维生素C对染Cr(Ⅵ)小鼠肠道菌群紊乱的影响

[背景]六价铬[Cr(Ⅵ)]暴露能引起肠道菌群结构紊乱,造成功能损伤。维生素C(VC)是人体必需的微量营养素之一,在促进肠道益生菌生长,改善肠道屏障,维持肠道菌群稳态中起重要作用。而VC对Cr(Ⅵ)暴露致肠道菌群紊乱的调节作用还有待研究。[目的]探讨VC对Cr(Ⅵ)暴露导致小鼠肠道菌群紊乱的影响。[方法]32只SPF级C57BL/6小鼠适应性喂养3 d后,随机分为正常对照组(Con组)、VC组、重铬酸钾(K_(2)Cr_(2)O_(7))组[Cr(Ⅵ)组]和VC+K_(2)Cr_(2)O_(7)组[VC+Cr(Ⅵ)组]。于第4天早8:00,Con组小鼠灌胃给予双蒸水,腹腔注射双蒸水;VC组小鼠灌胃给予VC,腹腔注射双蒸水;Cr(Ⅵ)组小鼠灌胃给予双蒸水,腹腔注射K_(2)Cr_(2)O_(7)溶液;VC+Cr(Ⅵ)组小鼠灌胃给予VC,腹腔注射K_(2)Cr_(2)O_(7)溶液。VC给药量为200 mg·kg^(-1),K_(2)Cr_(2)O_(7)给药量为1.25 mg·kg^(-1),连续处理45 d后处死小鼠,取结肠内容物于无菌冻存管中,每组收集3个重复样本。标记好后立即投入液氮中迅速冷冻。待所有样本收集完成后,转移至-80℃超低温冰箱中保存。结肠内容物样本通过高通量测序及生物信息学软件分析肠道菌群结构。[结果]与Con组相比,Cr(Ⅵ)暴露导致小鼠体重增加值减少。小鼠回肠组织发生病理改变,Cr(Ⅵ)组有明显炎症细胞浸润,VC+Cr(Ⅵ)组炎症细胞浸润减少。Cr(Ⅵ)组小鼠肠道菌群分类操作单元(OTU)数目改变。α多样性分析中,Cr(Ⅵ)暴露组Sobs指数平均为240.333±67.796,Chao指数为258.173±64.813,Ace指数为259.481±66.891,较Con组降低(P<0.05),PD whole tree指数为27.863±2.399,较Con组升高(P<0.05),VC干预可改善Cr(Ⅵ)暴露导致上述指标的变化(P<0.05)。β多样性分析中,主坐标分析结果表明Cr(Ⅵ)组和Con组之间有明显分离,VC干预后,分离趋势有回调,差异减小。多样本相似性树状图结果显示正常对照组和VC组最先聚类在一起,然后与VC+Cr(Ⅵ)组聚成一类,最后再与Cr(Ⅵ)组聚成一类。Cr(Ⅵ)组小鼠肠道中的拟杆菌门、单糖菌门和软壁菌门丰度降低,厚壁菌门丰度升高;乳杆菌属、另枝菌属、拟杆菌属和瘤胃梭菌属丰度升高,其中拟杆菌属与Con组小鼠相比,丰度升高有统计学意义(P<0.05);而经VC干预后,上述肠道微生物中菌门及菌属的丰度变化均有所改善。[结论]Cr(Ⅵ)暴露可导致小鼠肠道损伤及菌群结构紊乱,而VC干预可在一定程度上改善上述变化,使肠道菌群结构趋向正常。

