2012年广东省潮州市中心医院细菌耐药性监测

目的了解广东省潮州市中心医院2012年临床分离菌株对常用抗菌药物的耐药性。方法采用WHONET5.6软件对2012年临床分离株进行药敏分析。结果 2012年该院住院患者标本中分离出细菌2 127株,其中革兰阳性菌686株,占32.3%,革兰阴性菌1 441株,占67.7%。大肠埃希菌、金葡菌、克雷伯菌属、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎链球菌、不动杆菌属、卡他莫拉菌、肠球菌属和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS),分别占15.3%、13.2%、11.0%、10.0%、9.0%、7.0%、5.8%、4.1%、3.4%和2.7%。药敏试验结果显示,大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs阳性率分别为50.3%(164/326)和31.6%(74/234),未发现耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌科细菌。不动杆菌属对碳青霉烯类抗生素耐药率为48.8%(60/123)。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别18.8%(36/192)和10.9%(21/192)。金葡菌和CNS中甲氧西林耐药株(MRSA和MRCNS)分别占64.0%(180/281)和72.4%(42/58)。青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)检出率为5.4%(8/148)。流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌产β内酰胺酶阳性率分别为9.9%(21/212)和99.7%(85/87)。结论定期进行细菌耐药性监测有助于了解医院细菌耐药性的变迁,为临床经验用药提供依据,对加强抗菌药物合理应用的监督和管理起到积极的作用。

潮州地区高危型人乳头瘤病毒载量与宫颈病变的关系

目的探讨高危型人乳头瘤病毒(high risk human papillomavirus,HR-HPV)载量与宫颈病变级别之间的关系。方法采用RT-PCR对农村35～60岁女性进行HR-HPV DNA定量检测并记录CT值,2 731例阳性者再进行核酸分子快速导流杂交分型技术(HybriMax)和液基薄层细胞学(thinprep liquid-based cytologic test,LCT)检查;对低级别鳞状上皮内病变(low grade squa-mous intraepithelial lesion,LSIL)及以上病变行阴道镜下组织病理学活检。根据LCT及病理活检结果按病变级别分成5组:无上皮内瘤变或恶性病变(non-squamous intraepithelial lesion or neoplasia,NILM)、未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞(atypi-cal squamous cells of undetermined significance,ASCUS)、LSIL、高级别鳞状上皮内病变(high grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)和鳞状细胞癌(squamous cell cacinoma,SCC)。在同级别宫颈病变中,按照HPV感染的类型分为4组:HPV52、HPV16、HPV58和多重HPV感染。采用方差分析的方法对各组平均CT值进行统计分析。结果随宫颈病变级别的升高,CT均值降低,5组CT均值间差异均具有显著性(P<0.05)。在同级别宫颈病变中,NILM组HPV58和多重HPV差异有显著性(P<0.05),ASCUS组HPV16和多重HPV差异有显著性,其余病变级别各HPV感染组间差异均无显著性(P>0.05)。结论 HR-HPV载量与宫颈病变级别呈正相关,高HR-HPV载量是影响宫颈病变级别的危险因素。

潮州地区人乳头瘤病毒型别分布特征分析

目的研究潮州地区人乳头瘤病毒(HPV)感染率及型别分布特征,确定本地区的优势型别。方法采用实时荧光定量PCR和核酸分子快速导流杂交分型技术(HybriMax)对49458名参加新农村合作医疗"宫颈癌筛查项目"的妇女进行HR-HPV检测及分型来筛查宫颈癌。结果潮州地区妇女HR-HPV感染率为8.25%,15种高危亚型(HR-HPV)阳性率94.49%,6种低危亚型(LR-HPV)阳性率5.51%,感染率最高亚型是HPV52(28.86%),其次为16、58、68、33和18型,均为HR-HPV。LR-HPVCP8304感染率是4.71%。结论本地区人群感染HPV优势型别为HPV52。

