《医学微生物学》教学体会

医学微生物学是医学基础课程之一，主要研究一些致病性微生物的生物学性状、致病性及怎样检测和防治的一门科学。由于理论性和实践性强，讲好这门课程将关系到今后临床课的学习。通过多年的教学实践，谈几点体会。

蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠糖脂代谢的调整及微血管并发症的防治

目的:观察具有活血化瘀、补气益肾、软坚散结作用的蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠糖脂代谢的干预以及微血管并发症的影响。方法:实验于2001-07/2004-07在潍坊医学院分子免疫研究室完成。选用8周龄的清洁级健康雄性Wistar大鼠40只。①造模及分组:用0.1mol/L枸橼酸钠缓冲液(pH4.5)链脲佐菌素配成4.5g/L的溶液,按50mg/kg单次腹腔注射,72h后取大鼠尾静脉血查空腹血糖值达16.7mmol/L的大鼠30只纳入实验。采用随机抽签法将大鼠分成2组:中药治疗组和糖尿病组,每组15只;同时另取与糖尿病大鼠体质量、鼠龄相匹配的健康大鼠15只作为正常对照组。②分组干预:中药治疗组:饲料中加用蜂贝化瘀胶囊中的粉末(蜂胶、丹参、葛根、贝母、生地、菟丝子、黄精及黄芪等),以21.6g/kg喂养10周。糖尿病组及对照组:普通饲料喂服大鼠10周。③生物化学指标的测定:血浆醛糖还原酶活性测定:参照Vander等方法测定血浆醛糖还原酶的辅酶-还原型辅酶2的吸光度示醛糖还原酶活性。尿蛋白测定采用改良Lowry法。全血糖化血红蛋白含量测定:采用微柱亲和层析法。血脂测定:总胆固醇和三酰甘油测定均采用酶法。血清脂质过氧化物含量测定:脂质过氧化降解产物丙二醛含量,采用721分光光度计,按试剂盒说明测定。24h尿蛋白测定:采用考马斯亮蓝法。按Green等方法用Greiss试剂测一氧化氮的代谢产物亚硝酸盐含量,间接反映一氧化氮含量。④血管平滑肌细胞3H-胸腺嘧啶核苷掺入率测定:以液闪仪测定各组血管平滑肌细胞的3H-胸腺嘧啶核苷掺入率,反映血管平滑肌细胞内的DNA合成量。⑤形态学观察:分别对肾脏和眼球切片进行苏木精-伊红和过碘酸-Schiff染色,光镜下观察肾脏及视网膜病理改变。制备肾脏和视网膜组织超薄切片,乙酸双氧铀和枸橼酸铅染色,透射电镜观察肾脏及视网膜超微结构的改变。⑥用t检验比较组间差异。结果:纳入大鼠55只,其中10只造模失败被剔除,进入结果分析45只。①血糖、总胆固醇及丙二醛水平:中药治疗组均明显低于糖尿病组(t=4.15,2.38,2.35,P<0.05～0.01),与正常对照组差异不明显(P>0.05);糖尿病组均明显高于正常对照组(t=2.77～5.20,P<0.05～0.01)。②血醛糖还原酶活性、糖化血红蛋白和尿蛋白含量:中药治疗组明显低于糖尿病组(t=2.35～5.03,P<0.05～0.01),糖尿病组明显高于正常对照组(t=4.05,4.22,5.19,P<0.01);血浆亚硝酸盐含量:中药治疗组明显高于糖尿病组(t=2.21,P<0.05),糖尿病组明显低于正常对照组(t=2.62,P<0.05)。③血管平滑肌细胞内3H-胸腺嘧啶核苷掺入率:中药治疗组明显低于糖尿病组犤(11891±1386),(12729±1438)min-1,t=2.23,P<0.05犦,而与正常对照组差异不明显犤(10909±1255)min-1,P>0.05犦。④形态学观察结果:糖尿病组大鼠肾脏结构和血管、视网膜血管均有炎性浸润性增生改变;中药治疗组其病理改变较糖尿病组明显减轻。结论:蜂贝化瘀胶囊可改善糖尿病大鼠各项代谢指标,且能明显减轻其肾及视网膜微血管并发症。

复方连竹胶囊对糖尿病大鼠脂肪细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:研究中药复方连竹胶囊对糖尿病大鼠脂肪细胞(lipoblast)肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)mRNA表达的影响,寻找防治糖尿病及微血管炎性并发症的有效途径。方法:复制糖尿病大鼠模型,采用核酸原位杂交、组织培养及生化技术分析测定各项指标。结果:糖尿病组大鼠脂肪细胞TNF-αmRNA的表达明显增强,血糖、血脂、糖化血红蛋白、尿蛋白、醛糖还原酶活性及丙二醛含量均明显高于正常对照组(P<0.05);糖尿病组大鼠血浆NO含量明显低于正常对照组(P<0.05)。中药治疗组以上各指标均较糖尿病组有明显改善,但与正常对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。形态学观察,糖尿病组大鼠肾血管及视网膜血管均有炎性浸润性增生改变;中药治疗组其病理改变较糖尿病组减轻。结论:复方连竹胶囊对糖尿病大鼠有明显的治疗作用,并能降低脂肪细胞TNF-αmRNA的表达,减低微血管炎性并发症的产生。

IL-2在治疗急性白血病中的应用及进展

IL-2作为一种提高细胞免疫功能的治疗剂在临床肿瘤治疗中得到广泛应用.现已证明其对黑色素瘤、肾癌有显著的治疗效果,对急性白血病的治疗效果也有目共睹,如在AML骨髓移植、化疗后的巩固治疗及骨髓净化等方面的应用.IL-2给治疗白血病带来了希望,但目前仍存在高剂量的毒性、用量、适应证及疗效等方面的问题.

蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠肾脏细胞Fas和Fas-L表达的影响

目的:研究中药蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及 Fas 和 Fas-L 表达的影响,探讨该药对糖尿病肾病的防治机制。方法:大鼠腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型,用蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠进行干预治疗,采用全自动生化分析仪测定大鼠血、尿代谢指标,原位末端标记法检测肾脏细胞凋亡,免疫组化和流式细胞术检测肾皮质 Fas 和 Fas-L 的表达。结果:模型组血糖(Glu)、尿素氮(BUN)、尿蛋白(Upro)较正常组明显升高(P<0.01),中药组则有明显改善。模型组较正常组大鼠肾小球、肾小管凋亡细胞数明显增多(P<0.01),Fas 和 Fas-L 的表达显著增强(P<0.01);中药组较模型组大鼠凋亡细胞数明显减少(P<0.01),Fas 和 Fas-L 表达减弱(P<0.01)。结论:蜂贝化瘀胶囊可能通过影响凋亡相关蛋白 Fas 和 Fas-L 的表达而抑制肾脏细胞凋亡,从而发挥对肾脏的保护作用。

蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的：观察具有活血化瘀、软坚散结、补肾益气功效的中药蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠血尿代谢指标和肾脏细胞凋亡及Fas和Fas-L表达的影响。 方法：①实验于2002-10／2003-10在潍坊医学院分子免疫实验室完成。选用30只8周龄健康雄性Wistar大鼠。②喂养1周后，随机选用22只大鼠，将其造成糖尿病模型：按50mg／kg腹腔注射链脲佐菌素(溶于0．1mol／L枸橼酸钠缓冲液中，pH4．5)，72h后血糖值达16．7mmol／L者确定为糖尿病模型。将造模成功的16只大鼠分为2组：模型组和中药组各8只。设其余8只为对照组(只注射相同体积的枸橼酸钠缓冲液)。中药组根据每只大鼠体质量(按大鼠体表面积换算成等效剂量21．6g／kg)每日给予五六个蜂贝化瘀胶囊(主要成分：黄芪30g，黄精30g，蜂胶15g，丹参30g葛根15g，生地30g，浙贝母15g，菟丝子30g)中的粉末进行灌胃，喂养10周，自由饮水。正常组及模型组用普通饲料喂服10周，自由饮水。③血糖、血肌酐、尿肌酐、尿素氮、尿蛋白测定采用日立7170A全自动生化分析仪，计算肌酐清除率[尿肌酐浓度(mg／d)×尿量(mL／min)／血肌酐浓度(mL／d)]。采用原位末端标记法检测肾脏细胞凋亡情况。采用免疫组化法和流式细胞仪检测Fas和Fas-L表达，以荧光指数[(样品的平均荧光强度-对照样品平均荧光强度)／正常组织平均荧光强度]表示Fas及Fas-L的相对含量。④用t检验比较组间差异。 结果：大鼠30只中因造模失败脱失6只，进入结果分析24只。①血糖、尿素氮、尿蛋白：模型组明显高于对照组和中药组(t=2．25～5．36，P<0．05～0．01)。②内生肌酐清除率：三组相近(P>0．05)。③单个肾小球细胞凋亡率和肾小管细胞凋亡率：模型组均明显高于对照组和中药组[(1．89±0．03)％，(13．85±0．53)％；0，(2．91±0．30)％；(0．65±0．03)％，(9．98±0．81)％，t=2．27～5．15，P<0．05～0．01]。④Fas和Fas-L荧光指数：模型组均明显高于对照组和中药组(1．51±0．07，1．69±0．11；1．00±0．02，1．00±0．02；1．25±0．02，1．31±0．12，t=2．39～4．85，P<0．05～0．01)。 结论：蜂贝化瘀胶囊可能通过影响凋亡相关蛋白Fas和Fas-L的表达而抑制肾脏细胞凋亡，从而改善大鼠血尿代谢指标，发挥对肾脏的保护作用。

穴位按摩治疗小儿脑性瘫痪1例报告

小儿脑性瘫痪(脑瘫)是在小儿早期由于多种原因引起的脑损伤所致的中枢神经运动障碍和姿势异常的一组病症,多伴有神经发育迟滞、视力、听力及语言障碍。为探讨一种有效的治疗方法,采用穴位按摩治疗小儿脑瘫1例,效果显著。