运用PDCA循环法缩短EGFR基因检测报告时限

在分子生物学检测中,EGFR基因检测对临床应用TKI类靶向药物具有明确的指导意义,因此受到临床医师及患者的高度关注。《中国非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变检测专家共识(2016版)》等规范[1-2]指出,EGFR基因突变检测应在5~7个工作日内完成。本文应用PDCA循环管理工具对分子生物学检测EGFR项目进行改进,旨在缩短发出报告所消耗的时间,现报道如下。

荧光探针法检测胃镜活检标本幽门螺旋杆菌的可靠性分析

目的：分析荧光PCR（Taq Man探针）法检测胃镜活检石蜡标本幽门螺杆菌（HP）的重复性和可靠性。方法：对2014年1月~12月送检的11990例胃镜标本进行HP分型、鉴定检测,并将实验结果与病理进行相关性分析。从这些样本中随机抽取792例标本重复实验,分析2次结果的一致性。结果：11990例HP检测中,阳性结果和阴性结果各占31.68%和68.32%。其中Ⅰ型HP占95.21%,Ⅱ型HP占4.79%。阳性强度：1＋、2＋、3＋各占24.99%、42.92%和32.09%。HP的分型和阳性强度与病变的性质相关（P〈0.05,P〈0.01）。随机抽样重复的结果与第1次实验在鉴定、分型上具有很好的的一致性（87.37%、97.79%）,在阳性强度上具有较好的一致性（68.35%）。石蜡组织放置一段时间后,检测的阳性强度可能会有所下降。结论 ：胃活检标本检测HP时,荧光PCR法是一种重复性好、可靠的检测方法 。

应用图像分析技术定量检测肺腺癌中PD-L1的蛋白表达及其临床意义

目的利用图像分析技术定量研究肺腺癌中程序性死亡配体1(programmed cell deathligand 1,PD-L1)的蛋白表达及其与临床病理参数之间的相关性,并对比PD-L1免疫组化彩色图像定量分析结果与人工判读结果的一致性。方法采用免疫组化En Vision两步法检测109例肺腺癌标本的PD-L1蛋白表达。从每张切片的肿瘤区域随机抽取5个视野进行图像采集及分析,计算每个病例的染色程度比值[(棕色区域面密度÷蓝色区域面密度)×棕色平均光密度],将该值≥0.05的病例定义为PD-L1蛋白表达图像分析结果阳性。人工判读结果系参照文献通用的阳性强度与阳性细胞百分数的乘积;实验结果均使用SAS 9.1软件分析。结果 PD-L1的染色程度比值(定量)在不同性别中具有明显差异性(P<0.05);PD-L1蛋白表达的定性结果与肿瘤的组织学分型密切相关(P<0.05);PD-L1免疫组化图像分析的定性结果与人工判读结果的一致率为88.073%(K=0.7157)。结论对肺腺癌PD-L1蛋白表达程度采用图像分析定量检测所获结果与人工判读法结果一致性较好,但前者更具有客观性和准确性。

细胞学标本行基因检测的可靠性分析及质控方法的初步探索

目的对细胞学标本行基因检测的可靠性进行分析并初步建立细胞学标本在基因检测过程中质量控制的方法。方法对625例行基因检测的细胞学标本进行抽查及重复实验,并分析两次结果的一致性。结果 625例细胞学标本DNA浓度为11.191±21.387 ng/μL,内参Ct值为14.509±2.555,阳性率为20.8%。抽查31例样品与原始样品实验结果的一致率为96.8%(30/31),两次实验的内参Ct值、阳性位点的Ct值均无差异(P>0.05),实验结果的稳定性较好。结论细胞学标本行基因检测是一种稳定可靠、重复性较好的方法,但由于细胞学标本的特殊性,故在检测过程中对标本进行严格质控非常必要。

