重组人白介素-11对人骨髓细胞生长的影响

目的 :观察人重组白介素 11(rhuIL 11)对人骨髓细胞生长的影响。方法 :将血小板生长因子、人重组白介素 3、干细胞生长因子和rhuIL 1110 ,5 0 ,10 0ng·mL-1分别加入已制备的人骨髓有核细胞 ,定向培养后 ,分别统计集落数。结果 :rhuIL 11对人骨髓细胞集落数有刺激生长的活性 ,且呈剂量依赖关系 ,其作用与美国GI公司生产的Neumega(rhuIL 11)作用相似 ,无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :rhuIL

定量和定位检测EB病毒在鼻咽癌组织中的感染状态

背景与目的EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)与鼻咽癌密切相关,但EBV是鼻咽癌的致瘤因素还是仅仅是伴随关系有待进一步研究,而且EBV在鼻咽癌发生过程中的潜伏状态也不明确,本研究通过检测EBV在不同鼻咽组织中的表达变化,为进一步阐明EBV与鼻咽癌发生的关系提供线索。方法应用荧光定量PCR(real-timePCR)技术定量检测47例鼻咽低分化鳞癌患者癌、癌旁及相对正常鼻咽粘膜组织中的平均EBV拷贝数;并采用原位杂交技术(地高辛标记的EBER-1探针)对鼻咽癌、癌旁、对侧正常鼻咽粘膜中的EBV进行定位检测。以10例正常人鼻咽粘膜组织作对照。结果正常人鼻咽粘膜EBV检出率为80%(8/10),平均拷贝数为6.7×102/滋gDNA;100%(47/47)鼻咽癌和癌旁组织以及72.3%(34/47)的对侧正常鼻咽粘膜组织检出EBV,平均拷贝数分别为6.9×105/滋gDNA、1.5×105/滋gDNA、9.8×103/滋gDNA。正常人鼻咽粘膜、鼻咽癌患者对侧正常鼻咽粘膜之间感染EBV的几率、潜伏感染EBV的数量没有显著性差异(P>0.05);鼻咽癌及其癌旁、对侧正常粘膜组织三者之间,鼻咽癌与癌旁组织之间,癌旁和对侧正常粘膜组织之间EBV拷贝数存在显著性差异(P<0.01)。EBER-1原位分子杂交发现,对侧正常粘膜上皮细胞未检测到EBER-1的表达信号,癌旁靠近癌一侧的部分不典型增生细胞检测到EBER-1弱阳性信号,而在癌组织中的所有癌细胞均有EBER-1强阳性信号。结论无论是鼻咽癌患者还是健康人,EBV在鼻咽组织中的潜伏感染是一种普遍现象,但从鼻咽癌患者对侧正常鼻咽粘膜到癌旁再到癌组织EBV感染的量发生了改变,说明鼻咽上皮细胞中EBV感染量和表达信号的改变很可能是EBV致鼻咽癌的重要环节。

寒、热证豚鼠变应性鼻炎细胞功能及形态学观察

目的 :研究寒证及热证豚鼠变应性鼻炎 (AR)细胞功能和形态学特征。方法 :以寒性、热性中药分别给予豚鼠造成寒证、热证模型 ,然后以甲苯二异氰酸酯和盐酸萘甲唑啉点鼻 ,分别造成AR和鼻炎模型 ,观察其细胞功能、数量及电镜下超微形态学特点。结果 :AR模型豚鼠血嗜碱性粒细胞 (BC)脱颗粒指数高于鼻炎模型豚鼠 ;其中寒证AR豚鼠又高于热证AR豚鼠 (P <0 0 5)。寒证AR豚鼠鼻粘膜肥大细胞(MC)及嗜酸性粒细胞 (EC)数量多 ,浸润广泛 ,颗粒包膜不清 ,密度不均 ,颗粒内见空泡、融合及管道 ;而热证AR豚鼠及对照组豚鼠MC及EC数量少 ,无浸润 ,颗粒包膜清 ,密度均一 ,无颗粒空泡、融合及管道。结论 :寒证AR豚鼠BC、MC。

