基于肿瘤干细胞学说探究天花粉蛋白干预乳腺癌耐药株SP细胞的实验研究

目的:研究天花粉蛋白(TCS)对乳腺癌紫杉醇耐药株侧群细胞(MCF-7/PTX-SP细胞)的诱导凋亡作用,从干细胞角度探讨其作用机理。方法:FACS分选MCF-7/PTX细胞中的SP细胞,流式细胞仪检测SP细胞、非SP细胞中CD44^+CD24^-细胞比例、软琼脂克隆形成实验对其进行鉴定;流式细胞仪检测不同浓度TCS对SP细胞的促凋亡作用;RT-PCR法检测不同浓度TCS对SP细胞内Bcl-2和Bax基因表达的影响。结果:非SP细胞及SP细胞中CD44^+/CD24^细胞的比例分别为0.47%和59.14%;与非SP细胞相比,SP细胞具有更高的体外克隆形成能力;TCS对SP细胞具有凋亡诱导作用,随着药物浓度的增高,SP细胞的凋亡率也随之升高,差异有统计学意义(t1=-13.751,P<0.01;t2=-10.892,P<0.01;t3=-6.999,P<0.01);不同浓度TCS处理后SP细胞内BaxmRNA的表达量呈明显的剂量依赖性上升趋势(P<0.01),而Bcl-2mRNA的表达变化无统计学差异(P>0.05)。各浓度组Bcl-2/Bax值呈减少趋势(P<0.01)。结论:天花粉蛋白对乳腺癌耐药株侧群细胞具有凋亡诱导作用,其机制可能与上调Bax基因的表达有关。

中医药辨证治疗癌性发热60例

运用中医药辨证治疗癌性发热60例。根据患者的临床表现,共分为六型:阴虚内热型、热毒炽盛型、湿热蕴结型、血瘀发热型、气血亏虚型、邪滞少阳型。分别给予相应辨证施治。结果完全控制9例,占15.0%;部分控制22例,占36.7%;有效19例,占31.7%;无效10例,占16.7%;总有效率为83.3%。提示中医药对控制癌性发热有确切疗效。

中医药治疗原发性血小板减少性紫癜的临床研究进展

原发性血小板减少性紫癜（idiopathic thromboeytopenic purpura,ITP）又称免疫性血小板减少性紫癜,是一种原因不明的以出血及外周血血小板减少而骨髓巨核细胞数正常或增多但伴有成熟障碍为特征的获得性、出血性疾病,其发病机制与免疫失调导致血小板免疫性破坏有关。

中医药联合同步放化疗治疗晚期非小细胞肺癌疗效及安全性的Meta分析

目的系统评价中医药联合同步放化疗治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及安全性。方法计算机检索Pub Med、中国生物医学文献服务系统(CBM)、中国知网数据库、万方数据库、维普中文期刊全文数据库(VIP)、Cochrane等电子数据库,检索时间从建库至2013年12月。手工检索相关杂志、会议论文及未发表的灰色文献等。根据Cochrane系统评价手册5.0,筛选关于中医药联合同步放化疗(试验组)对比单纯放化疗组(对照组)治疗晚期NSCLC的中、英文随机对照试验(RCT),进行纳入文献的资料提取和质量评价,采用Rev Man 5.2软件进行Meta分析。比较两组治疗晚期NSCLC的临床客观疗效、生活质量、免疫能力、毒副作用及生存时间。结果共纳入20个符合标准的RCT,Meta分析结果显示:采用世界卫生组织(WHO)评价标准评价临床客观疗效,试验组有效率高于对照组〔相对危险度(RR)=1.83,95%CI(1.31,2.56),P=0.000 4〕,中药注射类亚组有效率高于对照组〔RR=1.76,95%CI(1.26,3.00),P=0.002〕;采用实体瘤的疗效评价标准(RESIST)评价临床客观疗效,试验组有效率高于对照组〔RR=1.93,95%CI(1.24,3.01),P=0.004〕,中药口服类亚组有效率高于对照组〔RR=1.90,95%CI(1.17,3.09),P=0.010〕;采用体力状况(KPS)评分评价生活质量,试验组KPS评分高于对照组〔RR=3.16,95%CI(2.09,4.77),P<0.000 01〕,中药口服类亚组KPS评分高于对照组〔RR=3.11,95%CI(1.81,5.34),P<0.000 1〕,中药注射类亚组KPS评分高于对照组〔RR=3.23,95%CI(1.71,6.10),P<0.000 1〕;两组CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、自然杀伤细胞(NK)所占比例比较,差异均无统计学意义(P>0.05);试验组放射性肺炎〔RR=0.49,95%CI(0.34,0.69),P<0.000 1〕及白细胞计数减少发生率〔RR=0.58,95%CI(0.39,0.87),P=0.009〕较对照组降低。结论中医药联合同步放化疗治疗晚期NSCLC的RCT研究目前开展较少,仍有很大提升的空间;在应用价值方面,两者联用可增加治疗效果,同时降低毒副作用的发生。

