肝细胞癌中Pyk2、Twist及E-cadherin的表达及临床意义

目的探讨肝癌组织中富含脯氨酸的酪氨酸蛋白激酶2(proline-rich tyrosine kinase-2,Pyk2)、Twist和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达及临床意义。方法收集滨州市人民医院2006年2月~2012年2月手术切除的80例肝癌组织标本作为研究对象,其中配对癌旁组织(距离癌组织边缘<3 cm)50例。采用免疫组化En Vision法检测Pyk2、Twist和E-cadherin蛋白的表达,并分析其与临床病理特征和侵袭转移的关系。结果 Pyk2在肝癌组织及癌旁肝组织中的阳性表达率分别为71.3%、12.0%,差异有统计学意义(P<0.05);Twist在肝癌组织及癌旁肝组织中的阳性表达率分别为66.3%、6.0%,差异有统计学意义(P<0.01);E-cadherin在肝癌组织及癌旁肝组织中的阳性表达率分别为27.5%、90.0%,差异有统计学意义(P<0.01)。Pyk2、Twist和E-cadherin蛋白阳性表达与肝癌病理分级、分化程度、血管侵犯及TNM分期均明显相关(P<0.05),肝癌组织中,Pyk2与Twist表达成正相关(P<0.05),Pyk2和E-cadherin表达成负相关(P<0.05),Twist和E-cadherin表达也成负相关(P<0.05)。结论 Pyk2、Twist及Ecadherin共同参与了肝癌的发生、发展,Pyk2可能通过上调Twist的表达促进肝癌侵袭转移。

中耳炎患者医院感染危险因素与病原菌分析

目的探讨中耳炎患者医院感染危险因素及病原菌分布,为减少中耳炎患者医院感染提供理论依据。方法选取医院2010年1月-2014年12月收治的600例中耳炎患者,其中30例出现医院感染,对中耳炎感染患者医院感染的危险因素及病原菌分布进行统计;采用SPSS17.0软件进行统计分析。结果 600例中耳炎患者,其中30例发生医院感染,感染率为5.00%;共分离出病原菌30株,其中革兰阴性菌17株占56.67%,以铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌为主,革兰阳性菌11株占36.67%,以金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌为主,真菌2株占6.66%,以白色假丝酵母菌为主;单因素分析结果显示,住院时间、病程、损伤性操作、咽喉疾病、不规范使用抗菌药物与中耳炎患者发生医院感染具有相关性(P<0.05);进一步行多因素logistic分析,结果显示,住院时间、病程、损伤性操作、咽喉疾病、不规范使用抗菌药物是中耳炎患者医院感染的危险因素。结论中耳炎患者医院感染的危险因素较多,根据危险因素进行有针对性的干预,根据病原菌分析选择合适的抗菌药物的进行治疗,可有效减少中耳炎患者医院感染的发生。

Pyk2VEGF及N—cadherin在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨富含脯氨酸的酪氨酸蛋白激酶2（Pyk2）、血管内皮生长因子（VEGF）和N-钙黏蛋白（N-cadherin）在肝细胞癌中的表达及与临床病理参数之间的关系。方法应用免疫组织化学法检测80例肝癌组织及癌旁肝组织中Pyl（2、VEGF及N-cadherin的表达情况，并分析它们与临床病理参数的关系。结果Pyk2、VEGF、N-cadherin在肝癌组织的阳性表达率均高于癌旁肝组织，差异有统计学意义（71．3％vs 12．0％；63．8％vs 8．0％；57．5％vs 10．0％，P〈0．05）。Pyk2，VEGF、N-cad-herin阳性表达与肝癌病理分级、肿瘤分化程度、血管侵犯及临床TNM分期均有关（P〈0．05）。经speannan等级检验分析，Pyk2与VEGF、N．eadherin在肝癌组织中的表达均呈正相关（P〈0．05），VEGF和N—cadherin在肝癌组织中的表达也呈正相关（P〈0．05）。结论Pyk2、VEGF及N—cadherin与肝癌血管形成及肿瘤侵袭转移密切相关，推测Pyk2基因可作为肝癌预后判断的一个重要指标。