成人外周血内皮祖细胞分离和诱导分化

目的:研究人外周血中内皮祖细胞的生物学特性和诱导分化条件.方法:从健康成人外周血中分离内皮祖细胞接种于添加VEGF,bFGF,IGF-1,EGF的M199培养基中,观察细胞集落、梭形贴壁细胞的出现时间和特异性细胞标志表达情况.结果:第3～4天可观察到贴壁梭型细胞,第5～8天出现多个细胞团,第10天左右可见首尾相连形成条索状结构.贴壁细胞表达血管内皮细胞特异性标志.结论:成人外周血中的内皮祖细胞来源于单个核细胞,在一定条件下可以诱导分化为内皮细胞.

灯盏花素治疗糖尿病周围神经病变的疗效观察

目的 :观察灯盏花素注射液治疗糖尿病周围神经病变 (DPN)的疗效及其对红细胞醛糖还原酶 (AR)活性、血一氧化氮 (NO)水平的影响。方法 :6 4例DPN患者 ,随机分成灯盏花素治疗组 (灯盏花素 5 0mg·d- 1 )和甲钴胺对照组(甲钴胺 5 0 0 μg·d- 1 ) ,共治疗 3周 ,观察两组病人治疗前后DPN症状、体征、感觉神经传导速度 (SNCV)、红细胞AR活性及血NO水平的变化。结果 :治疗前DPN病人红细胞AR活性较正常人明显升高 ,NO水平明显下降 (P均 <0 .0 1) ,用灯盏花素注射液治疗后红细胞AR活性显著下降 ,NO水平显著升高 (P <0 .0 1) ,而用甲钴胺治疗后上述指标无明显变化。灯盏花素缓解DPN症状及体征的总有效率及显效率明显高于甲钴胺 (85 2 9%vs73.33% ,2 0 .5 9%vs10 .0 0 % ,P <0 .0 1) ,两组均能显著提高四肢感觉神经传导速度 ,但灯盏花素组提高的幅度明显大于甲钴胺对照组 (P<0 .0 1)。结论 :灯盏花素注射液能明显抑制红细胞AR活性 ,提高血NO水平 ,从而有效改善糖尿病周围神经病变症状及体征 ,使四肢感觉神经传导速度显著提高 ,且其疗效优于甲钴胺。

丙戊酸钠活化大鼠海马和额叶ERK-1/2信号传导通路

为探讨慢性服用丙戊酸钠对中枢神经系统细胞外调控激酶 (ERK) 1/ 2信号传导通路活性的影响 ,阐明丙戊酸钠治疗躁狂抑郁症作用的可能分子机制 ,将 4 0只雄性Wistar大鼠随机分为实验组和对照组 ,每组各 2 0只 .实验组大鼠用含丙戊酸钠的饲料喂养 ,对照组大鼠用常规饲料喂养 ,4周后取大鼠海马和额叶组织制备蛋白质样本 ,蛋白质印迹方法分析海马和额叶组织丝裂原活化的蛋白激酶激酶 (MEK)、ERK 1/ 2、MAPK活化的蛋白激酶 1(RSK1)、cAMP效应元件结合因子 (CREB)的磷酸化水平以及Bcl 2的表达水平 ,电泳迁移率变动分析(EMSA)方法分析海马和额叶组织激活蛋白 1(AP 1)的DNA结合活性 .与对照组比较 ,丙戊酸钠显著增强海马和额叶MEK、ERK 1/ 2、RSK1、CREB和AP1的活性 ,上调海马和额叶Bcl 2的表达 .结果表明 :慢性服用丙戊酸钠激活中枢神经系统ERK 1/ 2信号传导通路、上调中枢神经系统Bcl 2蛋白表达 。

