医学院大学生蠕形螨感染调查

目的了解医学院学生近年来人体蠕形螨的感染现状,为治疗和预防提供依据。方法采用透明胶带粘贴法,对部分在校集体住宿的大学生进行蠕形螨感染的调查。胶带置于光镜下检查,阳性片计数虫数并进行虫种鉴定。结果共调查108名学生。总感染率为50.93%(55/108),男生感染率为52.78%(19/36),女生感染率为50%(36/72),男生与女生感染率差异无统计学意义(P>0.05)。单纯毛囊蠕形螨感染占60%(33/55),单纯皮脂蠕形螨感染占5.45%(3/55),混合感染占34.55%(19/55)。轻度感染占89.1%(49/55)。鼻部感染(41/55)较额部(19/55)、颊部(21/55)高。结论我院蠕形螨总感染率较高,但以轻度感染为主,毛囊蠕形螨感染高于皮脂蠕形螨,感染以鼻部为主,感染者无性别差异。

科研促进教学形式在培养医学生创新能力方面的研究

高质量的教学工作能够激发学生的创造思维,而高水平的科研成果能够促进学科知识更新。为推动教研相互促进,良性循环,我们以病原生物学课程教学为例,通过科研进展进课堂,科研成果进讲座,以及学生参与课题、申请并完成大学生创新基金和参加具有一定研究性的综合性、设计性实验等多个方面,来推进教学内容的改革,医学生的发现问题和解决问题能力正逐步提高,其创新能力亦得以开发和培养。以科研促教学更新课程教学内容,可在基础医学课程中推广实施。

医学院校生物技术专业微生物学实验课程改革探讨

医学院校主要开设面向医学生的以病原微生物为中心的医学微生物教学,生物技术专业的微生物课程体系不同于医学微生物,如何利用原有的医学微生物教学资源,探索合适的微生物学实验课程方案,作者在教学观念、实验内容、教学手段等方面进行教学改革,教学效果得到了明显的提高。

离体动物细胞对病原菌的免疫防御作用

目的利用诱导的离体动物细胞系兔肾细胞RK13和昆虫细胞Tn-5B1产生抗菌活性肽类物质,筛选具有抑菌作用的抗菌药物。方法利用热灭活的大肠杆菌DH5α或柠檬色葡萄球菌分别诱导RK13和Tn-5B1,对16 h后的细胞诱导产物应用滤纸片法和双层平板法做抑菌活性检测。结果诱导的细胞系随着诱导时间延长出现了一系列形态变化。诱导产物均对受测细菌金黄色葡萄球菌形成了较明显的抑菌圈,且热灭活的大肠杆菌DH5α诱导RK13的诱导产物较之后者的抑菌圈更明显。结论RK13和Tn-5B1经热灭活的大肠杆菌和柠檬色葡萄球菌分别诱导后分泌了具有抗菌活性的物质。

以临床医学观念为基础的病原生物学课程整合探讨

为了使病原生物学课程更加完善、充实,本文以临床医学观念为基础,就师资队伍建设、理论教学内容的整合、实验教学内容的整合、病原生物学纲要的编写和教学方法改革等方面提出建议和措施。

医学院校在校生蠕形螨感染调查与分析

目的了解医学院校大学生蠕形螨感染现状。方法使用透明胶纸粘贴法,对2006和2007级在校大学生感染蠕形螨情况进行调查,并鉴定虫种。结果 540名学生中,蠕形螨感染267人,感染率49.44%。其中2006和2007级学生感染率分别为52.78%和44.44%;男、女生感染率分别为48.58%(103/212)和50.00%(164/328);单纯毛囊蠕形螨感染163人(占61.05%),单纯皮脂蠕形螨感染37人(占13.86%),混合感染者67人(占25.09%);鼻部螨虫感染211人(占79.02%),额部螨虫感染78人(占29.21%),颊部螨虫感染81人(占30.34%)。结论在校大学生蠕形螨感染率较高,以毛囊蠕形螨感染为主,感染部位主要为鼻部。