息贲胶囊对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及PCNA,CD-44,E-钙黏附素表达的实验研究

目的 探讨息贲胶囊对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及PCNA,CD-44,E-钙黏附素表达的影响.方法 用Lewis肺癌细胞株接种C57BL/6小鼠（H-2Kb）,造成自发性肺癌小鼠模型,息贲胶囊等中药灌胃治疗,用药后计数肺表面转移灶数目,免疫组织化学法检测瘤组织PCNA,CD-44,E-钙黏附素的表达.结果 息贲胶囊能减少肺转移灶数目,并能抑制肿瘤细胞PCNA的表达,增加E-钙黏附素的表达,降低CD44表达.结论 息贲胶囊能抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤生长,减少肺转移灶数目;其机制可能与抑制细胞增殖、降低PCNA表达、增加瘤细胞E-钙黏附素的表达、降低肿瘤组织CD44的表达有关.

中医药对大肠癌的精准治疗及研究进展

中医认为大肠癌是在正气亏虚的基础上,由于外感邪毒、饮食、情志等多种病因导致气滞血瘀、湿热下注、脾虚湿盛等,日久成积而形成本病。由于大肠癌病因病机复杂,单一证型不可将之概括,目前临证分型没有统一标准。经方治疗肿瘤辨证准确时,具有效如桴鼓的临床疗效。中药灌肠治疗大肠癌在临床上应用广泛,使药物直达病所,符合精准治疗。相关研究表明中药联合放化疗、靶向药物等治疗可以显著改善患者生活质量、提高机体免疫力、减轻化疗毒副反应等。大肠癌的发生、发展及转移离不开肿瘤微环境,近些年来在血管生成、免疫细胞等方面的深入研究,为中医药精准治疗大肠癌奠定了基础。中医药在减轻放化疗所致毒副反应、改善临床症状、延长生存期等方面临床疗效显著。

息贲胶囊抗肿瘤生长及免疫调节机制的实验研究

目的:观察息贲胶囊对自发性肺癌小鼠肿瘤生长及其免疫调节机制的影响。方法:用Lewis肺癌细胞株接种C57BL/6小鼠(H-2Kb),造成自发性肺癌小鼠模型,息贲胶囊等中药灌注治疗,用流式细胞仪分析CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群的变化及α-干扰素、白细胞介素-4含量变化。结果:息贲胶囊治疗转移性肺癌小鼠,肺转移结节明显减少(P<0.05);息贲胶囊高、低剂量组T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均高于模型对照组,CD8+均低于模型对照组,高剂量组与模型对照组两者比较有极显著性差异(P<0.01),高剂量息贲胶囊治疗组T细胞分泌α-干扰素及白细胞介素-4能力均有显著升高(P<0.01)。结论:息贲胶囊能抑制肿瘤生长,调节机体免疫功能,延长生存期,具有抗肿瘤作用。

息贲胶囊对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及MVD、VEGF、bFGF表达影响的研究

目的:探讨息贲胶囊对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及瘤组织MVD、VEGF、bFGF表达的影响。方法:采用Lewis肺癌细胞株接种C57BL/6小鼠(H-2Kb)复制肺癌小鼠模型,随机分为模型组,息贲胶囊低、中、高剂量组及参莲胶囊组,治疗组分别以3剂量息贲胶囊及参莲胶囊连续灌胃20天,观察抑瘤率、肺表面转移灶数,免疫组化法检测瘤组织MVD、VEGF、bFGF表达。结果:各给药组瘤重及肺转移灶数显著低于模型组(P<0.05,P<0.01),息贲胶囊高剂量组转移灶数低于参莲胶囊组(P<0.05);息贲胶囊高剂量组及参莲胶囊组MVD值低于模型组(P<0.01,P<0.05),两组无明显差异;除息贲胶囊低剂量组外,其他组VEGF、bFGF表达明显低于模型组(P<0.01)。结论:息贲胶囊能抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤生长,减少肺转移灶数目;其机制可能与息贲胶囊抑制VEGF、bFGF表达,减少肿瘤血管生成有关。