人参总皂甙对犬冠脉流量和血液动力学的影响

以两种剂量的人参总皂甙（Ｇｉｎ）静脉注射麻醉犬，观察犬的冠脉流量，血压，ＬＶＳＰ，ＬＶｄｐ／ｄｔｍａｘ，ＨＲ，心肌氧消耗及心泵功能指标。结果显示：２０ｍｇ／ｋｇ的Ｇｉｎ能显著降低麻醉犬的血压，ＬＶＳＰ和ＩＶｄｐ／ｄｔｍｘ，减慢心率，明显减少心肌耗氧，但对泵功能指标ＣＩ和ＣＯ无明显影响，ＳＩ及冠脉流量明显增加；１０ｍｇ／ｋｇ的Ｇｉｎ使血压稍增加，但不明显（Ｐ＞０．０５）。

鼻咽癌活检组织及外周血白细胞EB病毒DNA的检测及其意义

目的：探讨鼻咽组织、外周血白细胞ＥＢＶ基因组分布及与ＮＰＣ的关系。方法：采用ＰＣＲ法检测２６例ＮＰＣ，４例癌旁及１４例慢性鼻咽炎鼻咽组织及外周血白细胞中ＥＢＶＤＮＡ。同时采用酶免疫法测定血清ＶＣＡ－ＩｇＡ。结果：１．ＮＰＣ、癌旁及鼻咽炎组织ＥＢＶＤＮＡ无明显差异。２．ＮＰＣ与鼻咽炎组外周血白细胞ＥＢＶＤＮＡ有明显差异，Ｐ＜０．０５。３．ＮＰＣ与鼻咽炎组血清ＶＣＡ－ＩｇＡ之间存在明显差异。Ｐ＜０．０５。４．同时检测以上三项后三项阳性率及二项阳性率在两组间有显著差异。Ｐ＜０．０５。５．ＮＰＣ活检组织及血ＥＢＶＤＮＡ与血清ＶＣＡ－ＩｇＡ阳性率之间有良好的一致性。结论：ＮＰＣ鼻咽组织存在大量的ＥＢＶＤＮＡ拷贝数，少数分布于外周血白细胞，且与血清ＶＣＡ－ＩｇＡ有良好的一致性。３项套式检测比单项鼻咽活检组织ＥＢＶＤＮＡ或血清ＶＣＡ－ＩｇＡ更有助于对ＮＰＣ的诊断。

重组人白介素11对豚鼠血小板减少的治疗作用

应用抗血小板血清造成豚鼠血小板减少症动物模型 ,观察人重组白细胞介素 11(rHuIL 11)对豚鼠血小板减少症的治疗作用 ,结果显示rHuIL 112 0 0 ,10 0 ,5 0 μg·kg-1均可明显升高豚鼠的血小板计数 ,增加骨髓巨核细胞集落生成单位 (CFU Meg)细胞集落数 ,与生理盐水对照组比较有明显差异。说明rHuIL

肝癌组织中螺杆菌16SrRNA基因的检测

目的:探讨螺杆菌感染是否与人类肝癌的发生相关.方法:选取经病理诊断的肝癌组织38例,肝硬化15例,慢性肝炎12例,肝良性肿瘤15例,采用聚合酶链反应(PCR)扩增螺杆菌16SrRNA检测螺杆菌,扩增产物经Southern杂交证实,并对部分标本的PCR产物进行测序及同源比较.阳性者再扩增幽门螺杆菌(Hpylori)的特异基因(26Ku蛋白)和相关功能基因(cagA,vacA,glmM,rps4)来验证是否为该菌.结果:52.6%(20/38)的肝癌组织中发现螺杆菌存在,而非肝癌组无一例阳性(P<0.01).所有PCR产物用South-ern杂交得到证实.10例测序及同源比较显示,肝癌组织中的螺杆菌16SrRNA序列与Hpylori的16SrRNA序列有99-100%的同源性.阳性标本中26ku基因大部分亦阳性(14/20),但仅3例扩增出cagA基因,4例扩增出glmM基因,一直未扩增出vacA基因和rps4基因.结论:肝癌组织中存在螺杆菌感染,他与肝癌的发生可能存在某种联系.

