58例壶腹周围癌的外科治疗体会

通过对手术治疗的58例壶腹周围癌病例分析,认为以胰腺癌发病率最高。早期诊断困难,进展期以B超扫描和在B超引导下行肿块穿刺细胞学检查确诊率高。治疗效果唯whipple手术最好,姑息性切除效果不佳。

经Y管术后早期腹腔灌注化疗在进展期胃癌中的应用

目的探讨进展期胃癌术后早期腹腔灌注化疗的实施方法及治疗效果。方法经Ｙ管对３６例进展期胃癌病人术后早期行腹腔灌注化疗，灌注药物有５氟脲嘧啶、顺铂、卡铂或表阿霉素。结果与术后静脉化疗组对比，其化疗毒副反应小，肝转移、腹水发生率低（Ｐ＜０．０５），无１例发生腹部并发症。

体外培养不同代次人成纤维细胞的衰老程度

目的:探讨体外培养不同代次人成纤维细胞的衰老程度,为组织工程化皮肤提供合适的种子细胞。方法:实验于2000-09/2002-06在潍坊医学院整形外科研究所完成。取6～8岁正常男性儿童20例包皮环切术切除的健康包皮组织,将包皮二倍体成纤维细胞进行传代培养,以不同代次(P0,P5,P10,…,P65)的细胞为实验对象,通过倒置相差显微镜、透射电镜、衰老相关β-半乳糖苷酶染色一系列检测方法,对不同代次成纤维细胞的衰老程度进行观察。结果:①成纤维细胞的形态学:P45以内成纤维细胞生长迅速,两三天即呈汇合状态,细胞排列紧密,多呈放射状、编织状或漩涡状走行,有的交叉重叠生长。P46以后细胞排列不规则,体积较大,形状扁平,胞浆区域增大,胞质突起多而大,胞内出现颗粒和空泡,边界不清,形态不规则;成批的细胞出现固缩、脱落,有离壁漂起的现象。②透射电镜结果:P0～P40:成纤维细胞胞质内有丰富的粗面内质网;细胞核大,核仁明显;细胞表面有许多短小突起,可见微绒毛和胞浆皱褶。P41～P65:细胞核/浆比例减小,细胞表面突起和微绒毛减少;核膜内折,有凋亡现象。③细胞生物学行为的改变:P60增殖速度较P10明显减慢。P10最大增殖数为47.3×105,对数生长期在3～6d,细胞倍增时间为2.18d;P60最大增殖数为8.5×104,对数生长期在4.0～7.5d,群体倍增时间为3.86d。④衰老相关β-半乳糖苷酶染色结果:与P10相比,P60中阳性细胞率大为增强(阳性细胞率为4%和60%);直线相关分析结果显示,β-半乳糖苷酶染色的阳性率和细胞代龄之间呈显著正相关(r=0.92,P<0.01)。结论:各代成纤维细胞老化程度不同,46代后的细胞老化明显,不适合作为组织工程化皮肤的种子细胞。

应用胶原海绵构建组织工程皮肤的实验研究

目的探讨以胶原海绵为支架材料构建组织工程皮肤的方法.方法体外分离、培养、鉴定角朊细胞和成纤维细胞,制备胶原海绵作为组织工程支架材料;在成功构建人工真皮的基础上,种植表皮细胞,构建人工复合皮肤,通过大体观察、HE染色与免疫组织化学进行组织学检测.结果制备的胶原海绵孔径平均100～150 μm,孔隙率89%,组织相容性良好;以胶原海绵构建的皮肤替代物免疫组织化学染色显示Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白和层粘连蛋白阳性,HE 染色可见均具有表皮和真皮双层结构,在形态结构上与正常皮肤相似.结论培养的人角朊细胞和成纤维细胞种植于胶原海绵支架上培养可构建出具有类似天然皮肤结构的组织工程皮肤.

