三羟基异黄酮对转染APP695基因PC12细胞凋亡和功能的影响

目的以APP695MT基因转染PC12细胞为细胞模型,研究三羟基异黄酮(GST)对模型细胞凋亡和功能的影响。方法用pIRES2-EGFP空载体和pIRES2-EGFP/APP695MT表达载体转染正常的PC12细胞,将细胞分为对照组、APP695转染组、GST干预组。应用激光共聚焦显微技术检测PC12细胞凋亡率,荧光分析法测定儿茶酚胺类(CA)分泌量。结果 APP695转染组与对照组比较,PC12细胞凋亡率明显升高(P<0.01),CA分泌量明显降低(P<0.01);GST干预组与APP695转染组比较细胞凋亡率降低(P<0.01),CA分泌量均明显增加(P<0.01)。结论 GST可降低APP695MT基因转染引起的PC12细胞凋亡率,同时也可提高CA的分泌量,对转染细胞有一定的保护作用,并能改善其生理功能。

GST对转染APP695基因PC12细胞形态和增殖能力的影响

目的:观察APP695MT基因转染对PC12细胞形态和增殖能力的影响及植物雌激素三羟基异黄酮(Genistein,GST)的干预作用,初步探讨GST对表达APP695MT基因PC12细胞的保护作用。方法:以pIRES2-EGFP空载体和pIRES2-EGFP/APP695MT表达载体转染正常PC12细胞,电镜观察各组细胞形态学改变,细胞计数方法检测各组细胞增殖能力差异。结果:电镜下观察可见正常对照组与空载组细胞形态无差异,细胞形态结构正常,无明显病理改变;APP695转染组细胞胞体肿胀,线粒体髓样变和空泡样变,胞核扭曲凹陷,异染色质边集;GST干预组较APP695转染组细胞形态明显改善,线粒体髓样变和空泡样变明显减少,胞核凹陷明显减轻。细胞计数结果显示,在各细胞计数时间点,与正常对照组比较,空载组细胞数目无显著变化(P>0.05),APP695转染组PC12细胞数目减少(P(0.01),细胞生长增殖能力明显受到抑制;GST各剂量处理组与APP695转染组比较细胞生长增殖能力均有不同程度的增强(P(0.01)。结论:GST能改善突变型APP695基因转染引起的PC12细胞病理变化,并提高其增殖能力,对转染细胞有一定的保护作用。

Genistein对APP695转染PC12细胞凋亡的保护作用

目的观察Genistein(GST)对APP695转染PC12细胞凋亡的保护作用。方法将培养的PC12细胞分为正常对照组、APP695转染组、GST干预组。采用流式细胞术检测PC12细胞凋亡率。结果 APP695转染组与正常对照组比较,PC12细胞存活率明显降低,凋亡率明显升高(P<0.01)。GST干预组与APP695转染组比较,细胞存活率显著升高,凋亡率显著降低,其中1μmol/L GST组与APP695转染组比较,细胞凋亡率降低(P<0.05),5μmol/L GST组较APP695转染组细胞凋亡率则明显降低(P<0.01)。结论 GST对APP695基因转染引起的PC12细胞损伤有一定的保护作用。

GST对转染APP695基因PC12细胞β淀粉样蛋白表达和形态功能的影响

目的:观察三羟基异黄酮(Genistein,GST)对APP695转染PC12细胞β淀粉样蛋白(Aβ)表达和形态功能的影响。方法:用pIRES2-EGFP空载体和pIRES2-EGFP/APP695MT表达载体转染正常的PC12细胞,神经生长因子(nerve growth factor,NGF)诱导PC12细胞72 h后,放射免疫法测定Aβ的变化,激光共聚焦显微镜观察细胞形态学的变化,荧光分析法测定儿茶酚胺类(CA)分泌量。结果:APP695转染组与对照组比较Aβ生成量明显增加(P<0.01),细胞突起数量少、突起长度较短,CA分泌量明显降低(P<0.01);GST干预组与APP695转染组比较Aβ生成量减少(P<0.05),细胞突起数量增多、突起较长,CA分泌量明显增加(P<0.01)。结论:GST能减少APP695基因转染引起的PC12细胞Aβ的表达,改善细胞分化程度,提高CA的分泌量,对转染PC12细胞具有一定的保护作用。

Genistein对APP695基因转染PCI2细胞Caspase-3表达的影响

目的利用APP695MT基因转染PCI2细胞为细胞模型，观察植物雌激素三羟基异黄酮（GST）对PCI2细胞中Caspase-3表达的影响，初步探讨GST对表达APP695MT基因PCI2细胞的保护作用及其相关机制。方法将培养的PCI2细胞分为正常对照组、APP695转染组、GST干预组，免疫细胞化学SABC法检测凋亡相关蛋白Caspase-3在不同处理组PCI2细胞中的表达变化。，结果正常纽及空载组Pc12细胞Caspase-3阳性表达非常弱；与正常对照组比较，APP695转染组PCI2细胞Caspase-3为强阳性表达（P〈0.01）；GST干预组与APP695转染组比较．Caspase-3的免疫反应产物明显减弱（P〈0．01），且15Ixmol／L和201xmol／LGST处理组与5txmol／L和10gmol／LGST处理组比较，Caspase-3的免疫反应产物减弱更明显（P〈0．01）。结论APP695基因转染的PCI2细胞中凋亡蛋白Caspase-3的表达明显增强，GST的干预能显著降低其表达，对神经细胞产生保护作用。