红景天苷对PM_(2.5)暴露小鼠肠道微生物的调节作用

[背景]红景天苷(SAL)对多器官系统具有保护作用。大气细颗粒物(PM_(2.5))暴露可造成肠道微生物紊乱,损害肠道健康。SAL对PM_(2.5)暴露小鼠肠道微生物的调节作用有待深入研究。[目的]探讨PM_(2.5)对小鼠肠道菌群的影响及SAL的作用。[方法]40只6~8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分成4组,每组10只,即对照组、SAL组、PM_(2.5)组、SAL+PM_(2.5)组。SAL组、SAL+PM_(2.5)组SAL灌胃(60 mg·kg^(–1)),对照组、PM_(2.5)组无菌生理盐水灌胃(10 mL·kg^(–1));PM_(2.5)组、SAL+PM_(2.5)组PM_(2.5)悬液气管滴注(8 mg·kg^(–1)),对照组、SAL组无菌生理盐水气管滴注(1.5 mL·kg^(–1))。2 d为1个实验周期,共进行10个周期,持续20 d。苏木素-伊红染色观察小鼠回肠组织病理变化。采集结肠内容物用于肠道微生物测序与短链脂肪酸(SCFAs)测定。[结果]PM_(2.5)组回肠组织炎症细胞浸润,SAL+PM_(2.5)组仅有少量炎症细胞浸润。与对照组相比,PM_(2.5)组Shannon降低(P<0.05),Simpson升高(P<0.05),该组肠道菌群多样性下降;SAL+PM_(2.5)组Shannon较PM_(2.5)组升高(P<0.05),Simpson降低(P<0.05),经SAL干预的小鼠肠道菌群多样性上升。主坐标分析结果显示PM_(2.5)暴露组与对照组之间出现明显分离,对照组、SAL组与SAL+PM_(2.5)组之间分离趋势不明显。非加权组平均法(UPGMA)聚类树结果显示对照组与SAL组最先被聚类在一起,两组再与SAL+PM_(2.5)组聚类,最后三组与PM_(2.5)组聚类。PCoA分析与UPGMA聚类结果均表示,PM_(2.5)组均匀度与相似性显著降低。与对照组相比,PM_(2.5)组拟杆菌门、Candidatus_Saccharimonas丰度降低(P<0.05),变形菌门、埃希氏菌属、拟杆菌属、普罗菲登斯菌属、肠球菌属与变形杆菌属丰度升高(P<0.05)。与PM_(2.5)组相比,SAL+PM_(2.5)组变形菌门、放线菌门、普罗菲登斯菌属、变形杆菌属丰度降低(P<0.05),Candidatus_Saccharimonas相对丰度显著升高(P<0.05)。PM_(2.5)组丙酸、戊酸、己酸的含量较对照组降低(P<0.05),SAL+PM_(2.5)组丙酸、异丁酸、丁酸、戊酸、己酸的含量较PM_(2.5)组升高(P<0.05)。[结论]呼吸道PM_(2.5)暴露可引起小鼠肠组织病理改变、肠道微生物紊乱以及SCFAs的变化,而SAL能够在一定程度上起到保护作用。

