医学遗传伦理学的困惑及案例教学中的对策

案例教学是提高课堂教学效果的有效途径,但遗传伦理案例的复杂性与"悖理"性自然会引发医学伦理观念上的碰撞与困惑。如何对典型的遗传伦理案例做出以恰如其分地解释,引导学生确立科学的医学伦理观,使其在未来的医务生涯中面对医学伦理困惑时能够做出正确选择,是当前医学遗传学课堂教学一项重要课题。

跨学科拾遗补缺,提高医学遗传学教学质量

医学遗传学是基础医学与临床医学之间的桥梁学科,关联学科多,知识覆盖面广。为培养学生综合运用知识、综合分析问题的能力,需师生共同努力。教师要不断跨学科学习,提高自身专业素养。以对概率学、统计学原理的理解及其与遗传学专业知识有机结合为例,探讨教师通过对跨学科知识的理解与掌握,提高教学质量。

肥胖儿童瘦素受体基因变异对脂质代谢及脂肪分布的影响

目的探讨瘦素受体(leptin receptor,LEPR)基因第20外显子变异对脂质代谢的影响。方法用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)法及聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析120例单纯型肥胖儿童及120例健康儿童的LEPR基因的第20外显子基因变异频率,并测定血清中甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL),于相同条件下测身高、体重,按公式计算体重指数(BMI)、脂肪百分比(%fat)。结果共检出3种第20外显子的基因型,其酶切片段分别为:A/A型:201bp,75bp;A/G型:201bp,173bp,75bp,28bp;G/G型:173bp,75bp,28bp。肥胖儿童较健康儿童LEPR基因第3057位G→A突变频率增高(P<0.05)。纯合子A/A基因型的肥胖儿童其血清TG浓度、BMI、%fat均明显高于纯合子G/G基因型者(P<0.01),而血清HDL水平则明显低于后者(P<0.01),杂合子A/G型肥胖儿童,除其血清TG浓度高于纯合子G/G基因型者外(P<0.05),余各项指标均与另外两种基因型无显著性差异。结论单纯型肥胖儿童瘦素受体基因第20外显子存在基因多态性的变化,且这种变化明显影响肥胖儿童的脂质代谢及体脂分布。纯合子A/A基因型个体应提早注意饮食结构,避免由此而继发的各种疾病。

一种改进的异硫氰酸胍法结合硅胶膜离心吸附柱提取孕妇外周血微量胎儿RNA的方法

孕妇外周血中存在胎儿RNA为无创性产前诊断提供了基础.但血液中富含RNA酶和微量胎儿RNA的特点,对从孕妇血浆中提取胎儿RNA带来困难.我们以ε血红蛋白基因和胎盘特异表达基因4(PLAC4)mRNA作为研究对象,用改进的异硫氰酸胍法结合硅胶膜离心吸附柱法探索孕妇外周血中胎儿微量RNA的提取方法,获得满意效果.30例孕妇和9例非孕妇外周血样品中总RNA经凝胶电泳测定显示3条带,分别为28S,18S和5.8S.其28S条带亮度为18S亮度的2倍.总RNA质量浓度(A260/A280)为1.97 g/L,光密度比值(A260-A320)/(A280-A 320)为1.86.30例孕妇外周血样本有7例提取到ε血红蛋白基因mRNA,ε血红蛋白基因mRNA的最小浓度为0.537μg/mL,最大浓度为1.79μg/mL,ε血红蛋白基因mRNA的浓度中位数为1.24μg/mL.30例孕妇外周血样本提取到PLAC4基因mRNA,浓度最小值为2.105×103 copies/mL,最大值为12.760×103 copies/mL,而9例非孕妇中均未提取到(P<0.01),浓度中位数为6.612×103 copies/mL.因此,改进的异硫氰酸胍法与硅胶膜离心吸附柱纯化法相结合,可有效抑制RNA降解,用于提取、纯化孕妇血液中微量胎儿RNA.

孕妇外周血胎儿ε血红蛋白基因mRNA的表达及与孕龄的相关性

目的 探讨孕妇外周血中胎儿ε血红蛋白基因mRNA的表达水平及其与孕龄的相关性.方法 选择2008年10月—2009年11月在潍坊市人民医院行产前检查的7～16周正常单胎妊娠孕妇30例,常规方法提取全血总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法扩增胎儿ε血红蛋白基因片段,琼脂糖凝胶电泳,并扫描成像,用ImageJ软件对电泳条带进行图像分析,测定电泳条带的灰度值,计算孕妇外周血中胎儿ε血红蛋白基因mRNA的浓度,并分析其与孕龄之间的相关性.结果 30例样品RNA质量浓度值为0.98～3.19 g/L,平均（1.87±0.76） g/L;光密度平均比值为1.79,7例阳性,23例阴性.孕妇外周血中胎儿ε血红蛋白基因mRNA浓度为0.537～1.790 μg/ml,中位数为1.241 μg/ml.孕妇外周血中胎儿ε血红蛋白基因mRNA的浓度与孕龄呈负相关（r=-0.750,P=0.026）.结论 孕妇外周血中存在胎儿ε血红蛋白基因mRNA且其含量在7～16周与孕龄呈负相关,利用孕妇外周血中胎儿RNA进行无创性产前诊断具有可行性.