水通道蛋白-4在脑转移瘤表达及其中医研究进展

脑转移瘤是常见的颅内肿瘤,其发生不仅代表恶性程度高,往往也是治疗失败、预后差的主要因素。水通道蛋白-4作为一类具有高选择性特异性蛋白家族成员,与脑转移瘤的发生发展密切相关。传统中医将脑转移瘤的病机归结为风、痰、毒、瘀等方面,治则以醒脑开窍、活血化瘀、化湿利水为主。近年来,以AQP4为靶点的抗瘤中药已成为研究热点并逐渐受到关注。因此,对AQP4作用机制的具体探讨,有望为脑转移瘤的中医治疗提供新途径。

核苷酸剪切修复酶XPD基因多态性与非霍奇金淋巴瘤发病风险的研究

本研究探讨核苷酸剪切修复基因XPD基因多态与非霍奇金淋巴瘤(NHL)发病风险的关系。以309名NHL患者和305名健康对照者为研究对象,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态技术检测XPDG23591A、A35931C位点的基因多态,并应用非条件logistic回归方法进行数据分析,比较不同基因型与NHL发病风险的关系。结果表明,XPDG23591A和A35931C基因多态性与NHL发生无显著相关性。进一步将NHL分为滤泡性淋巴瘤(FL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、其他B细胞-NHL和T细胞-NHL4大类分析显示,在4类NHL中XPD23591位点变异基因型GA+AA型频率分别为16.3%、18.0%、10.5%、18.4%,对照组为12.5%。携带A变异基因型者发生各类NHL危险度(OR值)分别约为每GG型的1.43、1.58、0.89和1.50倍,但各病例组与对照组间差异无显著性(p>0.05);在4类NHL中XPD35931位点变异基因型AC+CC型频率分别约为15.2%、15.8%、18.4%、12.5%,与对照组11.5%相比,变异基因型频率有所增加,携带C变异基因型者发生各类NHL危险度分别约为AA型的1.41、1.48、1.75和1.12倍。但差异均无统计学显著性(p>0.05)。结论:中国山东地区汉族人群中XPDG23591A、G35931C位点基因多态性与非霍奇金淋巴瘤发病无关。

鳖甲煎丸预防胃癌术后复发转移临床研究

目的:观察鳖甲煎丸配合辅助化疗预防进展期胃癌术后复发转移的临床效果。方法:选取56例进展期胃癌术后病例,随机分为两组各28例,对照组单纯化疗,观察组化疗同时服鳖甲煎丸,观察复发转移情况、3年生存率和生活质量、体力状态评分。结果:观察组复发转移率低于对照组,3年生存率高于对照组,差异均具有统计学意义;观察组体力状况评分下降率大于对照组,差异有统计学意义。结论:鳖甲煎丸能有效预防胃癌术后复发转移,提高3年生存率,并能提高患者体能状况评分。

Hedgehog信号通路相关蛋白Gli1在乳腺癌中的表达及其意义

目的探讨Hedgehog信号通路转录因子Gli1在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学染色检测Hedgehog信号通路相关蛋白Gli1在102例乳腺浸润性导管癌及30例癌旁正常组织中的表达,并分析其表达与临床病理特征的关系。结果 Gli1蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为75.5%(77/102),高于癌旁正常组织的26.7%(8/30),两者差异有统计学意义(P<0.05)。Gli1蛋白的表达与腋窝淋巴结转移、雌激素受体(ER)表达有关(P<0.05),而与患者的年龄、绝经状况、肿瘤直径、病理分期、组织学分级、孕激素受体(PR)及人表皮生长因子受体-2(HER-2)表达状况均无关(P>0.05)。结论 Hedgehog信号通路相关蛋白Gli1在乳腺癌组织中存在高表达,其一定程度上对ER表达起到负向调节作用。