齐墩果酸对氯化汞诱导L02肝细胞损伤的保护作用

目的在明确HgCl_(2)诱导L02肝细胞损伤的基础上,探讨齐墩果酸(oleanolic acid, OA)的保护作用。方法 L02细胞按照处理方式不同分为:对照组、齐墩果酸组(OA,10μmol/L)、HgCl_(2)组(HgCl_(2),40μmol/L)及齐墩果酸+HgCl_(2)组(OA+HgCl_(2)),对照组给予无血清培养基,OA组给予OA溶液预处理8 h, HgCl_(2)组暴露于HgCl_(2)溶液6 h, OA+HgCl_(2)组先给予OA溶液处理8 h,再暴露于HgCl_(2)溶液6 h。采用MTT检测细胞活力;激光共聚焦检测JC-1探针荧光强度以确定线粒体膜电位;DCFH-DA荧光探针结合流式细胞仪检测细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平;Annexin V/PI双染法结合流式细胞仪测定细胞凋亡率;过氧化氢酶(catalase, CAT)、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase, T-SOD)、谷胱甘肽(glutathione, GSH)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、Caspase 3和Casepase 9试剂盒结合酶标仪测定其活力及含量水平。结果与对照组相比,40μmol/L HgCl_(2)可导致细胞活力降至0.52±0.03(P<0.05),OA预处理可显著改善HgCl_(2)诱导的细胞活力降低,活力水平为0.86±0.05,较HgCl_(2)组显著升高(P<0.05);线粒体膜电位检测结果显示细胞暴露于40μmol/L HgCl_(2),红色荧光强度较对照组显著减弱,红绿荧光比值为0.23±0.02(P<0.05),OA预处理可明显增加红色荧光,红绿荧光比值为1.32±0.08,较HgCl_(2)组显著增加(P<0.05);细胞暴露于40μmo/L HgCl_(2),其ROS相对荧光强度为1.21±0.07,细胞凋亡率可达8%左右,Casepase 3及Casepase 9的活力水平分别为3.11±0.20、2.94±0.17,均较对照组显著升高(P<0.05),OA预处理可明显缓解上述指标的变化,与HgCl_(2)组相比,差异有统计学意义(P<0.05);40μmo/L HgCl_(2)处理组,T-SOD水平为(7.68±0.39)U/mL,显著低于对照组(P<0.05),MDA水平为(4.99±0.26)nmol/mg,较对照组显著升高(P<0.05);OA预处理组,T-SOD水平为(13.97±0.71)U/mL,显著高于HgCl_(2)组(P<0.05),MDA水平较HgCl_(2)组显著降低,为(3.01±0.17)nmol/mg(P<0.05)。结论一定浓度HgCl_(2)可诱导肝细胞受损,OA预处理可能通过改善细胞的氧化应激状态减轻细胞损伤。

硒对PM_(2.5)诱导大鼠心肌酶谱变化的影响

目的探讨PM_(2.5)诱导的心肌损伤及硒的保护作用。方法健康清洁级雄性SD大鼠32只,随机分为4组,对照组、PM_(2.5)组、硒组及硒+PM_(2.5)组。分别灌胃给予生理盐水1 ml,或亚硒酸钠溶液35μg/kg·bw后,利用定量雾化器给予1.5 ml生理盐水或140.16μg/ml PM_(2.5)悬液,连续30 d,禁食过夜后,麻醉取血及心脏组织,利用相关试剂盒检测相应指标。结果大鼠暴露PM_(2.5)后,体重增加值较对照组少,硒预处理有所改善;大鼠暴露PM_(2.5),其心肌组织中谷光甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及总超氧化物歧化酶(T-SOD)水平较对照组明显降低(P<0.05),丙二醛(MDA)水平较对照组明显增加(P<0.05),硒预处理后,GSH-Px水平较PM_(2.5)组明显升高(P<0.05),MDA水平较PM_(2.5)组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);PM_(2.5)可使大鼠心肌组织中一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)活力水平明显升高(P<0.05),硒预处理可明显降低NO含量及NOS活力水平(P<0.05);PM_(2.5)染毒组大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)及心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平明显升高(P<0.05),硒预处理可明显降低这些指标的水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠暴露一定剂量PM_(2.5)可导致心脏受损,一定剂量硒的干预可在一定程度上起到缓解作用。

西北地区典型城市PM_(2.5)中重金属污染特征及健康风险评价

目的了解西北地区4个典型城市PM_(2.5)中7种重金属元素的污染特征,评价PM_(2.5)中重金属对人群的健康风险。方法选取乌鲁木齐、西安、兰州和银川市作为西北地区的典型城市,收集PM_(2.5)中重金属浓度的文献作为数据来源,分析重金属的污染特征,采用健康风险评价模型对4个城市不同人群的健康风险进行评价。结果重金属元素的浓度水平存在地区差异,7种元素中Zn在4个城市中的浓度均为最高,As和Cr(VI)在4个城市中的年均值均高于参考限值,且As和Cr(VI)在西安市的浓度最高;Cd元素仅在乌鲁木齐市的年均值高于参考限值;4个城市的非致癌风险以Pb为主,但危险指数HI(hazard index)值均小于1,西安市的HI值最高;4个城市致癌风险以As为主,乌鲁木齐市As和Cr(VI)的终生致癌风险LCR(lifetime cancer risk)值均接近10^(-4),西安市As和Cr(VI)的LCR值均大于10^(-4),2个城市的终生总致癌风险ILCR(integrated lifetime cancer risk)值均超过阈值水平,其中西安市的ILCR值最高,而兰州和银川市的ILCR值均低于阈值水平。结论在纳入研究的4个城市中,西安市的致癌和非致癌风险均为最高,重金属污染最严重;乌鲁木齐市重金属污染也应受到重视,而兰州和银川市重金属的健康风险在人群可接受的范围内。