潮州地区人乳头瘤病毒52型E6多态性分析

目的:明确潮州地区人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)52型E6编码区的基因多态性。方法:提取101例HPV 52单纯感染者宫颈脱落细胞DNA,通过特异性引物扩增HPV 52-E6编码区全序列,成功获得83份HPV 52-E6 PCR扩增阳性产物,进行测序及BLAST多态性分析。结果:成功获得76条HPV 52-E6基因全序列(447 bp)。该序列与参考株(GQ472848)的一致性为99%。在潮州地区发现11种E6编码区多态性,9种为同义突变,2种有义突变,引起所编码氨基酸改变。根据基因多态性分亚洲群和欧美群2群。亚洲群有7组,第1组,也是最为常见组(50/76)的编码序列与广州(EU924143)和香港(DQ057293)株编码完全匹配,该组称为潮州地方株;第2组(12/76)多态性与广州(EU924144)等报道的E6全序列完全匹配;第3组(仅1例)多态性与浙江大学报道(HM004117)的E6全序列完全匹配;其余4组多态性国际上尚未报道。欧美群有3组,第1组(5/76)多态性与美国(HQ537745)报道的E6全序列完全匹配;第2组(2例)多态性与美国(DQ057291)和德国(X74481)报道的E6全序列完全匹配;第3组(1例)多态性国际上尚未报道。结论:潮州地区HPV 52-E6编码区序列存在多态性,以中国东南部和东南亚国家报道E6编码区序列为主,少数与欧美报道E6全序列完全匹配。为基因疫苗的研制提供了科学依据。

潮州地区女性宫颈人乳头状瘤病毒基因型与宫颈病变的关系

目的了解潮州地区女性宫颈人乳头瘤病毒（HPV）感染型别分布特征及其与宫颈病变关系。方法采用核酸分子快速导流杂交分型技术（HybriMax）对2166例门诊女性患者宫颈脱落细胞进行HPV基因分型以及对部分高危型HPV阳性妇女进行液基薄层细胞学检测（LCT）。结果潮州地区2166例门诊女性患者中有490例为HPV阳性，感染率为22．62％；15种高危亚型HPV（HR-HPV）感染率为15．05％；6种低危亚型HPV（LR-HPV）感染率为4．29％；高／低危亚型HPV混合感染率为3．28％。72．45％的HPV阳性患者是单-亚型感染。阳性率最高的HPV亚型是HR-HPV52（22．24％），其次为HR．HPV16（20．20％）和LR-HPV11（14．90％）。36-45岁年龄段女性的阳性率最高，为31．84％。223例HR-HPV阳性患者接受LCT检查，144例为无上皮内病变及恶性病变（NILM），细胞学检查阴性率为64．57％（144／223）；以非典型鳞状卧瞠盹意义不明确（ASC-US）及以晰拗阻陛，阻懒35．43％（79／223）。在阳性病变中ASC．US占22．42％（50／223），非典型鳞状上皮细胞不除外高级别鳞状上皮内病变（ASC-H）占1．79％（4／223），低级别鳞状上皮内病变（LSIL）占8．07％（18／223），高级别鳞状上皮内病变（HSIL）占2．69％（6／223），鳞状细胞癌（SCC）占0．45％（1／223）。HR-HPV阳性妇女与同期HPV阴性妇女的LCT结果差别有显著性意义（X^2=37．116，P=0．001）。结论本地区女性HPV感染以HPV52为主，生育年龄女性（26-45岁）阳性率较高。HR-HPV阳性检测结合LCT检查可提高女性宫颈瘤变的检出率。

潮州地区泌尿生殖道支原体检测及其耐药性分析

目的了解广东省潮州地区泌尿生殖道支原体感染状况以及对不同药物的耐药性,为临床医生治疗支原体感染提供合理用药依据。方法对2725例疑似泌尿生殖道支原体感染患者标本进行解脲支原体(Uu)、人型支原体(Mh)的检测和药敏试验。结果 2725例疑似泌尿生殖道感染的患者中,有1343例支原体培养阳性,阳性率为49.3%,其中Uu阳性759例占27.9%;Mh阳性79例占2.9%,Uu和Mh混合阳性505例占18.5%,女性患者标本支原体感染率明显高于男性。药敏试验结果显示,支原体对喹诺酮类抗生素耐药率最高,原始霉素的耐药率最低,对四环素类抗生素的耐药率较低;Uu+Mh混合感染对9种抗菌药物的耐药率均高于单纯Uu感染。结论潮州地区支原体感染的经验治疗首选药为原始霉素,其次是交沙霉素、四环素类等,具体情况应根据实验室的药敏结果选择合适的抗菌药物。