近亲婚配有害效应的数理分析

运用数学概率和遗传学原理对近亲婚配有害效应进行综合分析，着重强调近亲婚配与随机婚配常染色体隐性遗传病发病风险的比较。

两种胎儿特异性mRNA在母血中的表达研究

目的：检测孕妇外周血中着血红蛋白基因和PLAC4基因mRNA表达水平,比较其特异性及实用性。方法：选取55例正常妊娠孕妇和21例健康非孕妇女为研究对象,提取全血总RNA,采用实时定量PCR法检测着血红蛋白基因和PLAC4基因mRNA表达水平,并探讨其与孕龄的相关性。结果：55例孕妇外周血中14例扩增出胎儿着基因片段,31例为阴性；胎儿着血红蛋白基因mRNA质量浓度最小为0.571×103 copies/ml,最大为1.812×103 copies/ml,中位数为1.15×103 copies/ml,在孕7~10周该基因浓度与孕龄呈负相关（ P〈0.05）。55例正常妊娠孕妇外周血均扩增出PLAC4基因片段,最小值为1.853×103 copies/ml,最大值为15.221×103 copies/ml,中位数为7.836×103 copies/ml,表达水平与孕龄无相关性（P〉0.05）。21例健康非孕妇女外周血均未扩增出着血红蛋白基因和PLAC4基因片段。结论：与着血红蛋白基因mRNA相比较, PLAC4基因mRNA具有特异性更强、与孕龄无关、阳性率更高等优点,更适用于21三体的无创性产前诊断。

亲缘系数与近交系数的区别与联系

从基因的结构与功能上对亲缘系数和近交系数的区别与联系进行阐述。着重强调对常染色体隐性遗传病再发风险估计时，应运用数学概率知识和遗传学知识对两个概念从基因结构上的区别与功能上的统一进行分析。

银杏叶槲皮素对人肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨银杏叶黄酮单体成分槲皮素体外对人肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响。方法将银杏叶黄酮单体成分槲皮素作用于体外培养的人肝癌细胞HepC2,MTT法检测其对HepG2细胞增殖的影响,缺口末端核苷标记(TUNNEL)法检测其对HepG2细胞凋亡的影响。结果银杏叶黄酮单体成分槲皮素使体外培养的人肝癌细胞HepG2的增殖效率下降,使凋亡细胞数增加(P<0.01),两者均呈剂量依赖效应。结论银杏叶黄酮单体成分槲皮素具有与银杏叶总黄酮相似的作用,对体外培养的人HepG2细胞增殖有抑制作用,并能诱导细胞凋亡。

亲缘系数与近交系数的数理分析

运用数理知识和遗传学知识对亲缘系数和近交系数从概念及计算方法上比较相同与区别,着重强调在近亲婚配子代隐性遗传病再发风险估计时的应用。

银杏叶总黄酮对人肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨银杏叶总黄酮对体外培养的人肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响。方法将银杏叶总黄酮作用于体外培养的人肝癌细胞HepG2,MTT法检测其对HepG2细胞增殖的影响,缺口末端核苷标记(TUNNEL)法检测其对HepG2细胞凋亡的影响。结果银杏叶总黄酮对体外培养的人肝癌细胞HepG2的增殖效率下降,使凋亡细胞数增加(P<0.01),且呈剂量依赖效应。结论银杏叶总黄酮对体外培养的人HepG2细胞增殖有抑制作用,并能诱导细胞凋亡。

银杏叶总黄酮对人肝癌细胞增殖及Bcl-2基因mRNA水平的影响

目的探讨银杏叶总黄酮对体外培养的人肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用及其对Bcl-2基因mRNA水平的影响方法采用MTT法检测银杏叶总黄酮对HepG2细胞增殖的影响,提取Bcl-2基因的mRNA,以RT-PCR方法研究银杏叶总黄酮对Bcl-2基因表达的影响。结果银杏叶总黄酮使人HepG2细胞增殖率明显下降,且呈剂量依赖效应;Bcl-2基因mRNA水平随银杏叶总黄酮浓度升高而降低。结论银杏叶总黄酮对人HepG2细胞增殖有抑制作用,并能下调癌基因Bcl-2的表达,从而起到抗肿瘤的治疗作用。