空气细颗粒物诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤

目的探讨空气细颗粒物(fine particulate matter,PM_(2.5))导致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN)损伤及相关机制。方法采集潍坊市2020年大气中的PM_(2.5),用细胞培养液配成颗粒物混悬液。RLE-6TN细胞暴露于不同浓度(25、50、100、200和400μg/mL)颗粒物混悬液24 h,倒置显微镜观察细胞形态变化,用噻唑蓝法测定细胞活力;微板法测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)浓度;采用DCFH-DA、Annexin V-FITC/PI、JC-1探针法结合激光共聚焦检测荧光强度以确定细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)、细胞凋亡、线粒体膜电位水平;比色法测定细胞内总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和活性;Caspase-3和Caspase-9试剂盒结合酶标仪检测细胞凋亡蛋白相对表达活力。采用单因素方差分析和皮尔逊相关分析比较各结果差异和相关性。结果PM_(2.5)可导致RLE-6TN细胞形态发生改变,细胞间隙变大,细胞活力降低,与对照组相比,各剂量组差异均有统计学意义(P<0.05)。≥50μg/mL染毒组上清液中LDH浓度升高,其LDH浓度≥(377.82±29.84),与对照组(278.51±23.76)相比差异均有统计学意义(P<0.05)。激光共聚焦检测细胞活性氧结果显示,≥50μg/mL染毒组细胞内绿色荧光逐渐增强,其相对荧光强度≥(2.77±0.18),与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);细胞凋亡水平升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);细胞线粒体膜电位水平逐渐降低,≥25μg/mL染毒组线粒体膜电位水平≤(4.22±0.45),与对照组(6.16±0.49)相比差异有统计学意义(P<0.05)。PM_(2.5)可导致细胞T-SOD和GSH水平降低,≥50μg/mL染毒组细胞T-SOD和GSH水平分别≤(14.67±0.49)和≤(433.29±39.24),与对照组[(16.58±0.60)和(542.90±45.06)]相比显著降低(P<0.05),MDA水平随着PM_(2.5)浓度升高而上升,与对照组(1.15±0.19)相比,≥50μg/mL染毒组MDA水平≥(1.72±0.13),差异均有统计学意义(P<0.05)。≥100μg/mL染毒组细胞Caspase-3和Caspase-9活性水平升高,其活性水平分别≥(1.62±0.27)和≥(1.23±0.06),与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论一定浓度PM_(2.5)暴露可诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞发生氧化应激,膜电位降低,最终导致细胞凋亡。

