体外诱导人脐带间充质干细胞向神经干细胞的分化

背景:人脐带间充质干细胞较骨髓、脂肪等来源的间充质干细胞易取材、更为原始,并不受伦理、法律的限制,是中枢神经系统损伤修复最具治疗潜力的细胞来源之一。目的:探讨重组人碱性成纤维生长因子、重组人表皮生长因子定向诱导人脐带间充质干细胞分化为神经干细胞的潜能。方法:采用碱性成纤维生长因子、表皮生长因子作为诱导剂,体外诱导人脐带间充质干细胞;在倒置显微镜下动态观察细胞形态学变化,并用免疫荧光法检测人脐带间充质干细胞向神经干细胞分化的情况,实时荧光定量PCR技术检测诱导前后神经干细胞标记蛋白巢蛋白在mRNA水平的相对表达量。结果与结论:形态学观察经诱导后的人脐带间充质干细胞呈神经干细胞球改变;免疫荧光法及实时荧光定量PCR技术均可检测到神经干细胞标记物巢蛋白,并可进一步分化表达神经元标志蛋白神经元特异性烯醇化酶、微管相关蛋白2以及神经胶质细胞蛋白、神经胶质原纤维酸性蛋白。碱性成纤维生长因子、表皮生长因子可定向诱导人脐带间充质干细胞向神经干细胞及神经元、神经胶质细胞分化。

不同途径移植人脐血单核细胞对脑出血大鼠神经功能的影响

目的观察经不同途径移植人脐血单核细胞14天后脑出血大鼠神经功能评分的变化,探讨干细胞移植的最佳途径。方法采用自体血二次注血/退针法制作脑出血模型,经计算机断层扫描(computed tomography,CT)检查证实脑出血模型构建成功后,将从人脐血中分离出的新鲜人脐血单核细胞(human umbilical cordblood mononuclear cells,HUCBMC)分别经Wistar大鼠尾静脉、左心室及脑出血局部移植入实验动物体内,对照组造模成功后,不予治疗,自然转归。各组模型均于移植1、3、7、14天采用Longa评分法评价大鼠神经功能。结果经尾静脉、左心室及脑出血局部移植HUCBMC的大鼠神经功能评分,经统计学处理后提示不同时间点大鼠的神经功能评分差异有显著性(F=131.87,P<0.001);移植时间(time)与移植方法(group)的交互效应显示不同的治疗方法时间趋势相同(F=35.54,P>0.05)。大鼠神经功能评分组间比较显示,不同移植方法对大鼠神经功能评分变化的差异有显著性(F=6.434,P=0.001);HUCBMC移植术后1天脑局部移植组大鼠神经功能评分(2.35±0.67)高于其他组,移植术后3、7、14天脑局部移植组大鼠神经功能评分(分别为0.40±0.60,0.25±0.37,0.03±0.22)低于其他组;HUCBMC移植后1天4组大鼠神经功能评分差异无显著性(F=2.14,P=0.1 0);移植3、7、14天4组大鼠神经功能评分差异有显著性(F值分别为5.59,22.94,11.07,其对应P值均<0.01);相同移植途径不同时间点多个样本均数之间比较各组差异有显著性(F值分别为27.71,29.07,92.11,13.47,其对应P<0.001);尾静脉与左心室移植组各时间点神经功能评分差别无显著性(P分别为0.85,0.08,0.70,0.68)。结论经尾静脉、左心室及脑出血局部途径移植人脐血单核细胞治疗脑出血大鼠神经功能均有改善;脑局部移植是脐血单核细胞移植的最佳途径。

老年2型糖尿病合并急性脑梗死患者的血糖水平对预后的影响

目的探讨内蒙古满洲里地区老年2型糖尿病合并急性脑梗死时血糖水平与病情严重程度及预后的关系。方法对2010年至2011年内蒙古满洲里市南区医院住院的老年2型糖尿病合并急性脑梗死患者126例临床资料进行回顾性分析，按脑梗死严重程度分轻、中、重度，同时按入院时的空腹血糖水平，将全部患者分为A（空腹血糖7．0～11．1mmol／L）、B（空腹血糖11．1～16．7mmol／L）、C（空腹血糖≥16．7mmol／L）三组，观察高血糖与病情严重程度、脑CT扫描梗死灶大小和急性期预后的关系。结果A、B两组患者之间的梗死灶大小、不同神经功能缺损程度所占人数及不同预后所占人数比较差异均无统计学意义（P〉0．05）；而空腹血糖≥16．7mmol／L的患者，梗死灶大小、不同神经功能缺损程度所占人数及不同预后所占人数与A、B两组比较差异均有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。结论糖尿病并发脑卒中者临床症状的轻重及病情转归情况与患者血糖水平的高低密切相关，血糖≥16．7mmol／L是糖尿病合并急性脑梗死急性期预后不良的重要指标。