Pyk2基因对肝癌He p3 B细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的：探讨沉默富含脯氨酸的酪氨酸激酶2（Pyk2）基因对人肝癌Hep3 B细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法构建Pyk2基因RNA干扰（RNAi）载体，脂质体转染至肝癌Hep3B细胞，实验分3组，Pyk2 RNA干扰组（siRNA组）：转染携带Pyk2基因RNAi的质粒；阴性对照组：转染不携带Pyk2基因RNAi的空载质粒；空白对照组：未转染任何质粒。应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blotting鉴定Pyk2基因和蛋白表达；采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）、Transwell侵袭和划痕实验分别检测细胞增殖、侵袭及迁移等生物学特性。结果 Pyk2基因干扰后肝癌 Hep3B 细胞 Pyk2 mRNA 的表达（0．16±0．03）较阴性对照组（0．74±0．13）和空白对照组（0．77±0．16）均明显下降，差异均有统计学意义（t＝51．46，P＝0．000；t＝53．21，P＝0．000）。Pyk2基因干扰后肝癌 Hep3B 细胞 Pyk2蛋白的表达（0．24±0．06）较阴性对照组（0．83±0．05）和空白对照组（0．91±0．06）均明显下降，差异均有统计学意义（t＝57．29，P＝0．000；t＝68．53，P＝0．000）。siRNA组48 h细胞增殖抑制率（26．17％±0．28％）较阴性对照组（9．28％±0．22％）和空白对照组（6．47％±0．31％）明显提高，差异均有统计学意义（t ＝31．45，P＝0．004；t＝34．64，P＝0．002）。siRNA组细胞的穿膜细胞数（32．5±8．5）／10 HP明显低于阴性对照组（98．4±12．3）／10 HP和空白对照组（112．6±11．3）／10 HP，差异有统计学意义（t＝95．64，P＝0．000；t＝105．17，P ＝0．000）。siRNA 组的划痕愈合率（28．17％±1．46％）显著低于阴性对照组（77．38％±2．24％）和空白对照组（79．41％±3．17％），差异有统计学意义（t ＝85．86，P＝0．000；t ＝89．37，P＝0．000）。结论 Pyk2基因参与肝癌Hep3B细胞的增殖、侵袭及迁移，与肿瘤发展、侵袭、转移等密切相关，Pyk2有望成为肝癌诊断和治疗的分子靶标。

PI3 K、Akt 及 E－cadherin 在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义

目的：探讨磷脂酰肌醇－3－激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）及E－钙黏素（E－cadherin）在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学EnVison法检测62例甲状腺乳头状癌、30例结节性甲状腺肿、30例正常甲状腺组织中PI3K、Akt及E－cadherin的表达，并对性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期及淋巴结转移等因素进行分析。结果62例甲状腺乳头状癌中PI3K、Akt及E－cadherin蛋白的阳性表达率分别为74．2％（46／62）、66．1％（41／62）、16．1％（10／62） ，与结节性甲状腺肿、正常甲状腺组织相比，差异均有统计学意义（ P ＜0．05）。甲状腺乳头状癌Ⅰ-Ⅱ期中PI3K及Akt蛋白的阳性表达率均低于Ⅲ-Ⅳ期（χ2＝4．976， P ＝0．026；χ2＝6．233， P ＝0．013）；淋巴结转移组中PI3K及Akt蛋白的阳性表达率均高于淋巴结无转移组（χ2＝6．675， P ＝0．010；χ2＝7．511， P ＝0．006）。而E－cadherin蛋白在Ⅰ-Ⅱ期的阳性表达率明显高于Ⅲ-Ⅳ期（χ2＝6．558， P＝0．010）；E－cadherin蛋白在淋巴结无转移组的阳性表达率明显高于伴有淋巴结转移组（χ2＝5．678， P ＝0．017），经Spearman等级相关性分析表明，PI3K与Akt蛋白的阳性表达呈正相关（ r ＝0．423， P＜0．05），PI3K与E－cadherin蛋白的阳性表达呈负相关（ r ＝－0．527， P ＜0．05），Akt与E－cadherin的阳性表达也呈负相关（ r ＝－0．417， P ＜0．05）。结论 PI3K／Akt信号通路参与了甲状腺乳头状癌的发展、侵袭及转移。