维生素C对氯化镉致小鼠肾损伤的保护作用

目的 探讨氯化镉(cadmium chloride, CdCl_(2))染毒诱导小鼠肾损伤及维生素C(vitamin C, VC)的保护作用。方法 将40只健康清洁级雄性昆明小鼠随机分为4组,分别为对照组(双蒸水灌胃、腹腔注射),VC组(200 mg/kg VC灌胃,双蒸水腹腔注射),CdCl_(2)组(双蒸水灌胃,2 mg/kg CdCl_(2)腹腔注射),VC+CdCl_(2)组(200 mg/kg VC灌胃,2 mg/kg CdCl_(2)腹腔注射)。染毒30 d。最后一次给药24 h后,摘眼球取血,立刻取出肾组织称重,计算肾脏系数,快速分离肾细胞。利用DCFH-DA试剂盒及流氏细胞仪检测活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平;利用血尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)、血清肌酐(serum creatinine, Scr)、β2微球蛋白(β2-microglobumin,β2-MG)、胱抑素C(cystatin C,Cys C)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、Caspase3、Caspase9试剂盒分别检测相应指标;石墨炉原子吸收法检测血清、肾组织中Cd、Zn含量。结果 CdCl_(2)组小鼠肾脏系数为1.36±0.10,BUN、Scr、β2-MG水平分别为(19.34±0.63)mmol/L、(61.30±2.04)mmol/L和(1.02±0.10)g/mL,均高于对照组和VC组(P<0.05)。VC+CdCl_(2)组上述4项指标分别为1.09±0.10、(9.65±0.50)mmol/L、(41.85±1.27)mmol/L和(0.61±0.01)g/mL,均低于CdCl_(2)组(P<0.05)。CdCl_(2)染毒导致肾小球轮廓不清,肾小管肿胀,间质充血,管腔内有脱落上皮细胞,VC预处理可改善上述变化。CdCl_(2)组小鼠血清、肾组织Cd水平分别为(4.36±0.07)μg/L和(18.63±1.95)μg/g,显著高于对照组、VC组(P<0.05),VC+CdCl_(2)组分别为(2.12±0.06)μg/L和(2.18±0.09)μg/g,低于CdCl_(2)组(P<0.05)。CdCl_(2)组小鼠血清Zn水平为(11.35±1.03)μg/L,低于对照组(P<0.05),VC+CdCl_(2)组血清Zn^(2+)水平为(26.98±3.13)μg/L,高于CdCl组(P<0.05)。CdCl_(2)组小鼠肾组织ROS、MDA、Caspase3及Caspase9水平分别为(1.86±0.13)、(4.78±0.15)nmol/mg、1.50±0.24、1.69±0.17,高于对照组(P<0.05),GSH-Px水平为(261.3±23.36)U/mg,低于对照组(P<0.05);与CdCl_(2)组相比,VC+CdCl_(2)组肾组织ROS、MDA、Caspase3及Caspase9水平降低,GSH-Px水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CdCl_(2)染毒可导致机体氧化应激,肾小球、肾小管受损,锌离子稳态失衡,肾功能受损,VC预处理可在一定程度上减轻CdCl引起的损伤。

红景天苷对PM_(2.5)诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤及凋亡的影响

目的探讨红景天苷(salidroside,SAL)对大气细颗粒物(fine particulate matter,PM_(2.5))导致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE⁃6TN)损伤及凋亡的保护机制。方法梯度浓度SAL预处理细胞24 h,加入PM_(2.5)染毒24 h,实验分为6组:0组(无血清培养基),SAL组(160μmol/L SAL),PM_(2.5)组(50μg/ml的PM_(2.5)溶液),40μmol/L+PM_(2.5)组(40μmol/L SAL+50μg/ml PM_(2.5)),80μmol/L+PM_(2.5)组(80μmol/L SAL+50μg/ml PM_(2.5)),160μmol/L+PM_(2.5)组(160μmol/L SAL+50μg/ml PM_(2.5))。倒置显微镜观察细胞形态变化,噻唑蓝法测定细胞活力;试剂盒结合酶标仪测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平,细胞内总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T⁃SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;采用DCFH⁃DA、Annexin V⁃FITC/PI和JC⁃1探针法结合激光共聚焦检测荧光强度以确定细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)、细胞凋亡和线粒体膜电位水平;Western blot检测细胞内Bcl⁃2、p53、BAX、Fas、FADD、Cytochrome c、Caspase⁃3和Caspase⁃9蛋白表达。结果PM_(2.5)组细胞形态变圆,细胞间隙变大,各SAL+PM_(2.5)组形态有所好转,与0组相比,细胞活力降低(P<0.05),LDH和MDA水平升高(P<0.05),T⁃SOD和GSH活力下降(P<0.05),ROS、凋亡水平升高(P<0.05),线粒体膜电位下降(P<0.05),胞内p53、BAX、Fas、FADD、Cytochrome c、Caspase⁃3和Caspase⁃9表达提高,Bcl⁃2下降(P<0.05)。与PM_(2.5)组相比,160μmol/L+PM_(2.5)组细胞活力好转(P<0.05),80~160μmol/L+PM_(2.5)组LDH水平下降,GSH活力提高(P<0.05),160μmol/L+PM_(2.5)组MDA水平下降,SOD活力提高(P<0.05),160μmol/L+PM_(2.5)组ROS、凋亡水平均明显下降(P<0.05),线粒体膜电位上升(P<0.05),80~160μmol/L+PM_(2.5)组p53、BAX、Fas、FADD、Cytochrome c和Caspase⁃3蛋白表达均下降(P<0.05),160μmol/L+PM_(2.5)组Caspase⁃9表达下降(P<0.05),160μmol/L+PM_(2.5)组Bcl⁃2表达明显提升(P<0.05)。结论50μg/ml PM_(2.5)暴露可诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤,引起氧化应激和凋亡,40~160μmol/L SAL均有不同程度的保护作用,具体机制可能是通过影响大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞内p53/BAX/Bcl⁃2和Fas/FADD通路来实现的。