人脐血单个核细胞移植治疗急性一氧化碳中毒后迟发脑病1年随访

背景:研究报道在特定的体内外环境下,脐血间充质干细胞能够诱导分化成为包括神经干细胞在内的多种组织细胞。目的:评价人脐血单个核细胞经腰穿途径移植后治疗急性一氧化碳中毒后迟发性脑病的疗效及安全性。方法:一氧化碳中毒后迟发性脑病患者60例随机分为2组。对照组给予高压氧及药物治疗;治疗组采用鞘内注射法将经密度梯度离心法分离出的人脐血单个核细胞移植到一氧化碳中毒性脑病患者的蛛网膜下腔,余治疗方法同对照组。分别于人脐血单个核细胞移植前、移植后3,9,12个月对患者进行简易精神状态检查法、改良Asworth肌肉痉挛程度分级及日常生活量表评分检查;比较两组患者MRI变化;同时对随诊患者行胸片、心电图及血生化检查,客观评价人脐血单个核细胞移植的安全性。结果与结论:人脐血单个核细胞移植3,9,12个月,治疗组Asworth肌肉痉挛程度分级评分均显著低于对照组(P=0.032);移植后9,12个月简易智力状况检查法及日常生活量表评分均显著高于对照组(P<0.05);两组患者神经功能在各时间点的变化趋势相似。人脐血单个核细胞移植后12个月MRI检查结果显示,治疗组患者MRI改善程度较对照组明显。提示鞘内注射移植人脐血单个核细胞治疗一氧化碳中毒后迟发脑病疗效优于高压氧治疗。

人脐带血单核细胞中的神经样细胞研究

目的研究人脐带血单核细胞(HUBMNCs)中是否存在神经样细胞。方法采集30例新生儿的脐带血,从中分离出单核细胞。采用免疫荧光染色法观察其神经巢蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,并对HUBMNCs进行体外培养,用倒置相差显微镜观察细胞形态。结果 HUBMNCs经免疫荧光染色后,在1个高倍视野(HP,×200)下分别可见(2.67±1.29)个、(7.37±2.46)个散在分布的nestin、NSE阳性的细胞。培养10～12 d时,出现3～5个/HP胞体较大、有数个类似轴突和树突状粗长突起的神经样细胞。结论 HUBMNCs中有少数神经样细胞。

鹅脾混合多肽对小鼠非特异性免疫功能的影响

目的检测从鹅脾脏提取出的相对分子质量<10 000混合多肽的含量及成分,并观察该混合多肽对小鼠体内淋巴细胞转化及腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。方法采用冷冻离心透析法从鹅脾脏提取相对分子质量<10 000的混合多肽,紫外分光光度计检测多肽含量,氨基酸检测仪和原子吸收仪进行多肽成分鉴定;将上述鹅脾混合多肽分别以大、中、小剂量对昆明种小鼠进行肌内注射,并与空白对照组比较,连续给药14 d,观察小鼠淋巴细胞转化和巨噬细胞吞噬功能。结果获得的鹅脾混合多肽提取物p H=6.1,小分子多肽含量为23.78μg·m L-1,成分鉴定结果显示该混合物中含有10余种氨基酸及6种微量元素。混合多肽3个剂量组淋巴细胞转化率及巨噬细胞吞噬率均显著提高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。毒性实验的半数致死浓度(LD50)>4 g·kg-1。结论鹅脾混合多肽对小鼠免疫功能有明显的调节和增强作用。

CM-Dil及DAPI联合标记示踪人脐血单核细胞细胞膜及细胞核的可行性

背景:氯甲基-1,1十八烷基-3,3,3’,3’-四甲基-吲哚-羧花青-高氯酸盐(chlormethylbenzamido-1,1-dioctadecyl-3,3,3’,3’-tetramethylin-docarbocyamine,CM-DiI)和4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)是常用的活细胞示踪剂,分别用来标记细胞膜和细胞核。目的:观察应用细胞膜及细胞核标记物CM-DiI及DAPI联合示踪人脐血单核细胞的可行性及双标后人脐血单核细胞体外培养过程中细胞形态及活性的变化。方法:将新鲜分离的人脐血单核细胞用示踪剂CM-DiI及DAPI进行双标记,体外培养双标后的人脐血单核细胞,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,锥虫蓝染色检测不同时间细胞活性,同时倒置荧光显微镜观察不同时间经CM-DiI和DAPI双标的人脐血单核细胞荧光染色阳性数。结果与结论:人脐血单核细胞在CM-DiI和DAPI联合标记15min后,荧光显微镜下可见标记细胞的细胞膜、细胞核分别在不同波长下分别呈现红色和蓝色的荧光。CM-DiI/DAPI双标后的人脐血单核细胞体外培养1,3,7,14,21d,CM-DiI和DAPI双染的阳性细胞数各时间点比较差异无显著性意义。锥虫蓝染色观察人脐血单核细胞存活率为95.6%-98.8%。双标后的人脐血单核细胞体外培养过程中细胞形态变化与未经示踪标记的脐血单核细胞相比差异不明显,仍保持了良好的生长状态、贴壁能力和细胞增殖能力。由此证实,CM-DiI和DAPI可有效标记人脐血单核细胞,两种示踪剂对活细胞无毒不良反应,荧光衰减较慢,适用于干细胞标记及示踪。