联合抗幽门螺杆菌治疗儿童免疫性血小板减少症的临床研究

目的探讨免疫性血小板减少症(ITP)患儿感染幽门螺杆菌(Hp)的特点及抗感染治疗的意义。方法采用13 C尿素呼气试验检测142例ITP患儿和92例健康儿童Hp感染情况。将ITP患儿中97例阳性者分为两组:联合治疗组49例,应用糖皮质激素联合抗Hp治疗;单药治疗组48例,单用糖皮质激素治疗。分别检测两组治疗前后血小板相关参数、血小板相关抗体和淋巴细胞亚群的变化。结果 ITP患儿Hp的感染率为69.7%,明显高于健康儿童(40.2%)。两组患儿治疗6个月后,联合治疗组患儿血小板计数、PCT、CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD4+/CD3+CD8+升高水平明显高于单药治疗组(P<0.01),而MPV、PDW、PAIgG、PAIgA、CD3+CD8+下降水平均高于单药治疗组(P<0.01)。结论 ITP患儿Hp感染率高于健康儿童;Hp可能通过影响机体免疫功能参与了儿童ITP的发病和发展过程,联合抗Hp治疗可改善ITP患儿机体免疫状态,提高治疗效果。

癌症“行气败乱”病机探讨

癌症的行气败乱病机是我们通过"《内经》理论指导下基于中国癌症发病大数据癌症病因病机研究"得出的新的中医癌症病机,即在人体脏腑功能虚弱的基础上,长期感受四时不正之气,造成机体阴阳不和、五脏功能失调、五行生克制化失衡,最终导致"行气败乱"。癌症是行气败乱的结果,也是形气失调、形不化气的一种病理状态。所以癌症的治疗就是通过"散者收之、终者始之"而纠正阴阳失调、五行败乱而重建人体阴阳五行平衡。本文从行气概念的出处、行气败乱与疾病的关系、癌症行气败乱病机的内涵和意义等方面阐述癌症行气败乱病机的核心内容,为理解和运用该病机防治癌症提供参考。

PUMA基因转染乳腺癌MCF-7细胞增强表柔比星致凋亡敏感性的研究

目的:探讨PUMA基因转染是否增强乳腺癌MCF-7细胞对表柔比星致凋亡的敏感性。方法:应用脂质体介导重组真核表达载体PUMA-pCDNA3和空载体pCDNA3质粒瞬时转染至乳腺癌MCF-7细胞中,G418筛选阳性细胞。将系列浓度(0.01～100μmol/L)的表柔比星分别作用于MCF-7、MCF-7/PUMA和MCF-7/pCDNA3细胞72 h,MTT法测定各组细胞的存活率并计算IC50,FCM、TUNEL法检测细胞凋亡情况,Western blotting检测各组细胞PUMA蛋白表达的变化。结果:MCF-7、MCF-7/PUMA和MCF-7/pCDNA3细胞的表柔比星IC50分别为(13±1.4)、(1.8±0.2)和(10.7±1.3)μmol/L,MCF-7/PUMA细胞对表柔比星作用的敏感性增加了7.2倍。表柔比星以剂量依赖方式诱导MCF-7细胞凋亡,但对MCF-7/PUMA细胞所诱导的凋亡比MCF-7和MCF-7pCDNA3更明显。低浓度表柔比星(0.1μmol/L)轻微引起MCF-7/pCDNA3[(1.15±0.26)%]和MCF-7细胞凋亡[(0.9±0.24)%],但能诱导MCF-7/PUMA细胞明显凋亡[(6.44±1.46)%];高浓度表柔比星(1μmol/L)诱导各组细胞凋亡,但表柔比星MCF-7/PU MA细胞凋亡率[(35.47±9.36)%]明显高于MCF-7[(12.6±3.73)%]和MCF-7/pCDNA3细胞[(15.2±5.17)%],差异均有统计学意义(P<0.01);FCM和TUNEL方法检测显示相同的结果。PUMA蛋白在MCF-7/PUMA细胞中的表达明显高于MCF-7和MCF-7/pCD NA3细胞。结论:PUMA基因稳定转染明显地增强了乳腺癌MCF-7细胞增强表柔比星致凋亡作用的敏感性。

