在鼻咽癌组织内 ,p5 3的功能失控 ,MDM2、p2 1和Bax可能对鼻咽癌细胞的生长起重要的调控作用。