齐墩果酸对氯化汞急性暴露致肝损伤的保护作用及可能机制

[背景]氯化汞(HgCl_(2))急性暴露会导致肝损伤。齐墩果酸(OA)作为一种保肝药物,对HgCl_(2)急性暴露引起肝损伤的保护作用及相关机制尚不明确。[目的]探讨急性HgCl_(2)暴露导致小鼠肝损伤及OA的保护作用及可能机制。40只SPF级C57BL/6雄性小鼠,按照体重随机分为4组,每组10只。分别为对照组、OA组(300 mg·kg^(-1))、HgCl_(2)组(5 mg·kg^(-1))、OA+HgCl_(2)组(300 mg·kg^(-1)OA+5 mg·kg^(-1)HgCl_(2))。连续灌胃豆油、OA溶液两次,一天一次,于第2次灌胃2 h后,腹腔注射HgCl_(2)溶液,观察48 h后处死小鼠。收集小鼠血清和肝脏,计算肝脏系数,采用苏木素-伊红(HE)染色及普鲁士蓝染色观察肝脏结构变化及铁沉积状况。利用丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、组织铁含量试剂盒分别检测相应指标。采用Western blotting法检测小鼠肝脏核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)、转铁蛋白受体1(TFR1)和溶质载体家族7成员11(SLC7A11)等蛋白的相对表达量。[结果]HgCl_(2)组小鼠AST、ALT水平分别为(76.447±9.695)U·g^(-1)、(98.563±24.673)U·g^(-1),均高于对照组(P<0.05)。OA预处理后,肝脏系数及上述指标分别降低至(4.769±0.237)%、(57.086±10.087)U·g^(-1)、(87.294±27.181)U·g^(-1),肝脏系数、AST水平与HgCl_(2)组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。HgCl_(2)急性暴露后,小鼠肝细胞排列紊乱,并伴有炎性浸润,肝组织普鲁士蓝染色出现阳性蓝染颗粒;OA预处理后,肝组织上述变化得到改善。HgCl_(2)组肝组织铁含量为(3.646±0.238)μmol·g^(-1),高于对照组的(2.948±0.308)μmol·g^(-1);OA预处理后,铁含量降低至(3.429±0.415)μmol·g^(-1)。与对照组相比,HgCl_(2)急性暴露可导致肝组织GSH、T-SOD水平降低,Nrf2、HO-1、SLC7A11、Gpx4蛋白表达水平降低,MDA水平升高,TFR1蛋白表达水平升高(P<0.05);OA预处理后,各指标均有一定幅度的改善,其中GSH水平升高,MDA水平降低,Nrf2、HO-1、SLC7A11蛋白表达水平升高,TFR1蛋白表达水平降低,与HgCl_(2)组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]急性HgCl_(2)暴露导致小鼠肝损伤,其机制可能涉及铁超载及铁死亡;OA可在一定程度上影响铁超载及铁死亡相关蛋白表达,减轻HgCl_(2)暴露导致的肝损伤。