Shh和Gli-1在人乳腺癌MCF-7耐药细胞株中的表达及意义

目的研究Shh和Gli-1在人乳腺癌耐药株中的表达情况,探讨Hedgehog信号通路与乳腺癌耐药的关系。方法高浓度间歇诱导法建立人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/PTX,MTT法检测紫杉醇(PTX)对MCF-7与MCF-7/PTX细胞的半数抑制浓度(IC_(50))。实时定量PCR(QPCR)检测MCF-7、MCF-7/PTX细胞中Shh、Gli-1 mRNA的表达。Western blotting检测MCF-7、MCF-7/PTX细胞中Shh、Gli-1蛋白的表达。结果 PTX对MCF-7细胞的IC_(50)为(0.10±0.02)mg/L,对MCF-7/PTX细胞的IC_(50)为(5.30±0.01)mg/L;耐药指数为53.0。Shh mRNA在MCF-7、MCF-7/PTX细胞中的表达量分别为0.78±0.12和1.45±0.56(P<0.01);Gli-1 mRNA在MCF-7、MCF-7/PTX细胞中的表达量分别为1.86±0.02和3.56±0.26(P<0.01)。Shh蛋白在MCF-7、MCF-7/PTX细胞中的表达量分别为0.58±0.06和1.03±0.22(P<0.01);Gli-1蛋白在MCF-7、MCF-7/PTX细胞中的表达量分别为1.17±0.12和2.78±0.09(P<0.01)。结论人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/PTX高表达Shh、Gli-1,化疗药物可能通过上调Hedgehog信号通路相关蛋白及基因介导乳腺癌耐药,针对该信号通路的靶向治疗将是克服乳腺癌耐药的一个新的选择。

从“亢害承制”论癌症“行气败乱”病机和肺癌治要

系统梳理“亢害承制”理论的《黄帝内经》渊源和历代名家的代表性注释,特别是清代医家虞抟关于“一元、六元和子来救母”等亢害承制元气论,表明元气是自然界万物化生和人体生命活动的原动力。重点论述了“行气败乱”癌症病机假说的理论内涵,即癌症的发生是由于脏腑虚弱,长期收受异常,造成五脏功能失调,五行生克制化失衡,导致机体脏腑组织形态结构变化异常、功能衰退的病理过程。并用“亢害承制”理论论述“行气败乱”癌症病机和补元治癌大法。脏腑虚弱是癌症发病的前提和基础,五脏功能失调、五行生克制化失衡是癌症发生的过程,“行气败乱”是癌症形成和发展的病理结果与状态。其中元气亏虚是癌症发生的关键并贯穿于整个病理过程。大补元气,恢复和促进机体的化生能力,改善虚弱脏腑功能,恢复五脏生克制化关系是癌症治疗的本质。肺癌的发生除了与先天一元亏虚有关外,还与其不胜之火亢、其子肾水寒救母不力密切相关,所以肺癌的治则包括大补元气、清火热、滋肾水。

XPD基因多态性与非霍奇金淋巴瘤发病风险

目的探讨核苷酸剪切修复基因(XPD)单核苷酸多态性与非霍奇金淋巴瘤(NHL)发病风险的关系。方法以309例NHL患者和305例健康对照者为研究对象,采用PCR-RFLP技术检测XPDG23591A、A35931C位点的基因多态。结果初步分析XPD G23591A和A35931C基因多态性与总的NHL无显著相关。对NHL亚类分析显示,在滤泡性淋巴瘤(FL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、其他B细胞NHL和T细胞NHL中,XPD23591位点GA+AA型频率分别为16.3%、18.0%、10.5%、18.4%,对照组为12.5%,OR值分别为1.43、1.58、0.89和1.50,差异无统计学意义(P>0.05);XPD35931位点AC+CC型频率分别为15.2%、15.8%、18.4%、12.5%,对照组为11.5%,OR值分别为1.41、1.48、1.75和1.12,差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论山东地区汉族人群XPD G23591A、G23591A位点多态性与非霍奇金淋巴瘤发病无关。

蓝藤益髓汤对化疗后骨髓抑制的影响

目的:观察蓝藤益髓汤对化疗造成的骨髓抑制的影响,并探讨其作用机制。方法:将60例符合纳入标准(西医经病理学或细胞学证实为肿瘤;中医证候诊断为气血两虚证)的患者,随机分为蓝藤益髓汤+化疗(小细胞肺癌用EP方案,非小细胞肺癌用CAP方案,乳腺癌用CMF方案,胃癌、肠癌用PLF方案)治疗组和鲨肝醇+化疗对照组,观察蓝藤益髓汤在恢复骨髓三系造血、调节免疫功能、改善临床症状等方面的疗效。结果:治疗组WBC的下降明显低于对照组,P<0.01。治疗组Hb、PLT的恢复明显好于对照组,P<0.05。治疗组治疗后临床主症改善方面存在明显优势,P<0.05,肿瘤患者体力和生活质量的改善明显高于对照组。治疗组能有效恢复患者的免疫功能,并有一定的抗肿瘤作用。结论:蓝藤益髓汤可部分拮抗化疗的骨髓抑制不良反应。