潮州地区少见型人乳头瘤病毒型别分布及与宫颈病变的关系

目的研究潮州地区少见型人乳头瘤病毒(HPV)型别分布及其与宫颈病变关系。方法采用实时荧光定量PCR对49458例农村女性健康人群进行高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)检测,HR-HPV阳性者先进行21型核酸分子快速导流杂交分型技术(HybriMax)和液基薄层细胞学阳性检查(LCT),未分出基因型别者再进行37型HybriMax基因分型;对低级别鳞状上皮内病变(LSIL)及以上病变者行阴道镜下组织病理学活检。结果 49458例经实时荧光定量PCR检测,4080例HR-HPV DNA阳性,所有阳性标本进行21型HybirdMax基因分型,对其中未能分出基因型别的共285例应用37型HybriMax再次进行基因分型,成功分型251例,单一亚型感染48例,多重亚型感染203例,16种少见型HPV主要亚型分别为HPV55(21.67%,57/251)、HPV61(14.83%,39/251)、HPV70(13.69%,36/251)和HPV84(12.93%,34/251)。285例都进行LCT检查,无上皮内病变及恶性病变(NILM)为阴性,共164例,阴性率65.34%;非典型鳞状上皮细胞意义不明确(ASC-US)及以上病变共87例,阳性率34.66%,其中ASC-US61例,占24.30%;非典型鳞状上皮细胞不除外高级别鳞状上皮内病变(ASC-H)1例,占0.40%;低级别鳞状上皮内病变(LSIL)20例,占7.97%;高级别鳞状上皮内病变(HSIL)4例,占1.59%;鳞状细胞癌(SCC)1例,占0.40%。结论潮州地区少见型HPV优势基因型是HPV55,复合少见型的多重感染能引起宫颈HSIL及以上病变,对宫颈病变的防治及其HPV基因疫苗的研制有重要意义。

HR—HPV联合液基薄层细胞学检查的临床应用

目的综合评价高危型人乳头瘤病毒（HR—HPV）联合液基薄层细胞学（LCT）检查时农村女性宫颈癌筛查的临床意义，探讨大规模开展女性宫颈癌筛查的有效方式。方法采用实时荧光定量PCR对农村35～60岁女性进行HR-HPV检测，阳性者进行LCT检查，对低级别鳞状上皮内病变（LSIL）及以上病变行阴道镜下组织病理学活捡。结果采集49458例宫颈脱落细胞标本，HR-HPV阳性4080例（8．25％），其中2077例行LCT检查，结果以非典型鳞状上皮细胞意义不明确（ASC-US）及以上病变为阳性，共717例，阳性率34．52％；无上皮内病变及恶性病变（NILM）为阴性，共1360例，阴性率65，48％。63例HSIL与组织病理学活检的复合率为71．43％。结论HR-HPV联合LCT检查提高了女性宫颈癌筛查的敏感度，是大规模宫颈癌筛查行之有效的一种方式。

妊娠高血压综合征患者凝血指标及血小板参数的检测结果分析

目的探讨妊娠高血压综合征患者凝血指标及血小板参数的变化及其临床意义。方法对正常非孕妇女50例、正常晚孕妇女50例与妊娠高血压综合征患者128例(其中轻度40例,重度68例,子痫20例)进行凝血指标及血小板参数的检测,并进行分析。结果妊娠高血压综合征组的凝血指标、血小板参数与正常晚期妊娠组和正常非孕妇女组比较差异有统计学意义(P<0.05),且随病情加重差异有增大趋势。结论正常晚孕妇女血液处于血栓前状态,而妊娠高血压综合征患者存在明显的血栓前状态,因此,产前测定凝血指标及血小板参数对妊娠高血压综合征的监测和治疗有一定的临床意义。

2018例阴道炎患者阴道分泌物检测结果分析

目的了解潮州市妇女阴道炎的患病情况,探讨唾液酸酶法检测细菌性阴道病(BV)的应用价值。方法采集妇科门诊就诊的2 018例阴道炎患者的阴道分泌物,用生理盐水涂片法进行滴虫﹑真菌及阴道清洁度的检查,用唾液酸酶法进行BV的快速检测;同时随机选取100份BV阳性的标本,采用传统的BV检测法进行检测。结果在2018例标本中,检出BV 303例,占15.0%;真菌性阴道炎210例,占10.4%,滴虫性阴道炎50例,占2.5%,BV合并真菌35例,占1.7%;BV合并滴虫4例,占0.2%。采用唾酸酶法检测BV与传统法相比,两者阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论潮州市妇女中BV患病率高于真菌性和滴虫性阴道炎,提示临床工作中应常规开展BV的检查,以提供及时准确的诊疗信息。唾液酸酶法与传统法相比,是BV诊断的一项较为快速和有效的检测指标,值得推广。