静脉移植人脐血单个核细胞治疗脑出血大鼠疗效的microPET-CT评价及抗炎机制

背景:脐血中分离出的单个核细胞含有丰富的细胞类型,在细胞替代治疗、基因治疗以及组织工程学中具有重要的研究和应用价值。目的:通过micro PET-CT及Longa评分评估人脐血单个核细胞治疗大鼠脑出血的疗效,同时探讨其部分治疗机制。方法:采用二次注血/退针法制作脑出血大鼠模型,造模成功大鼠随机分为移植组与对照组,将从人脐血中分离出的单个核细胞经尾静脉注入移植组大鼠体内,对照组大鼠造模成功后不予治疗。各组大鼠均于移植前及移植后的第3,7,14,21天,通过micro PET-CT及Longa评分对大鼠脑代谢变化及神经功能恢复情况进行评估;通过ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的水平。结果与结论:(1)人脐血单个核细胞移植治疗后第7,14,21天,与对照组相比,移植组大鼠血肿中心及血肿周围脑代谢水平均显著升高(P<0.05),血肿及其周围缺血组织体积及Longa评分显著降低(P<0.05);(2)人脐血单个核细胞移植后第3,7,14天,移植组两种因子水平均较对照组显著降低(P<0.05),移植后第21天,两组血清中血清肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平均降至正常水平;(3)结果说明,人脐血单个核细胞移植可促进大鼠脑出血的神经功能恢复,其机制可能与其能够减少炎性因子表达及抑制炎性反应有关。

中晚期宫颈癌放化疗并发症的高压氧治疗的疗效观察与护理

目的:探讨69例中晚期宫颈癌放化疗出现并发症,辅助应用高压氧治疗的疗效观察护理。方法:中晚期宫颈癌病程长,对于放化疗耐受力差,护理重点是主动与患者及家属建立良好沟通,讲解疾病治疗方法取得配合,放化疗期间严密观察病情变化及时掌握病情调整治疗方案。结果:中晚期宫颈癌患者均对治疗方案积极配合,高压氧疗介入使放射性膀胱炎直肠炎得到有效遏制,门诊随访及来院复诊再未复发。结论:69例中晚期宫颈癌经过高压氧疗放化疗联合治疗,有效抑制肿瘤细胞生长促进放化疗后损伤组织功能恢复,各项治疗护理措施及时跟进。

重型颅脑损伤的患者早期进行肠内营养的效果及护理

探讨重型颅脑损伤患者早期营养支持的效果及护理措施。方法:对59例重型路脑损伤患者早期实施营养支持治疗,积极处理并发症,密切观察营养支持实施后的效果。结果:45例病人顺利接受了肠内全营养剂的支持治疗。结论:重型颅脑损伤患者早期进行肠内营养,通过护理干预,可减少并发症发生,促进胃肠功能恢复,利于颅脑损伤患者的治疗和恢复。

脑干出血患者的护理

目的：探讨脑干出血患者护理的方法。方法：选取我科2014年7月至2014年10月期间收治的脑干出血患者39例，对脑干出血患者在急性期进行恰当的诊断治疗和有效的护理，记录并统计分析患者的恢复情况。结果：39例中5例出血小于5ml已康复出院，2例出血大于10ml死亡，7例出血量5～10ml，其中3例死亡，4例在康复治疗中。结论：对脑干出血患者急性期进行恰当的诊断治疗和有效的护理，可及时挽救患者生命。

特布他林加布地奈德吸入治疗慢阻肺的临床疗效及对患者肺功能的影响分析

分析布地奈德与特布他林吸入给药方案用于慢阻肺患者治疗中疗效及对患者肺功能影响。方法:2019年11月-2020年11月,82例慢阻肺患者为样本,随机分组,A组行特布他林与布地奈德治疗,B组行特布他林治疗。结果:A组动脉血氧分压(PaO2)、二氧化碳分压(PaCO2)等血气指标优于B组,P<0.05;A组用力肺活量(FVC)、一秒用力呼气容积(FEV1)及FEV1/FVC等肺功能指标均优于B组,P<0.05。结论:慢阻肺患者行特布他林与布地奈德联合雾化吸入给药,可提升血氧分压,改善各项肺功能指标,安全高效。