银杏叶总黄酮对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响及其机制研究

目的探讨银杏叶总黄酮对体外培养的人肝癌HepG2细胞凋亡的促进作用及其分子机理。方法采用TUNEL法检测银杏叶总黄酮对HepG2细胞凋亡的影响,提取Bcl-2基因的mRNA,以RT-PCR方法研究银杏叶总黄酮对Bcl-2基因表达的影响。结果银杏叶总黄酮使人HepG2细胞凋亡指数增加(P<0.01),且呈剂量依赖效应;Bcl-2基因mRNA水平随银杏叶总黄酮浓度升高而降低。结论银杏叶总黄酮可促进人HepG2细胞的凋亡过程,并使Bcl-2基因mRNA水平降低,从而起到抗肿瘤的治疗作用。

发作性运动障碍疾病两家系和一例散发病例

发作性运动障碍疾病（paroxys malmovement disorder，PMD）为一类临床少见的神经系统发作性疾病，多于儿童期和青少年期发病，以男性居多，病因不明，有家族史或散发。现对2005年6月-2006年8月山东省潍坊市脑科医院诊断、治疗的发作性运动障碍疾病两家系和1例散发病例进行临床与遗传学分析，总结报告如下。

用聚合酶链法对两性畸形患者进行性别鉴定2例

用聚合酶链法对两性畸形患者进行性别鉴定２例张悦王文芝严明仁（潍坊医学院遗传学教研室潍坊２６１０４２）人类染色体在性别决定中起着关键的作用。在有些个体中，其性腺性别与相应的染色体性别并非一致甚或相反，如核型４６，ＸＸ男性，４６，ＸＹ女性。由于Ｙ染色体上...

特发性癫痫的流行病学研究

为了研究特发性癫痫的流行病学特征及遗传方式,作者结合家系分析,多基因检验等方法,研究了山东省遗传病调查中发现的210个特发性癫痫(IEP)大家系.结果表明,IEP的一级亲属患病率(32.11%)明显高于群体患病率(0.80%),表明IEP有遗传因素的影响.家系分析及多基因分析表明IEP为常染色体隐性遗传.在不同亲缘的子女患病率方面没有发现基因印迹现象.

特发性癫痫遗传方式的研究

目的为了探讨特发性癫痫（ＩＥＰ）的遗传方式。方法采用家系分析、多基因分析和分离分析的方法，对山东省遗传病群体调查中发现的２１０个ＩＥＰ家系进行了研究。结果ＩＥＰ不符合多基因遗传，而主要为常染色体隐体遗传。分离分析结果显示，Ｕ×Ｕ多发家庭组和Ｕ×Ａ家庭组可以接受常染色体隐性遗传的假设；部分Ｕ×Ｕ组的家庭可以接受常染色体隐性遗传的假设，但是大多数Ｕ×Ｕ组的家庭为散发病例，散发病例比例为７８．５％。结论散发病例和Ｕ×Ｕ（ｆ）家庭组可能存在遗传异质性，其原因有待进一步的研究。

遗传性多发性中枢神经系统海绵状血管瘤5例临床特点分析

目的回顾性分析一家系中枢神经系统多发性海绵状血管瘤(Familial cerebral cavernous malformation, FCCM)的临床表现和根据不同表现的治疗特点,以提高对本病的认识。方法对一家系3代人中枢神经系统多发性海绵状血管瘤患者进行详细的病史询问、查体、影像学检查及治疗,并作遗传学分析。结果 (1)FCCM患者常为多发病灶;(2)对顽固性癫痫、出血患者推荐手术治疗,并且定期做核磁共振检查;(3)此家系可能为常染色体不完全显性遗传。结论核磁共振检查若发现多部位CCM提示可能为家族性,不同序列核磁共振成像(MRI)尤其是磁敏感、梯度回波序列、高场强MRI是重要检查手段,DT成像和fMR成像在外科手术中作用大。

齿状核红核苍白球丘脑下部萎缩一家系临床与基因特征

齿状核红核苍白球丘脑下部萎缩（dentatorubral-pallidoluysian atrophy，DRPLA）为迟发生共济失调中一种常染色体显性遗传的小脑共济失调，是CAG三核苷酸重复次数改变引起的，较少见，日本人群的发病率较高，约为0．6／10万，其他种族人群罕见。目前华人中DRPLA仅报道香港有2家系，散发病例1例。我们诊断一家系，报道如下。