日本血吸虫rSj338及膜蛋白rSj22.6抗原表位联合免疫对小鼠的保护性研究

目的 观察日本血吸虫 (中国大陆株 )的线粒体相关蛋白 r Sj338及膜蛋白 r Sj2 2 .6有效抗原表位混合后对小鼠的免疫保护性 ,为将来复合疫苗的研制提供理论依据。方法 分别用特异性抗r Sj338抗体和抗 r Sj2 2 .6的抗体筛选噬菌体随机 12肽库 ,将获得的 r Sj338的有效抗原表位与r Sj2 2 .6有效抗表位混合后免疫 BAL B/ c小鼠 ,并与 r Sj338的有效抗原表位混合免疫组进行比较。结果 r Sj338的 4种表位和 r Sj2 2 .6抗原的 4种表位混合免疫组小鼠获得了 4 5 .4 % (P<0 .0 1)的减虫率及 5 9.1% (P<0 .0 1)肝总减卵率 ,r Sj338的 4种表位混合免疫组小鼠获得了 34.2 % (P<0 .0 1)的减虫率及 4 6 .8% (P<0 .0 1)肝总减卵率 ;r Sj3384种表位和 r Sj2 2 .6的 4种表位混合免疫组获得的减虫率和肝总减卵率均高于 r Sj338的 4种表位混合免疫组 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 )。

社区和医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MLST联合SCCmec基因分型及耐药性比较

目的了解社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)和医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HAMRSA)分离株的耐药性及遗传背景。方法对CA-MRSA和HA-MRSA进行多位点序列分型(MLST)检测,应用多重聚合酶链式反应(PCR)技术对CA-MRSA和HA-MRSA进行SCCmec基因分型;采用Walk WAY96PLUS PC33药敏板联合K-B纸片扩散法检测CA-MRSA和HA-MRSA抗菌药物敏感性。结果 63株HA-MRSA共检测出2个基因型,4株CA-MRSA共检测出4个基因型,二者遗传背景完全不同。HA-MRSA对红霉素、克林霉素、四环素、庆大霉素、左氧氟沙星和环丙沙星耐药率显著高于CAMRSA(均P<0.05)。结论滨州医学院附属医院CA-MRSA和HA-MRSA分型及主要流行株存在差异,CA-MSSA药物敏感性明显高于HA-MRSA;MLST联合SCCmec基因分型方法是MRSA分子流行病学分析的有效方法。

卵黄抗体IgY检测血吸虫病人循环抗原的初步研究

目的探讨抗可溶性虫卵抗原(SEA)卵黄抗体(IgY)检测血吸虫循环抗原的应用价值。方法以纯化的鸡IgY作为捕捉抗体,以酶标抗SEA单克隆抗体NP28-5B为检测抗体的双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(S-ELISA)检测急、慢性血吸虫病人和健康人血清,并与常规检测抗体的酶联免疫吸附试验法(SEA-ELISA)作比较。结果S-ELISA测得SEA浓度(y)与吸光度(A450)值(x)呈明显的正相关(y=459.22x-108.14,r=0.9481)。急性血吸虫病人循环抗原的阳性率为100.00%(9/9),慢性血吸虫病人循环抗原的阳性率为84.44%(38/45),健康人的特异性为96.00%(48/50)。两种方法对血吸虫病的检出率差异无统计学意义(P>0.05)。结论S-ELISA具有较好的敏感性和特异性,可用于血吸虫病免疫诊断。

以提高教育质量为核心的医学微生物学教学改革的研究

教育改革是高等学校的重要任务,以提高教学质量为核心开展基础教学与临床实践相结合的教育教学方法,能够提高教师对课程的全面调控能力,改变教师教育教学思维。在教学工作中提倡教师先实践,学生再实践的教育模式,有利于开展案例式教学,有利于开展实验教学改革,也有利于医学微生物学的教学改革。

