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芹黄素对人眼Tenon囊成纤维细胞增生的影响
被引量:
1
1
作者
邹会会
王继兵
+4 位作者
黄旭东
刘姗姗
满辉
李寿庆
马刚
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期233-237,共5页
背景青光眼滤过手术后人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)的增生是滤过手术失败的主要原因,寻找抑制术后HTFs增生的药物可提高滤过手术的成功率。目的观察芹黄素对HTFs体外生长的抑制效应并探讨其作用机制。方法斜视手术中获取的人眼Tenon囊...
背景青光眼滤过手术后人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)的增生是滤过手术失败的主要原因,寻找抑制术后HTFs增生的药物可提高滤过手术的成功率。目的观察芹黄素对HTFs体外生长的抑制效应并探讨其作用机制。方法斜视手术中获取的人眼Tenon囊组织剪成1mm×1mm×1mm的组织块,进行原代培养,免疫荧光法进行细胞波形蛋白检测以鉴定培养的HTFs。取第3~5代HTFs接种于96孑L板中,加入0、20、40、80、160μmol/L芹黄素后继续培养,于24、48、72h后分别取一块96孔板,在酶联免疫检测仪上检测560nm波长处各组细胞的吸光度(A。)值,磺基罗丹明B(SRB)法测定细胞的增生能力。分别在培养基中加入40、80、160μmol/L芹黄素,同时在不同浓度芹黄素组培养基中均加入10汕g/LBrdU,继续培养48h,在各组同一个视野下分别拍摄荧光显微镜和光学显微镜照片,计算BrdU的标记率,以未添加任何芹黄素(0μmol/L)组为对照组。用Hoechst33258染色后在荧光显微镜下观察培养细胞的形态学改变,采用流式细胞技术检测细胞的凋亡情况和细胞周期的变化。结果培养的细胞生长状态良好,免疫荧光法检测可见细胞对波形蛋白呈阳性反应,为细胞质中均匀的绿色荧光,确定培养的细胞为HTFs。SRB法检测结果显示,HTFs的增生值(A。)随着芹黄素浓度的增加而逐渐下降,同浓度芹黄素组HTFsA。值随着作用时间的延长逐渐下降,差异均有统计学意义(F㈣u:480.306,P=0.000;F目目=555.144,P=0.000)。0、40、80~mol/L芹黄素作用HTFs48h后BrdU的标记率分别为(87.860+-0.632)%、(61.520+-4.306)%、(23.480~4.472)%,各组之间的总体比较差异有统计学意义(F=299.347,P=0.000),其中40μmol/L、80μmol/L芹黄素组HTFsBrdU的标记率均明显低于0μmol/L芹黄素组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。Hoechse33258染色发现,不同浓度芹黄素组的细胞数目减少,随着芹黄素浓度的增加,细胞核固缩和变形的细胞数目增加。流式细胞术检测发现,随着芹黄素浓度的增加,G。/G,期细胞的百分数逐渐增加,而S期和G:/M期细胞的百分数逐渐下降,差异均有统计学意义(Fc㈣1=58.621,P=0.000;Fs=32.357,P=0.001;Fc2/M=83.998,P=0.000)。0、40、80、160~mol/L芹黄素作用72h后,细胞的凋亡率分别为(4.77±0.21)%、(13.24±1.35)%、(18.33±1.86)%、(31.58±2.77)%,4个组的总体差异有统计学意义(F=204.791,P〈0.05)。结论芹黄素通过诱导细胞凋亡,并将细胞阻滞于C/C期而抽柏JHTFs的士曾堆苴椎田里剂骨和时问俯觞幛,
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关键词
芹黄素
人Tenon囊成纤维细胞
凋亡
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职称材料
题名
芹黄素对人眼Tenon囊成纤维细胞增生的影响
被引量:
1
1
作者
邹会会
王继兵
黄旭东
刘姗姗
满辉
李寿庆
马刚
机构
德州市人民医院
眼科
潍坊
眼科
医院
潍坊医学院临床医学系眼科教研室
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期233-237,共5页
基金
山东省自然科学基金项目(ZR2010HM015)
文摘
背景青光眼滤过手术后人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)的增生是滤过手术失败的主要原因,寻找抑制术后HTFs增生的药物可提高滤过手术的成功率。目的观察芹黄素对HTFs体外生长的抑制效应并探讨其作用机制。方法斜视手术中获取的人眼Tenon囊组织剪成1mm×1mm×1mm的组织块,进行原代培养,免疫荧光法进行细胞波形蛋白检测以鉴定培养的HTFs。取第3~5代HTFs接种于96孑L板中,加入0、20、40、80、160μmol/L芹黄素后继续培养,于24、48、72h后分别取一块96孔板,在酶联免疫检测仪上检测560nm波长处各组细胞的吸光度(A。)值,磺基罗丹明B(SRB)法测定细胞的增生能力。分别在培养基中加入40、80、160μmol/L芹黄素,同时在不同浓度芹黄素组培养基中均加入10汕g/LBrdU,继续培养48h,在各组同一个视野下分别拍摄荧光显微镜和光学显微镜照片,计算BrdU的标记率,以未添加任何芹黄素(0μmol/L)组为对照组。用Hoechst33258染色后在荧光显微镜下观察培养细胞的形态学改变,采用流式细胞技术检测细胞的凋亡情况和细胞周期的变化。结果培养的细胞生长状态良好,免疫荧光法检测可见细胞对波形蛋白呈阳性反应,为细胞质中均匀的绿色荧光,确定培养的细胞为HTFs。SRB法检测结果显示,HTFs的增生值(A。)随着芹黄素浓度的增加而逐渐下降,同浓度芹黄素组HTFsA。值随着作用时间的延长逐渐下降,差异均有统计学意义(F㈣u:480.306,P=0.000;F目目=555.144,P=0.000)。0、40、80~mol/L芹黄素作用HTFs48h后BrdU的标记率分别为(87.860+-0.632)%、(61.520+-4.306)%、(23.480~4.472)%,各组之间的总体比较差异有统计学意义(F=299.347,P=0.000),其中40μmol/L、80μmol/L芹黄素组HTFsBrdU的标记率均明显低于0μmol/L芹黄素组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。Hoechse33258染色发现,不同浓度芹黄素组的细胞数目减少,随着芹黄素浓度的增加,细胞核固缩和变形的细胞数目增加。流式细胞术检测发现,随着芹黄素浓度的增加,G。/G,期细胞的百分数逐渐增加,而S期和G:/M期细胞的百分数逐渐下降,差异均有统计学意义(Fc㈣1=58.621,P=0.000;Fs=32.357,P=0.001;Fc2/M=83.998,P=0.000)。0、40、80、160~mol/L芹黄素作用72h后,细胞的凋亡率分别为(4.77±0.21)%、(13.24±1.35)%、(18.33±1.86)%、(31.58±2.77)%,4个组的总体差异有统计学意义(F=204.791,P〈0.05)。结论芹黄素通过诱导细胞凋亡,并将细胞阻滞于C/C期而抽柏JHTFs的士曾堆苴椎田里剂骨和时问俯觞幛,
关键词
芹黄素
人Tenon囊成纤维细胞
凋亡
Keywords
Apigenin
Human Tenon capsule fibroblast
Apoptosis
分类号
R77 [医药卫生—眼科]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
芹黄素对人眼Tenon囊成纤维细胞增生的影响
邹会会
王继兵
黄旭东
刘姗姗
满辉
李寿庆
马刚
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
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