应用胶原凝胶构建组织工程化皮肤的研究

目的探讨以胶原凝胶为支架材料构建组织工程化皮肤的可行性。方法体外分离、培养人皮肤表皮细胞和成纤维细胞;利用自制的胶原蛋白制成胶原凝胶作为组织工程支架材料;在成功构建人工真皮的基础上种植表皮细胞,构建复合人工皮肤;采用HE染色与免疫组织化学的方法对复合人工皮肤进行组织学检测。结果HE染色可见,构建的复合人工皮肤具有表皮和真皮双层结构;免疫组织化学染色显示,Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白和层粘连蛋白阳性,在形态结构上与正常皮肤相似。结论培养的人表皮细胞和成纤维细胞种植于胶原凝胶支架上,气-液界面培养可构建出具有类似正常皮肤结构的组织工程化皮肤。

海藻酸钠/壳聚糖微囊冻存的低温显微实验

目的研究海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠微胶囊(ACA)的冻存机制,探索一种ACA微囊低温保存的降温方法。方法ACA微囊随机分为2组,分别加入生理盐水(对照组)与终浓度为10%的低温保护剂二甲基亚砜(DMSO)(DMSO组),每组ACA微囊悬液置于可控低温显微镜载物台中,分别以1、10、30、100℃/min的降温速率降温至–120℃左右时停止降温,在显微镜下观察ACA微囊的形态改变。将2组完全冷冻的ACA微囊以50℃/min复温速率复温至37℃,在倒置显微镜下观察其形态学改变,计算微囊的完好率、皱缩率与破损率。结果对照组以1、10℃/min的降温速率冻存ACA微囊时,生成的冰晶粗大,冰晶的生长可导致微囊发生形变;而DMSO组以30、100℃/min的降温速率冻存ACA微囊时,生成的冰晶较为细小,对微囊的损伤也更小,并且复温后的微囊形态保存良好,与对照组和同组以1、10℃/min降温速率冻存比较,其微囊完好率明显增高(P<0.05)。结论微囊在低温保存过程中主要受到冰晶生长所导致的机械性损伤,提高降温速率与添加低温保护剂可以有效地抑制冰晶生长。

超声在早期触诊阴性乳腺癌术中定位的应用

目的:总结利用超声对早期乳腺癌行术中定位的应用与体会。方法:回顾性分析2002年1月～2010年1月我院57例临床触诊阴性的乳腺癌患者,行决定性手术之前利用术中超声对病灶进行定位,并用蓝染或金属导丝对病灶进行标记。结果:利用术中超声可正确地对乳腺癌病变进行定位切除,其中浸润癌占97%(55/57),复切率为7%(4/57),在所有患者中切缘阴性率为88%(50/57),其中大部分切缘阳性的患者是无钙化的原位导管癌或浸润性导管癌伴广泛原位导管癌,只有5%的患者为多中心性浸润癌,并对其实施乳腺切除术。结论:对于临床触诊阴性的乳腺癌患者若需影像辅助术中定位病变时,超声应为首选方法之一。

胃肠道肿瘤患者血清瘦素和肿瘤坏死因子水平与营养状态的关系

目的研究胃肠道恶性肿瘤患者血清瘦素和肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化,以及其与营养状态的关系。方法采用放射免疫法测定63例胃肠道恶性肿瘤患者和50例正常人的血清瘦素及TNF-α水平,并分析血清瘦素和TNF-α水平与体质量指数(BMI)、三头肌皮皱厚度(TSF)、上臂中部臂围(MAC)和血清白蛋白(ALB)等营养参数的关系。结果胃肠道恶性肿瘤患者的血清瘦素水平下降,TNF-α浓度升高,与对照组比较有显著性差异(P<0.01);血清瘦素水平与BMI、TSF、MAC呈明显正相关,与TNF-α无相关性(P>0.05)。结论胃肠道恶性肿瘤患者的血清瘦素水平下降,TNF-α水平升高,血清低瘦素水平降低对食欲的刺激,可能参与胃肠道恶性肿瘤恶液质的发生。

体外培养不同代次人皮肤成纤维细胞超微结构的研究

目的观察正常人皮肤成纤维细胞体外培养过程中超微结构的改变.方法将下2人二倍体成纤维细胞进行连续传代培养,以不同代次的细胞为实验对象,通过倒置相差普微镜与透射电镜对各代细胞进行观察.结果 45代以内的细胞生长较迅速,45代后的细胞生长逐渐缓慢,65代细胞几乎无增殖趋势.40代以内细胞的超微结构基本正常,41～65代细胞出现核膜内折,细胞核/浆比例减小,细胞表面突起和微绒毛减少.结论 40代以内成纤维细胞适合做组织工程的种子细胞.