病原生物学课程建设探讨

为加快病原生物学课程建设,本文就师资队伍建设、教学内容重组、教材建设和教学模式改革等方面提出建议和措施。

65株临床分离MRSA的SCCmec基因分型及耐药性研究

目的了解临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的葡萄球菌盒染色体(SCCmec)基因型分布特点及耐药状况。方法多重聚合酶链反应(PCR)对MRSA进行SCCmec基因分型;普通PCR对MRSA进行4种耐药基因扩增;应用纸片扩散法测试MRSA对19种抗菌药物的敏感性。结果 SCCmec分型显示60株受试MRSA为SCCmecⅢ型菌株,4株为SCCmecⅣa型菌株,1株未分型。65株MRSA临床株对多种抗菌药物耐药,对氯霉素耐药率(4.62%)相对较低,对利奈唑胺、奎奴普丁/达福普汀、万古霉素、替考拉宁均敏感。4种耐药基因的阳性率分别为aac(6')/aph(2'')93.85%、aph(3')Ⅲ52.31%、tetM 92.31%、ant(4')9.23%。结论临床分离的MRSA SCCmec基因型以Ⅲ型为主,且具有多重耐药的特征,对氨基糖苷类、四环素类耐药基因有较高的携带率,多重PCR可以有效地用于大批量临床分离的MRSA SCCmec分型研究。

cp23重组抗原用于微小隐孢子虫病血清学诊断价值的研究

目的探讨微小隐孢子虫cp23重组抗原(下称cp23重组抗原)在微小隐孢子虫病血清学诊断中的价值。方法收集112例腹泻患者粪便及血清标本,前者行抗酸染色法检测,后者分别应用微小隐孢子虫cp23重组抗原及卵囊全抗原ELISA法检测。结果两种抗原ELISA法检测的阳性率均略高于粪便检查结果,三者比较均无明显差异,并具有很好的一致性;有免疫缺陷者微小隐孢子虫cp23重组抗原ELISA法检测阳性率显著高于一般腹泻人群。结论微小隐孢子虫cp23重组抗原具有较高的敏感性,在相关疾病的免疫诊断中具有重要价值。

麦门冬对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的影响

目的探讨麦门冬对环磷酰胺(CTX)所致小鼠骨髓抑制的影响。方法将90只小鼠随机分成5组,即正常对照组、CTX组和麦门冬低、中、高剂量组。正常对照组、CTX组均予0.9%氯化钠注射液灌胃,麦门冬低、中、高剂量组分别予麦门冬水提物2.5、5、10g/kg灌胃,每只0.5mL,每日1次,连续给药10日。于灌胃第3、6、9日,正常对照组予0.9%氯化钠注射液腹腔注射各1次,其余各组予CTX30mg/kg腹腔注射,每只0.5mL。分别检测小鼠外周血白细胞和骨髓有核细胞数量、骨髓细胞有丝分裂指数、骨髓嗜多染红细胞微核率。结果CTX组及麦门冬低、中、高剂量组外周血白细胞计数(WBC)、骨髓有核细胞及骨髓细胞有丝分裂指数均下降,与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01),但麦门冬低、中、高剂量组均高于CTX组(P<0.05,P<0.01),且麦门冬高剂量组均高于麦门冬低剂量组(P<0.05);CTX组及麦门冬低、中、高剂量组微核率均升高,与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01),但麦门冬低、中、高剂量组均低于CTX组(P<0.01),且麦门冬高剂量组高于麦门冬低剂量组(P<0.05)。结论麦门冬对CTX所致的小鼠骨髓抑制和损伤具有保护作用。

电子显微镜观察抗菌肽抗菌机理

电子显微镜观察正常生长的大肠杆菌在受到抗菌肽作用后,在不同时间里,被作用的大肠杆菌形态有很大的差异.大肠杆菌被抗菌肽作用30 min后在形态上看不到明显的变化,而作用过夜后(约12 h)细菌内部电子密度增强,质壁出现分离,细胞壁出现空泡并且界限模糊.作用16 h以上电子密度进一步增强,细菌走向老化死亡趋势.说明抗菌肽使细菌细胞膜的通透性发生了改变.