不同表皮生长因子受体基因突变状态的肺腺癌中PD－1/PD－L1的表达

目的探讨肺腺癌中程序性死亡分子1（PD－1）及程序性死亡配体1（PD－L1）蛋白表达的情况及与临床病理参数之间的相关性，并分析不同表皮生长因子受体（EGFR）基因突变状态与PD－1、PD－L1表达的相关性。方法选取中日友好医院2010年8月至2016年1月间送检的109例浸润性肺腺癌手术标本，其中EGFR基因野生型51例，突变型58例。用免疫组织化学染色检测PD－1、PD－L1的蛋白表达。使用SAS 9.1软件分析实验结果，PD－1与PD－L1表达的相关性分析采用χ^2检验，PD－1、PD－L1的表达与临床病理参数的相关性分析采用χ^2检验。结果PD－1、PD－L1蛋白表达总体阳性率分别为68.8%（75/109）和27.5%（30/109），二者之间的相关性具有统计学意义（P〈0.05）。EGFR野生型的51例标本中，PD－1和PD－L1的阳性率（74.5%，39.2%）均高于EGFR突变型的58例标本（63.8%，17.2%），前一组PD－1和PD－L1表达之间的相关性具有统计学意义（P〈0.05），而后一组二者表达的相关性不具有统计学意义（P〉0.05）。PD－1的表达与年龄相关（P〈0.05）。PD－L1阳性表达与组织学分型、肿瘤大小、是否发生淋巴结转移及EGFR状态显著相关（P〈0.05）。结论不同EGFR状态下，PD－1与PD－L1蛋白表达特点不同。PD－L1过表达与较大的肿瘤直径及淋巴结转移密切相关，可以作为肺腺癌恶性程度较高的一个提示指标。

新辅助化疗对浸润性乳腺癌分子标志物及分子分型的影响

目的研究乳腺癌新辅助化疗(NAC)(蒽环类联合紫衫类)过程中,雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、HER2状态和Ki67值的变化,以及这些变化是否会对分子分型产生影响。方法回顾性分析从2011年11月到2015年6月期间在军事医学科学院附属医院行蒽环联合紫衫类NAC的137例浸润性乳腺癌患者。通过免疫组织化学方法测定NAC前后组织中ER、PR、HER2以及Ki67,并分为:Luminal A、Luminal B、三阴性和HER2阳性4种分子亚型。NAC前后分子标志物和分子分型的变化采用χ~2检验或用Fisher确切概率法检验,并用Kappa检验对新辅助化疗前后的分子标志物及分子分型进行一致性检验。结果 NAC前后ER、PR、HER2、Ki67的一致率分别为88.32%、83.21%、94.16%和75.91%。ER、PR、HER2在NAC前后变化差异均无统计学意义(P值均大于0.05)。在NAC后Ki67值平均数从35.75%降到了19.12%(P<0.05)。除性激素受体(HR)阳性,HER2阴性型的肿瘤之外,其余病例的分子分型在NAC前后的结果一致(P=0.488)。NAC前后分子分型的一致率为57.66%,Kappa值=0.4020。结论 NAC会使浸润性乳腺癌Ki67的表达下降,并会影响HR阳性、HER2阴性型肿瘤的分子分型。

叶酸受体α在卵巢癌靶向诊断和治疗中的应用

卵巢癌是妇科肿瘤相关死亡最重要原因，急需新的诊断和治疗方法。叶酸受体α（folate receptor alpha，FRα）是糖基化磷脂酰肌醇（glycosylphosphatidylinositol，GPI）锚定膜蛋白，它在卵巢癌中过表达，较低或限制性分布于正常组织中，这使它成为卵巢癌较有前景诊断和治疗靶点。文章主要介绍了FRα在肿瘤发展中的作用，作为诊断和预后标志物的应用以及靶向FRα的卵巢癌潜在治疗方法，如疫苗、单克隆抗体和过继性T细胞治疗等相关进展。

