胃癌患者外周血1,25-二羟维生素D3水平与T细胞亚群的关系

目的分析胃癌患者外周血1,25-二羟维生素D3水平与T细胞亚群的关系。方法选取2015年1月-2017年12月我院收治的80例手术治疗的胃癌患者及80例健康体检者;采用酶联免疫吸附法检测外周血中1,25-二羟维生素D3水平,采用流式细胞术检测T细胞亚群。结果两组性别、年龄差异无统计学意义(P> 0.05);胃癌患者外周血1,25-二羟维生素D3水平显著低于健康对照[(26.34±4.22)μg/L vs (37.25±5.10)μg/L,P=0.000];PD-1^+及CD4^+T细胞水平显著高于健康对照(56.83±4.12 vs 62.31±3.89,24.12±5.44 vs 33.54±4.12,P均<0.05),CD8^+及CD4^+/CD8^+水平显著低于健康对照(26.31±5.19 vs 23.31±4.28,0.82±0.24 vs 1.31±0.32,P均<0.05);胃癌患者外周血中1,25-二羟维生素D3水平与PD-1^+及CD4^+T细胞亚群及CD4^+/CD8^+呈显著正相关(r=0.716,r=0.679,r=0.537,P均<0.05),与CD8^+T细胞呈显著负相关(r=-0.624,P <0.05)。结论胃癌患者外周血1,25-二羟维生素D3水平低于健康人群,其与PD-1^+、CD4^+T细胞亚群及CD4^+/CD8^+呈正相关,与CD8^+呈负相关。

真核翻译起始因子4γ2调控N-乙酰氨基半乳糖转移酶1 mRNA对胃癌细胞恶性表型的影响

目的探讨真核翻译起始因子4γ2(EIF4G2)通过调控N-乙酰氨基半乳糖转移酶1(GALNT1)mRNA对胃癌进展的影响。方法通过生物信息数据库分析GALNT1、EIF4G2在胃癌细胞和胃癌组织中的表达及与胃癌患者预后的关系,并分析胃癌组织中EIF4G2、GALNT1表达的相关性。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测GALNT1 mRNA、EIF4G2 mRNA在人胃黏膜上皮细胞GES-1和人胃癌细胞(AGS细胞等)中的表达水平,并采用蛋白质印迹法(Western blot)检测GALNT1、EIF4G2蛋白表达水平。建立干扰GALNT1和过表达EIF4G2的AGS细胞株,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力,采用TUNEL实验检测细胞凋亡能力,采用划痕实验和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力,采用Western blot检测凋亡和转移相关蛋白表达水平,采用RIP实验和RNA下拉实验检测GALNT1 mRNA与EIF4G2的结合关系。结果胃癌组织和胃癌细胞中的GALNT1、EIF4G2水平分别高于正常组织和人胃黏膜上皮细胞,差异有统计学意义(P<0.001),且与胃癌患者预后差相关;胃癌组织中,EIF4G2表达与GALNT1表达呈正相关。敲低GALNT1后,AGS细胞活力降低,克隆形成数、迁移和侵袭细胞数减少,凋亡细胞数增加,Bcl-2、MMP2、MMP9蛋白表达降低,Bax、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达增加,差异有统计学意义(P<0.001)。EIF4G2可与GALNT1 mRNA结合,促进GALNT1 mRNA、GALNT1蛋白表达及GALNT1 mRNA稳定性,差异有统计学意义(P<0.001)。共转染sh-GALNT1-1与oe-EIF4G2可逆转sh-GALNT1-1对AGS细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。结论EIF4G2可通过稳定GALNT1 mRNA促进胃癌细胞增殖、迁移、侵袭并抑制细胞凋亡,其或可成为胃癌临床诊疗的新靶点。