肺纤维化信号通路的研究进展

肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)是一种原因未明的弥漫性纤维化疾病,主要表现为机体受刺激后激活炎症反应、氧化应激、上皮间充质转化(epithelial⁃mesenchymal transition,EMT)等多重途径,使上皮细胞受到破坏,异常的Ⅱ型肺泡上皮细胞、间充质干细胞等细胞释放促纤维化机制,形成纤维化微环境,激活受累的肺成纤维细胞,逐渐向肌成纤维细胞转化,引起纤维化介质和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)生成进一步加重,逐步形成PF[1]。

齐墩果酸对氯化汞急性暴露致小鼠肾损伤的拮抗作用

目的探讨急性氯化汞暴露导致小鼠肾损伤及齐墩果酸(oleanolic acid,OA)的拮抗作用。方法将40只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为4组,即对照组、齐墩果酸组、氯化汞组和齐墩果酸+氯化汞组,每组10只。齐墩果酸组及齐墩果酸+氯化汞组灌胃给予300 mg/kg齐墩果酸溶液,染毒容量为10 ml/kg,每天1次,连续2 d,对照组和氯化汞组灌胃豆油;末次灌胃2 h后,氯化汞组和齐墩果酸+氯化汞组腹腔一次性注射染毒5 mg/kg氯化汞溶液,染毒容量为10 ml/kg,对照组和齐墩果酸组腹腔注射生理盐水。染毒结束48 h后,测定血尿素氮(BUN)和血清肌酐(Scr)、还原型谷胱甘肽(GSH)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)及肾组织铁含量水平。采用蛋白印迹(Western blot)法检测肾脏组织转铁蛋白受体1(TFR1)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白的相对表达量。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测小鼠肾脏组织核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)和超氧化物歧化酶(SOD1)mRNA的相对表达量。结果与对照组相比,氯化汞组小鼠肾组织中铁含量升高,差异有统计学意义(P<0.05);而血清中BUN、Scr水平变化不明显。与氯化汞组相比,齐墩果酸+氯化汞组小鼠肾组织中铁含量减少,差异有统计学意义(P<0.05);而血清中BUN和Scr水平变化亦不明显。与对照组相比,氯化汞组小鼠肾组织中GSH水平略有降低(P>0.05),T-SOD水平明显降低(P<0.05),而MDA水平明显升高(P<0.05)。与氯化汞组相比,齐墩果酸+氯化汞组小鼠肾组织中GSH、T-SOD水平均升高,而MDA水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,氯化汞组小鼠肾组织Nrf2mRNA的表达水平略有降低(P>0.05),HO-1 mRNA的表达水平明显降低(P<0.05),SOD1 m RNA表达水平明显升高(P<0.05)。与氯化汞组相比,齐墩果酸+氯化汞组小鼠肾组织Nrf2 mRNA的表达水平略有升高(P>0.05),HO-1 mRNA的表达水平明显升高(P<0.05),SOD1 mRNA表达水平略有降低(P>0.05)。与对照组相比,氯化汞组小鼠肾组织TFR1蛋白的表达水平升高,而SLC7A11和GPX4蛋白的表达水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与氯化汞组相比,齐墩果酸+氯化汞组小鼠肾组织TFR1蛋白的表达水平较低,而SLC7A11和GPX4蛋白的表达水平均较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论急性氯化汞暴露导致小鼠肾损伤,其机制可能涉及铁超载及铁死亡;齐墩果酸可在一定程度上影响铁超载及铁死亡相关蛋白表达,减轻氯化汞暴露导致的肾损伤。