精细化护理在胃肠道肿瘤患者行腹腔热灌注化疗中的应用

胃肠道肿瘤是外科较常见的一种肿瘤,晚期常发生远处转移、腹腔种植、恶性腹水等,其发病率及致死率较高,严重影响患者的生存质量。腹腔热灌注化疗(hyperthermic intraperitoneal chemotherapy,HIPEC)在预防及治疗胃肠道肿瘤复发及腹腔转移、恶性腹水方面具有显著疗效[1]。近年来国际上把减瘤术加HIPEC作为治疗进展期胃癌、腹膜假性粘液瘤及某些进展期结肠癌的新治疗模式[2],可降低肿瘤复发率及远处转移率,提高患者5年生存率[3]。随着医学护理模式的发展,精细化护理应用于妇科、儿科、骨科、手术室等学科中,取得较好效果。我科在胃肠道肿瘤患者行腹腔热灌注化疗中实施精细化护理,效果满意,现报道如下。

成人先天性巨结肠并乙状结肠扭转1例报道

病例资料患者,男,57岁。因“腹痛、腹胀,停止排气、排便1 d”入院。患者1 d前因食用不洁食物出现腹泻,自服蒙脱石散1盒后出现腹部胀痛,停止排气、排便,伴胸闷憋气,无恶心、呕吐,无发热、寒战,急来我院就诊。

提高嵌合抗原受体T细胞治疗安全性的探讨

嵌合抗原受体（chimericantigenreceptor，CAR）修饰的T细胞不受MHC分子的限制性能有效地识别靶抗原，特异性杀伤肿瘤细胞，是肿瘤治疗中很有前景的新方法，特别是CAR修饰T细胞能显著提高大量恶性血液肿瘤患者临床疗效，但CAR-T细胞治疗应用于实体瘤不易掌握．需要深入研究。虽然临床试验证实CAR-T细胞具有清除肿瘤的能力，但也存在一些严重的安全问题，如靶向非肿瘤毒性、细胞因子释放综合征和神经毒性等。如何提高CAR—T细胞安全性，使其更精确可控成为其临床应用的关键，现就优化结构设计、转导方法和外源分子控制等方面改善CAR-T细胞安全性作一简要综述。

1例锁骨下深静脉置管过程中出现空气栓塞的分析与思考

深静脉置管是采用静脉导管经皮肤穿刺留置于深静脉的技术。它具有保留时间长,输液种类多等特点,广泛应用于急危重患者的抢救,补液输血,血液透析,监测中心静脉压,评价心功能等方面。可避免反复穿刺外周静脉,减轻病人痛苦。置管过程中出现血管空气栓塞(VAE,Venous air embolism)是一种十分罕见但却极其严重的并发症。VAE的发生隐匿,发作凶险,处理困难,患者死亡率极高。2017年7月2日,我科成功救治了一例锁骨下深静脉置管过程中发生VAE的患者,现报告如下。

嵌合抗原受体T细胞在实体瘤治疗中的应用

嵌合抗原受体（chimeric antigen receptors, CAR）修饰的T细胞不受主要组织相容性复合体（ major histocompatibility complex, MHC）分子的限制性，能有效地识别靶抗原，重定向T细胞特异性杀伤肿瘤细胞，是肿瘤治疗中很有前景的新方法。CART细胞在治疗血液学肿瘤中效果显著，但是在实体瘤治疗中有许多障碍。由于多数潜在实体瘤靶点是非特异的，在健康组织中也表达，由此产生相比血液肿瘤CART细胞治疗中B细胞缺失更不可耐受的副反应，如细胞因子释放综合征和靶向非肿瘤毒性，有时甚至是致命性的。随着CART治疗肿瘤技术的不断发展，临床前及临床试验显示了较好的有效性、安全性，CART细胞治疗仍是吸引人的治疗方法。多种潜在实体瘤靶点在考虑中，如神经节苷脂GD2、白介素13受体alpha2亚基 （Interleukin 13 receptor α2, IL13 Rα2）、间皮素等。现介绍CART细胞治疗实体瘤的不良反应，重点关注近年来报道的实体瘤潜在治疗靶点。