慢性阻塞性肺疾病患者C反应蛋白与纤维蛋白原含量的变化分析

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者血清C反应蛋白(CRP)与血浆纤维蛋白原(Fib)含量的变化及其临床意义。方法分别检测30例COPD患者急性加重期、缓解期及30例健康体检者(对照组)血清CRP、血浆Fib的含量,同时进行动脉血气测定。结果 COPD患者急性加重期CRP、Fib含量较缓解期及对照组均明显升高,缓解期含量较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);动脉血氧分压(PaO2)与血清CRP、血浆Fib含量均呈负相关(P<0.01),动脉血二氧化碳分压(PaCO2)与血清CRP、血浆Fib含量均呈正相关(P<0.01)。结论监测CRP、Fib的含量对于COPD患者的病情、疗效判断、预测预后有一定的临床价值。

脑出血患者血清同型半胱氨酸和血脂的相关性分析

目的 研究脑出血患者血清同型半胱氨酸（HCY）与血脂浓度变化及其相关性.方法 选取2012年1月-12月收治的内科脑出血患者177例作为研究对象,以同期的180例健康体检者作为对照组,测定空腹血清中HCY,TG,TCH,HDL-C及LDL-C的浓度,并进行统计学分析.结果 脑出血组的HCY浓度（19.71±5.83） μmol/L明显高于对照组（12.74±1.79）μmol/L,差异有统计学意义（t=7.558,P=8.487E-10）;而脑出血组的TG,TCH,HDL-CTT和LDL-C浓度与对照组比较,差异无统计学意义（t=0.356,-1.439,-1.241和-0.104;P=0.723,0.155,0.218和0.917）.讨论 高HCY血症与脑出血的发生有一定的密切关系,HCY是脑出血的一种独立危险因素.因此,重视HCY的临床监测并控制血中HCY的水平,对脑出血的预防和诊疗具有重要的意义.

丙泊酚对肝癌细胞侵袭能力的影响

目的探讨丙泊酚对肝癌细胞株SMMC-7721侵袭特性和MMP-2、MMP-9的影响。方法不同浓度的丙泊酚处理SMMC-7721细胞,用Transwell小室模型测定SMMC-7721对细胞外基质Matrigel的侵袭力,明胶酶谱法检测培养上清液中MMP-2、MMP-9的变化。结果经过5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL的丙泊酚处理后,SMMC-7721侵袭力均明显下调,培养上清液中MMP-2、MMP-9的含量也明显下降。结论丙泊酚可抑制肝癌细胞株SMMC-7721的体外侵袭力,同时明显降低SMMC-7721细胞分泌基质金属蛋白酶。

新生儿黄疸的遗传因素

新生儿黄疸是全球儿科医生共同面对的难题,遗传因素在新生儿黄疸的发病中起重要作用。目前的研究认为,与新生儿黄疸发生有关的因素主要有G6PD、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A1、编码有机阴离子转运体(OATP)的基因SLCO1B1和SLCO1B3,以及血红素加氧酶1和胆绿素还原酶A。

广东韶关地区异常血红蛋白的分子流行病学调查

目的调查广东韶关地区异常血红蛋白(hemoglobin,Hb)的分子流行病学特点。方法对2011年11月至2012年5月来我院就诊的9731例调查对象进行血细胞分析和Hb电泳筛查,对电泳异常标本进行基因测序。结果共发现45例异常Hb患者,发生率为0.46%,其中E区带7例,G/D区带9例,J区带7例,K区带6例,Q区带16例。基因测序结果显示,α珠蛋白基因变异25例,基因频率为1.285×10^(-3),β珠蛋白基因变异20例,基因频率为1.028×10^(-3);发现9种异常Hb类型,包括Hb QThailand 16例,HbE 7例,Hb G-Chinese 6例,Hb New York 6例,Hb G-Coushatta 3例,Hb J-Bangkok 3例,Hb J-Broussais2例,Hb Ottawa 1例,HbG-Taipei 1例。结论韶关地区的异常Hb的发生率高于全国平均水平,异常Hb的基因类型及分布体现出客家人群特有的南方人群和北方人群交汇融合的特点。

我院2012年儿科呼吸道标本519株病原菌分布及耐药性监测结果

目的了解我院2012年儿科呼吸道标本分离病原菌分布及对常用抗菌药物的耐药性。方法采用Whonet 5.6软件对我院2012年儿科呼吸道标本分离菌株进行统计分析。结果 2012年我院儿科呼吸道标本共分离病原菌株519株,其中革兰阳性菌占38.9%(202/519),革兰阴性菌占61.1%(317/519)。主要为流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和卡他莫拉菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌,分别占32.8%、24.3%、16.4%、14.3%、4.8%及2.5%。药敏试验结果显示PRSP检出率为6.3%(8/126),流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌β-内酰胺酶阳性率分别为46.5%和96.3%;MRSA检出为58.1%(43/74);大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs阳性率分别为44.0%(11/25)和23.1%(3/13)。结论流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和卡他莫拉菌是引起儿童呼吸道感染的主要病原菌,重视儿童呼吸道标本的采样和培养是提高儿童呼吸道病原菌分离率的关键,定期对儿童呼吸道分离病原菌进行耐药性监测有助于了解其耐药性的变迁,为临床经验用药提供依据,对加强儿童抗菌药物合理应用的监督和管理起到积极的作用。

