全腹腔镜根治性远端胃切除术后是否行胃肠减压的疗效比较

目的:比较全腹腔镜远端胃癌根治术后是否行胃肠减压的临床疗效,总结更适合患者的术后处理方案。方法:回顾分析2021年6月至2021年9月收治的50例胃癌患者的临床资料,根据术后是否行胃肠减压分为对照组(行胃肠减压)与观察组(无胃肠减压),对比分析两组临床疗效及焦虑、抑郁评分。结果:观察组与对照组术后排气时间[(2.40±0.87)d vs.(3.56±0.82)d,P<0.001]、下床活动时间[(1.60±0.71)d vs.(2.20±0.76)d,P=0.006]、肺炎发生率(20%vs.60%,P=0.004)、呃逆发生率(8%vs.40%,P=0.008)、焦虑自评量表得分[(45.36±7.86)分vs.(53.16±11.92)分,P=0.009]、抑郁自评量表得分[(43.08±8.31)分vs.(48.96±5.22)分,P=0.004]差异均有统计学意义;胃瘫发生率(8%vs.12%,P=1.000)、吻合口漏发生率(P=1.000)、术后出血发生率(P=1.000)差异均无统计学意义。结论:全腹腔镜根治性远端胃切除术后不行胃肠减压,术后排气时间、下床活动时间短,肺炎发生率、呃逆发生率风险低,可有效缓解患者的不良情绪,可作为腹腔镜根治性远端胃切除术后的选择。

银杏双黄酮通过调控细胞周期对胃癌细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制

目的探讨银杏双黄酮通过调控细胞周期对胃癌细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养人胃癌MKN-45细胞;银杏双黄酮溶于二甲基亚砜(DMSO)中, 使用MKN-45专用培养基配制系列浓度的银杏双黄酮溶液, 分为0 μm(含1‰浓度的DMSO)组、12.5 μm组、25.0 μm组、50.0 μm组、100.0 μm组, 分别处理胃癌MKN-45细胞48 h, 使用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验验证细胞的增殖能力, 并确定半数抑制浓度, 以供后续实验使用;在培养的胃癌细胞MKN-45中分别加入1‰DMSO、浓度50.0 μm的银杏双黄酮及c-myc抑制剂处理48 h, 分为空白对照(NC)组、银杏双黄酮组及银杏双黄酮+c-myc抑制剂组, 使用流式细胞术验证银杏双黄酮对胃癌细胞的凋亡及细胞周期的影响, 蛋白质印迹法(Western blot)检测Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路下游关键基因c-myc、凋亡相关指标B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)及细胞周期相关指标周期蛋白依赖激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白B1(CCNB1)的表达水平。各组间比较比较采用t检验。结果 CCK-8结果显示12.5 μm组细胞生存率低于0 μm组[(83.75±1.16)%比(102.26±3.08)%, t=10.83, P<0.01];25.0 μm组细胞生存率生存率低于0 μm组[(75.60±1.64)%比(102.26±3.08)%, t=12.68, P<0.01];50.0 μm组细胞生存率明显低于0 μm组[(53.29±1.33)%比(102.26±3.08)%, t=30.36, P<0.01];100.0 μm组细胞生存率明显低于0 μm组[(25.41±1.02)%比(102.26±3.08)%, t=47.66, P<0.01], 测得48 h时胃癌MKN-45细胞半数抑制浓度(IC50)值为51.39;流式细胞术实验结果显示银杏双黄酮可诱导胃癌MKN-45细胞凋亡(凋亡率由12.36%上升到49.60%), 并导致胃癌细胞G2期阻滞(G2/M期的细胞数量从1.85%上升到27.00%);Western blot实验结果显示, 银杏双黄酮组bax蛋白水平表达高于NC组(571 241±7 627比364 248±351, t=71.72, P<0.01);银杏双黄酮组bcl-2蛋白水平低于NC组(604 069±7 597比681 315±7 017, t=19.76, P<0.01);银杏双黄酮组CDK2蛋白水平表达低于NC组(627 653±9 488比742 450±5 791, t=27.32, P<0.01);银杏双黄酮组cyclinb1蛋白水平表达低于NC组(558 302±11 687比708 767±20 598, t=16.81, P<0.01);银杏双黄酮组WNT信号通路下游基因c-myc蛋白水平表达量低于对照组(643 589±6 304比836 895±6 428, t=56.80, P<0.01);银杏双黄酮+c-myc抑制剂组c-myc蛋白水平表达量低于银杏双黄酮组(504 992±6 779比643 589±6 304, t=39.61, P<0.01)。结论银杏双黄酮通过调控Wnt信号通路, 降低胃癌细胞中c-myc的表达来调控细胞周期, 从而影响胃癌的增殖与凋亡能力。