益气解毒颗粒对大鼠鼻咽癌变中端粒酶和端粒酶RNA表达的影响

目的 :探讨中药复方益气解毒颗粒防治鼻咽癌的作用机制。方法 :用二亚硝基哌嗪 (DNP)诱导大鼠鼻咽癌动物模型 ,观察益气解毒颗粒对大鼠鼻咽癌变中病理形态改变以及端粒酶和端粒酶RNA表达的影响。定期分批处死大鼠 ,取鼻咽组织作病理学检测 ,用PCR -ELISA和NestedRT -PCR法检测大鼠鼻咽组织端粒酶的活性和端粒酶RNA的表达。结果 :灌服益气解毒颗粒大鼠鼻咽癌发癌率 0 (0 /5 ) ,明显低于盐水对照组 80 % (4/5 ) (包括原位癌和浸润癌 ) ;其端粒酶活性为 0 2 4± 0 11,也明显低于对照组 0 93± 0 2 3(P <0 .0 5 ) ;维甲酸组发病率为 0 (0 /5 ) ,端粒酶活性为 0 2 7± 0 13;各组端粒酶RNA均为阳性。维甲酸组大鼠于 2 15～ 30 8d间逐步死亡。结论 :益气解毒颗粒能阻断DNP诱导大鼠鼻咽癌变 。

鼻咽癌组织端粒酶各组分基因表达的研究

目的：探讨端粒酶各组分基因在鼻咽癌（ nasopharyngeal carcinoma,NPC）组织及鼻咽慢性炎症粘膜（ chronic inflammation of nasopharyngeal epithelium,CINE）组织中的表达情况。方法：利用 RT-PCR方法检测鼻咽癌组织及鼻咽慢性炎症粘膜组织端粒酶各组分基因（ hTR、 TP1 mRNA和 hTERT mRNA）的表达。结果： 43例 NPC组织中， hTR、 TP1 mRNA和 hTERT mRNA表达阳性率分别为 90.7％、 88.4％和 88.4％； 16例 CINE组织中 ,hTR、 TP1 mRNA和 hTERT mRNA表达阳性率为 87.5％、 87.5％和 0％；仅 hTERT mRNA在鼻咽癌组织中的表达显著高于鼻咽慢性炎症粘膜组织中的表达，而 hTR或 TP1 mRNA在鼻咽癌组织中的表达和鼻咽慢性炎症粘膜组织中的表达无明显差异。表明 hTR和 TP1 mRNA广泛存在于鼻咽癌和鼻咽慢性炎症粘膜组织中，而 hTERT mRNA仅在鼻咽癌组织中表达。结论： hTERT mRNA可能在端粒酶活性调节中起重要作用； hTERT mRNA的表达水平，可作为鼻咽癌诊断指标之一。

鼻咽癌病人端粒酶表达的研究

目的：研究端粒酶（ＴＬＭＡ）在鼻咽癌（ＮＰＣ）中的表达。方法：采用ＴＲＡＰＰＣＲＥＬＩＳＡ法探讨１８例ＮＰＣ，２例放疗后ＮＰＣ，４例癌旁组织及４例慢性鼻咽炎鼻咽部活检组织中ＴＬＭＡ表达。结果：１８例ＮＰＣＴＬＭＡ阳性率为８８．９％。４例癌旁组织阳性率为７５．０％，慢性鼻咽炎全部为阴性。１例复发性ＮＰＣ为阳性，１例疗后未复发为阴性。ＴＬＭＡ表达与ＮＰＣ分期、颈淋巴结转移似无明显关系。

地贞颗粒对“更年期”拟阴虚内热证模型大鼠的影响

地贞颗粒治疗给药，能显著改善模型大鼠阴虚内热的症状和体征，可见不同程度阴道上皮角化现象，并使子宫重量增加；降低血清ＬＨ（黄体生成素）、ＦＳＨ（促卵泡激素）、ＰＲＬ（泌乳素）含量；能使血浆ＮＥ（去甲肾上腺素）、Ｅ（肾上腺素）及脑组织 ５－ＨＴ（５－羟色氨）含量降低，从而降低交感神经兴奋性。