Ipr1对巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染免疫相关基因表达的影响

目的应用基因芯片技术检测Ipr1的表达对巨噬细胞感染分枝杆菌H37Ra后参与免疫应答的相关基因的表达差异。方法实验组与对照组细胞分别感染分枝杆菌H37Ra,基因芯片检测实验组和对照组细胞感染H37Ra 96h后免疫相关基因表达差异。定量PCR反应检测芯片结果中上调的3个基因的表达差异用以验证芯片结果的可靠性。结果基因芯片检测结果显示Ipr1基因的表达上调了11个固有免疫机制中相关基因表达,其中与MΦ抗Mtb感染关系密切的基因有:TLR2、TLR4I、rak1、Traf6、Ifngr1、Tnfrsf1a,而参与调节适应性免疫应答的相关基因如:IL-1,IL-12无明显表达差异。结论 Ipr1增强MΦ抗Mtb感染的机制可能主要是通过上调MΦ抗感染固有免疫机制的有关基因的表达从而发挥抗菌作用。本实验为进一步研究Ipr1促进MΦ的活化及杀伤胞内吞噬的Mtb的作用机制奠定了基础。

血清学诊断中结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶的应用

【目的】在原核系统中表达结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate car-boxykinase PEPCK),并研究该蛋白在诊断结核病人血清抗体中的应用价值。【方法】应用基因重组技术表达重组蛋白结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶,经亲和层析法纯化表达产物。用表达的重组蛋白免疫小鼠,研究其免疫学特性。间接酶联免疫吸附试验(Enzyme link immunosorbent assay,ELISA)检测结核病人血清中特异性IgG抗体,并与结核杆菌抗体胶体金法诊断试剂盒检测结果对比。【结果】试验表明转化入大肠杆菌中的重组质粒能够表达并纯化出相对分子量为72kDa的重组蛋白;Western blot证实重组蛋白能够与小鼠抗BCG血清发生特异性反应;重组蛋白免疫小鼠后,小鼠血清中的抗体滴度可达1:1280以上;重组蛋白用作ELISA包被抗原检测病人血清阳性率为17.3%(30/173),其中排菌病人的阳性率为32.5%(13/42),不排菌病人的阳性率为12.9%。该方法结果与结核杆菌抗体胶体金法诊断试剂盒的检测结果相比,敏感性为51.0%,特异性为96.7%。【结论】结核杆菌PEPCK具有较好的免疫原性和抗原性,有可能作为结核病血清学诊断的一组抗原之一。

日本血吸虫NP30抗体检测方法的优化

目的为了提高单克隆抗独特型抗体NP30抗体检测系统在大山区日本血吸虫病疫区的诊断效能,在原有的双抗体夹心ELISA方法的基础上对其进行优化、改良,建立间接ELISA血清学诊断方法。方法通过正交设计,选用L27(313)正交表,对NP30腹水包被酶标板的浓度、血清浓度、血清孵育时间和辣根过氧化物酶标记抗人IgG的二抗孵育时间共4个因素的3个水平进行不同组合的实验,确定该间接法的最佳实验条件。并用建立的方法对50份云南大山区日本血吸虫粪孵阳性病人血清样本和50份非疫区正常人血清样本进行检测,评价其敏感性和特异性。结果确定的该间接法最佳检测条件为:NP30腹水4μg/ml包被酶标板,血清浓度为1∶100,37℃孵育60min,二抗为37℃孵育30min。该方法的敏感性和特异性分别为88%和96%。结论该方法具有较高的诊断价值,可用于大山区日本血吸虫病疫区的诊断检测。

NP30/抗体检测试剂盒在云南大山区型血吸虫病流行区的现场应用

目的用NP30/抗体检测试剂盒在大山区型血吸虫病流行区筛查病人,评价其应用价值。方法在云南省大山区型血吸虫病流行区,选择3个自然村作为现场,随机抽取10～70岁的村民作为调查对象,进行血吸虫病病史个案调查;收集粪便,作毛蚴孵化检查;静脉采血,分离血清,分别采用NP30/抗体检测试剂盒和酶联免疫吸附试验试剂盒(SEA/ELISA法)检测特异性IgE和总IgE抗体。结果3个村共筛查村民506人,粪便毛蚴孵化阳性164例,阳性率为32.41%;NP30和SEA/ELISA的阳性率分别为58.30%和75.10%。在164例粪检阳性血清样本中,NP30和SEA/ELISA的阳性符合率分别为87.80%和84.76%。在342例粪孵阴性血清样本中,NP30和SEA/ELISA的阳性率分别为44.15%和70.47%。结论NP30/抗体检测试剂盒具有较高的敏感性和特异性,可用于大山区型血吸虫病流行区病人筛查。