分化型甲状腺癌的诊治进展

分化型甲状腺癌是最常见的甲状腺恶性肿瘤,包括乳头状癌和滤泡状癌,早期无特异性表现,诊断需结合病史、体格检查、影像学检查,但穿刺细胞学检查是术前确诊的重要依据。治疗方法有手术治疗、放射治疗和内分泌治疗。手术治疗是最佳方法,但切除范围和是否常规行颈淋巴结清扫尚存争议。

肝癌切除术中肝动脉留置化疗泵的临床意义

目的 探讨肝癌切除术中肝动脉留置化疗泵对复发的监测、预防和治疗价值。方法 3 4例行肝癌根治性切除者 ,术中肝动脉留置化疗泵 ,定期经化疗泵肝动脉灌注化疗和CO2 超声造影。结果 1)直径≤ 3cm 2 4个肝癌复发灶 ,CO2 超声造影检出率 95 .8% ,而常规超声为 5 0 % (P <0 .0 1)。 2 ) 2 0例单纯肝切除和 3 4例肝切除加肝动脉化疗者 ,其1、3年的复发率分别是 40 %、75 %和 2 9.4%、64 .7% (P <0 .0 5 ) ,1、3年的生存率分别是 70 %、3 0 %和 91.2 %、47.1% (P<0 .0 5 )。结论 肝癌术中肝动脉留置化疗泵 ,术后行肝动脉CO2 超声造影和化疗对于复发的监测、预防和治疗具有重要价值。

转录因子Snail在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的检测转录因子Snail mRNA及蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达,探讨Snail在NSCLC发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学、RT-PCR的方法检测NSCLC、癌旁相对正常肺组织(>5cm)中转录因子Snail蛋白及mRNA的表达,并分析其与临床病理参数之间的关系。结果 NSCLC组织中Snail mRNA的阳性表达率(82.7%)高于癌旁相对正常肺组织(23.1%,P<0.05);NSCLC组织中Snail mRNA的阳性表达量(1.368±0.614)高于癌旁相对正常肺组织(0.579±0.217,P<0.05)。NSCLC组织中Snail蛋白的阳性表达率(80.8%)高于癌旁相对正常肺组织(23.1%,P<0.05),且癌组织中Snail蛋白阳性表达率与TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05),而与组织分型、分化程度、吸烟史无关(P>0.05)。结论 NSCLC的癌变、侵袭、转移可能与Snail蛋白、mRNA的高表达有关。

正常人成纤维细胞体外培养过程中β-半乳糖苷酶的变化(英文)