肺癌变基因表达差异cDNA微阵列的研究

背景与目的:肺癌发病率和死亡率均较高,其发病的分子机制尚不清楚。本实验旨在研究人肺癌组织、癌旁组织、正常肺组织及淋巴结转移癌组织的基因差异表达情况,寻找肺癌组织中相对高表达基因,为肺癌的早期诊断和治疗提供可能的理论依据。方法:将新鲜肺癌组织、癌旁组织、正常肺组织及淋巴结转移癌组织用液氮速冻,提取总的RNA后逆转录标记cDNA探针,与含588个基因的cDNA微阵列膜杂交,通过放射自显影、灰度扫描杂交信号强弱获得差异表达基因。结果:肺癌组织中差异表达的基因有40个,其中早期生长反应蛋白1(earlygrowthresponseprotein1,EGR1)、分泌性凋亡相关蛋白1(secretedapoptosisrelatedprotein1,SARP1)等36个基因表达上调,诱导骨髓白细胞分化蛋白1(myeloidcellleukemiaprotein1,MCL1)等4个基因表达下调,以癌基因/抑癌基因、细胞周期调节、生长因子及凋亡相关基因上调为主;癌旁组织有33个差异表达基因,基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)等20个基因上调,而下调的基因有MCL1、内皮素2(endothelin2,ET2)等13个;转移淋巴结组织有21个基因表达差异,CD40受体相关因子1(CD40receptor-associatedfactor1,CRAF1)等15个基因下调,而上调的基因仅有6个,主要以细胞粘附分子、基质金属蛋白酶。

肿瘤坏死因子β*2等位基因与狼疮性肾炎的相关性分析

目的:进一步探讨肿瘤坏死因子β(TNFβ)基因在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用。方法:采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)基因分型方法,检测98例SLE患者TNFβ等位基因,分析了TNFβ等位基因与SLE患者某些临床指标的相关性。结果:携带TNFβ2等位基因的SLE患者的肾炎发生率显著高于未携带TNFβ2等位基因的SLE患者(P<0.05)。结论:TNFβ2等位基因可能与狼疮性肾炎的发病相关。

应用cDNA表达芯片研究复方黄连对CNE1鼻咽癌移植瘤基因表达的影响

目的 :研究复方黄连对鼻咽癌裸鼠移植瘤基因表达的影响。方法 :培养的鼻咽癌细胞系CNE1细胞接种Balb/C裸鼠 ,待移植瘤形成后灌喂复方黄连 ,然后从移植瘤组织提取RNA ,经逆转录标记后的cDNA作为探针 ,与高通量cDNA表达芯片杂交并用激光共聚焦扫描仪分析基因表达。通过逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)半定量技术进一步分析差异表达基因的表达。结果 :复方黄连处理移植瘤裸鼠 30d后 ,移植瘤明显减小 ,其抑瘤率为 2 9.5 %。同时 ,移植瘤组织基因表达发生显著变化。用该复方处理的CNE1鼻咽癌移植瘤组织有 147条基因表达发生改变 ,包括 10 2条下调表达的基因和 45条上调表达的基因。RT PCR半定量技术分析证实有 3条基因为真正差异表达 ,它们分别是MAD3,H731和CHK1基因。其中 ,MAD3和H731基因表达上调 ,CHK1基因表达下调。结论 :复方黄连可抑制CNE1鼻咽癌裸鼠移植瘤的生长并可影响其基因的表达 ,它对CNE1鼻咽癌移植瘤的抑制作用与其调节移植瘤基因表达密切相关。

青蒿提取物对刚地弓形虫的抑制作用

通过成纤维细胞蚀斑试验观察了中药青蒿对刚地弓形虫的抑制作用。结果表明，青蒿醇提物能抑制弓形虫在组织培养中的繁殖，而国产抗疟药蒿甲醚在０．１μｇ／ｍｌ可完全抑制弓形虫生长，其作用优于青蒿素。提示青蒿醇提物及抗疟药蒿甲醚具有抗弓形虫作用。