微小RNA-30a-5p激活Wnt/β-连环蛋白信号通路对胃癌细胞增殖与侵袭的作用机制

目的探讨人微小RNA(has-miR)-30a-5p调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对胃癌细胞增殖及侵袭的影响及其作用机制。方法体外培养胃癌MKN45细胞;在所研究胃癌细胞系中使用小干扰RNA(siRNA)转染建立miR-30a-5p的敲除和过表达模型,胃癌MKN-45细胞分为3组:miR-30a-5p小干扰RNA(miR-30a-5pinhibitor)组,miR-30a-5p过表达RNA组和空白对照组(NC),荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和蛋白质印迹法(Westernblot)检测Wnt/β-catenin信号通路相关标志物CyclinD1(CCND1)基因的表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-30a-5p与Wnt信号通路下游关键基因CCND1的靶向调节关系;在培养的胃癌细胞MKN-45中加入Wnt/β-catenin信号通路抑制剂-银杏双黄酮,分为miR-30a-5pinhibitor组、miR-30a-5pinhibitor+银杏双黄酮组、miR-30a-5pInhibitorNC组及miR-30a-5pInhibitorNC+银杏双黄酮组,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验验证各组细胞的增殖能力,细胞迁移实验(Transwell)验证各组细胞的侵袭能力。各组间比较采用t检验。结果qPCR实验结果显示过表达miR-30a-5p能够显著抑制CCND1在mRNA的表达(0.58±0.05,t=11.39,P<0.01),Westernblot实验结果显示,CCND1蛋白水平,miR-30a-5pinhibitor组较NC组明显上升(284437±2127比215273±4097,t=25.95,P<0.01),miR-30a-5pmimics组较NC组明显下降(85586±309比197661±948,t=194.70,P<0.01);双荧光素酶实验结果显示过表达miR-30a-5p后野生组中WNT信号通路活性较对照组显著降低(0.39±0.03,t=13.96,P<0.01);CCK-8结果显示2d后miR-30a-5pinhibitor+银杏双黄酮组细胞抑制率明显高于miR-30a-5p inhibitor组[(93.09±4.18)%比(146.42±5.80)%,t=12.92,P<0.01];miR-30a-5p Inhibitor NC+银杏双黄酮组细胞抑制率明显高于miR-30a-5pInhibitorNC组[(53.80±3.54)%比(100.00±2.18)%,t=19.25,P<0.01]。Transwell结果显示miR-30a-5pinhibitor+银杏双黄酮组穿膜细胞量明显低于miR-30a-5pinhibitor组[(63.67±9.61)个比(100.00±10.44)个,t=4.44,P<0.05];miR-30a-5pInhibitorNC+银杏双黄酮组穿膜细胞量明显低于miR-30a-5pInhibitorNC组[(19.33±6.66)个比(45.00±4.58)个,t=5.50,P<0.01]。结论miR-30a-5p可以调控Wnt/β-catenin信号通路,过表达miR-30a-5p后可抑制Wnt/β-catenin信号通路降低胃癌细胞中CyclinD1(CCND1)的表达,进一步影响胃癌的增殖与侵袭。