赤道几内亚比奥科岛G6PD缺乏症分子流行病学研究

目的探讨非州西部赤道几内亚比奥科岛(Bioko Island)人群的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的发生率及基因型。方法在2012年1月至5月期间,用荧光斑点法对2 187名比奥科岛当地居民进行G6PD缺乏症筛查。采用高分辨熔解曲线(High-resolution melting,HRM)分析G6PD缺乏的标本的c.202 G>A与c.376 A>G。对HRM筛选不出突变的G6PD酶学缺乏的样本,针对非洲的其他突变类型:c.542 A>T(rs5030872)、c.680 G>A(rs137852328)、c.968 T>C(rs76723693)进行PCR-DNA测序。结果赤道几内亚比奥科岛人群的G6PD缺乏症总发生率为8.54%(189/2 187),其中男性84例(9.04%,84/929),女性105例(8.34%,105/1 258),男女检出率比为1.08:1。在189例G6PD缺乏标本中共检出两种基因类型,其中包括G6PD A-变异体(c.376 A>G/c.202 G>A)186例(98.41%,186/189G6PD Betica(c.376 A>G/c.968T>C)3例(1.59%3/189)。结论赤道几内亚比奥科岛是G6PD缺乏症高发区,基因型比较单一。HRM技术可用于非洲地区G6PD缺乏症的临床诊断和流行病学研究。

赤道几内亚Bioko岛的恶性疟原虫多药抗性基因(pfMDR-1)的研究

目的对赤道几内亚Bioko岛上恶性疟原虫多药抗性基因(pfMDR-1)进行分析,为Bioko岛的疟疾防控和治疗提供依据。方法2012年雨季期间采集的恶性疟原虫感染患者样本151份,用巢式PCR技术特异性扩增N86Y、E130K、Y184F、S1034C、N1042D、V1109I、D1246Y耐药分子标记的pfMDR-1基因片段,然后进行测序分析。结果虫株中共发现了4种不同的单倍型:YEY/SNVD、NEF/SNVD、YEF/SNVD和NEY/SNVD。91.39%(138/151)的样本发现了耐药性位点突变,包括3.31%(5/151)的86Y,29.80%的184F,和58.29%(88/151)的双重突变86Y/184F。结论结果表明赤道几内亚Bioko岛上的恶性疟原虫株存在较高比例耐药基因突变和耐药复合基因突变,为当地的抗疟疾选用药物提供指导。

1株抗酸阳性丙酸杆菌的分离和鉴定

目的对1株乳腺脓肿标本分离的缓慢生长革兰阳性抗酸杆菌进行菌种鉴定。方法采用细菌的16S核糖体核糖核酸(rRNA)基因测序分析,结合细菌的菌体形态、生长特征、API 20A和手工生化实验进行菌种鉴定。结果该菌为厌氧的、无芽孢、直或弯曲的多形性杆菌,革兰和抗酸染色为阳性。血平板培养5d形成直径大于2mm、米黄色、圆形、光滑、突起、边缘整齐、β溶血性菌落。但16SrRNA基因测序分析发现,该菌与贪婪丙酸杆菌的同源性为100%,API 20A生化编码为44365062,VP试验的阳性,符合贪婪丙酸杆菌的特征。结论该乳腺脓肿的病原菌为贪婪丙酸杆菌,其抗酸染色阳性,为国内首次报道。

2011至2012年潮州地区5例猪链球菌Ⅱ型感染的回顾性分析

猪链球菌是一种常见的人畜共患病病原菌,正常存在于猪鼻腔、扁桃体、上呼吸道等部位,生猪屠宰和猪肉加工可引起人的接触性感染,临床表现包括败血症、脑膜炎、心内膜炎、关节炎、休克及永久性耳聋等[1].猪链球菌在全球范围内均有流行.在我国,自1998年以来出现两次大的人感染猪链球菌疫情,一次是在江苏南通地区暴发的猪链球菌疫情,25例感染,14例死亡[2];另一次发生在四川省资阳地区,215例感染,38例死亡[3].本研究通过对2011至2012年潮州地区5例散发感染患者中分离的7株猪链球菌进行回顾性的细菌鉴定和比较分析,从而为猪链球菌感染的临床诊断、