背景:二倍体成纤维细胞常用于研究细胞水平的衰老,β-半乳糖苷酶是鉴别衰老细胞的标志酶,本实验拟观察正常人成纤维细胞在体外培养过程中β-半乳糖苷酶的变化情况。目的:建立一个稳定的二倍体成纤维细胞体外培养体系,了解正常人成纤维细胞老化过程中β-半乳糖苷酶的变化规律。设计:自身对照实验。单位:潍坊医学院整形外科研究所、潍坊医学院附属医院普外科。材料:实验于2000-09/2002-09在潍坊医学院整形外科研究所完成。实验样本来源于在潍坊医学院附属医院普外科行包皮环切术的6～8岁正常男性儿童(n=20)切除的健康包皮组织。方法:①成纤维细胞培养:取包皮组织,分离真皮和表皮,真皮部分用含100mL/L胎牛血清DMEM培养液终止胰蛋白酶作用,再用200U/mLⅠ型胶原酶37℃条件下消化30min,收集细胞悬液,接种于培养皿中,细胞培养达80%汇合时进行传代培养。②细胞鉴定:用相差显微镜观察细胞形态变化及生长增殖情况、透射电镜及抗vimentin免疫细胞化学染色。③细胞生物学行为的观察对比:取生长状态良好的细胞,按群体倍增水平分为两组,第一组代表年轻细胞,采用10代龄;第二组代表老化细胞,采用65代龄。进行消化传代,分别按2×104,4×104分别接种于24孔培养板内。每隔24h消化计数,每次每组计数3孔,计算均值。共记数8d,以培养时间为横轴,细胞数为纵轴,绘制生长曲线并计算细胞的群体倍增时间。④β-半乳糖苷酶组化检测及阳性细胞的半定量分析:成纤维细胞每5n代龄(共13代)作细胞爬片,漂洗,加入SA-β-gal染色液,37℃孵育48h。在显微镜下观察计数,蓝染细胞为阳性细胞,每次随机挑选视野计数500个细胞,得到阳性细胞百分率。主要观察指标:①正常人成纤维细胞生物学行为的改变。②正常人成纤维细胞老化过程中β-半乳糖苷酶的表达。结果:①正常人成纤维细胞生物学行为的改变:细胞生长曲线显示,老化细胞生长速度较年轻细胞明显减慢。年轻细胞最大增殖数约为47.3×105,对数生长期在3.0～6.0d,细胞倍增时间为2.18d。老化细胞最大增殖数各为8.5×104,对数生长期分别在4.0～7.5d,细胞群体倍增时间依次为3.86d。②正常人成纤维细胞老化过程中β-半乳糖苷酶的表达:与年轻细胞组(阳性细胞率=4%)相比,衰老细胞组中阳性细胞率(60%)大为增强。直线相关分析结果显示,β-半乳糖苷酶染色的阳性率和细胞代龄之间呈显著正相关(r=0.92,P<0.01)。结论:在正常人成纤维细胞从年轻向老化发展的过程中,细胞群体倍增时间呈增高的趋势;与年轻细胞相比较(占4%),β-半乳糖苷酶的表达在老化细胞中显著增强(占60%),且这种增强与细胞衰老表型的出现和细胞增殖能力的丧失相平行,可反应细胞的老化程度。本实验为建立成纤维细胞衰老模型提供了实验依据,同时也为老年学及肿瘤生物学甚至组织工程学发展提供科学依据。

体外培养不同代次成纤维细胞胶原基因表达及成纤维细胞对EGF的反应性

目的 观察体外培养不同代次人成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原基因的表达及对EGF刺激的反应性。方法 将正常人二倍体成纤维细胞进行连续传代培养 ,以不同代次的细胞为实验对象 ,应用RT PCR、3 H TdR掺入量测定等方法对不同代次细胞进行检测。结果 随细胞代次的增加 ,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA含量逐渐降低 ,3 H TdR掺入量降低 ,EGF促进P10 培养的成纤维细胞增殖 ,对衰老成纤维细胞 (P60 )无生长增殖的调控能力。结论 为建立人成纤维细胞衰老模型提供部分实验依据。

Syk基因在结肠癌组织中的表达及其临床意义研究

目的探讨Syk基因在结肠癌组织中的表达情况及其临床意义。方法应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测40例新鲜冰冻结肠癌组织及癌旁正常组织中Syk基因的表达,研究结肠癌组织中Syk基因的阳性表达情况及其临床意义。结果正常结肠组织中Syk基因的阳性表达率较结肠癌组织中明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结肠癌组织Syk基因的表达与结肠癌的淋巴转移及临床分期相关(P<0.05);结肠癌组织Syk基因表达与病理分级、血清癌胚抗原值、年龄、性别无关(P>0.05)。结论 Syk基因的表达缺失与结肠癌的发生、转移及临床分期有关。

PDX-1促进大鼠骨髓间质干细胞体外分化为胰岛素分泌细胞

目的:研究胰腺十二指肠同源框-1(pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1)基因在骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外分化中的作用。方法:构建含有PDX-1基因的真核表达载体,转染介质Superfect介导重组载体转染MSCs,G418筛选阳性细胞后对转染组(PDX-1+MSCs)和未转染组(PDX-1-MSCs)均体外进行诱导分化,流式细胞仪检测胰岛素阳性细胞的比例,胰岛素ELISA试剂盒测定转染组诱导后细胞的胰岛素分泌功能。结果:限制性酶切分析和序列测定证实成功构建了含有PDX-1基因的真核表达载体,荧光显微镜观察证实Superfect高效介导重组载体转染MSCs;流式细胞仪发现PDX-1+MSCs分化为胰岛素分泌细胞的数量较PDX-1-MSCs明显增多(阳性率分别为28.23%±2.56%和7.08%±2.69%),25mmol高浓度葡萄糖刺激的胰岛素分泌量(115.29±2.56μU/mL)较5mmol低浓度葡萄糖刺激的分泌量明显增高(56.61±4.82μU/mL)。结论:PDX-1能增强大鼠MSCs体外分化为功能性胰岛素分泌细胞的能力,对开展胰岛移植治疗1型糖尿病有重要价值。

表面麻醉在插胃管中的应用

目的探讨局部表面麻醉在插胃管中的应用效果，以期提高一次插胃管的成功率，减轻病人痛苦。方法将160例需要插胃管处置的病人，随机分为常规组和局麻组各80例进行插胃管操作。常规组按传统的插胃管方法进行，局麻组在插胃管前15min，用喉头喷雾器将1%地卡因向病人口腔及咽喉部连续喷雾3次，中间间隔2～3min，喷雾结束5～10min，按传统的插胃管方法插入胃管。结果局麻组易成功例数明显高于常规采用表面麻醉后插胃第一次插管成功率高，病人痛苦小，值得推广。

PTEN和P27在甲状腺癌中的表达及意义

目的研究PTEN和P27在甲状腺癌中的表达,探讨其与甲状腺癌生物学行为的关系。方法用免疫组化的方法检测PTEN和P27在不同甲状腺组织中的表达,并对结果作统计学分析。结果甲状腺癌与正常甲状腺组织和甲状腺腺瘤比较,PTEN和P27的阳性表达率明显降低。PTEN表达与甲状腺癌TNM分期、淋巴结转移呈负相关,PTEN和P27的表达呈正相关。结论抑癌基因PTEN与P27表达的降低在甲状腺癌的发生和转移过程中起到重要作用。

肝胆管结石合并肝胆管癌(附17例临床报告)

目的 探讨肝胆管结石与肝胆管癌的关系 ,总结本病的诊治经验。方法 对我院 10年来收治的肝胆管结石合并肝胆管癌 17例进行回顾性临床分析。结果 肝胆管结石合并肝胆管癌的发病率为 6.1% ;术前诊断正确率 5 8.8% (10 / 17) ;肿瘤分类有 3种类型 :肝脏肿块型 13例 ,胆管癌栓型 2例 ,胆管狭窄型 2例。镜下均为腺癌。根治性切除肿瘤 5例 ,生存 2 0～ 2 4个月。姑息性手术 12例 ,生存 4～ 6个月。结论 对病史长反复感染的肝胆管结石病人 ,短期内消瘦和难以解释的肝区疼痛者 ,应警惕并发肝胆管癌的可能。影像学发现结石和与其不相称的局限性肝胆管扩张 ,CT示低密度灶且增强扫描后强化不明显为其特点。肝胆管结石可能是诱发肝胆管癌的原因 ,提高远期疗效的关键是早期发现 ,早期手术。

白细胞介素-10联合抗CD_(40)L单克隆抗体对大鼠小肠移植早期排斥反应的研究

目的探讨重组大鼠白细胞介素-10(rIL-10)联合抗大鼠CD40L单克隆抗体对抑制大鼠小肠移植早期排斥反应的作用,为小肠移植免疫提供实验依据。方法将30只雄性SD大鼠和Wistar大鼠(各15只),建立(SD→Wister)大鼠小肠移植模型,随机分为A、B、C3组各10只。A组为生理盐水对照组;B组应用rIL-10;C组应用rIL-10联合抗CD40L单克隆抗体。3组均于术后第2天开始注射。术后第5、7天从3组随机各取5只,取小肠移植物,行组织病理学检查;采受体大鼠的外周血检测IL-2、干扰素-γ(INF-γ)表达水平。结果组织病理学检查:与A组相比,B、C组早期排斥反应明显延迟,且C组早期排斥反应较B组轻;外周血血清学检测:B、C组受体大鼠血清IL-2、INF-γ较A组明显降低,且C组较B组均有不同程度的下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 rIL-10联合抗大鼠CD40L单克隆抗体能有效抑制大鼠小肠移植的早期排斥反应。