RNA病毒质控物研究进展

RNA质控物是病毒分子生物学检测的关键因素,病毒颗粒和裸露的RNA片段由于有生物传染性,易降解而适合用作RNA质控物。近年来发展起来的内含靶RNA序列的盔甲RNA生物安全性高、不易降解、能全程参与病毒核酸的提取和反应,是理想的RNA病毒质控物。

RNA标准物病毒样颗粒表达系统的构建及其特性研究

为了构建RNA病毒样颗粒(virus-like particles,VLP)表达系统pET28a(+)-MS,将插入的外源基因诱导表达获得相应的RNA标准物质病毒样颗粒,将MS2噬菌体包膜蛋白和成熟蛋白基因插入表达质粒pET-28a(+),构建pET28a(+)-MS重组子,将带有包装位点序列的外源RNA对应的cDNA插入成熟蛋白基因的下游,经过诱导表达含外源RNA病毒样颗粒。结果表明,pET28a(+)-MS能表达活性的包膜蛋白(49.8ku)和成熟蛋白(14.4ku),能将外源基因RNA包装成病毒样颗粒,该VLP长度约1 500bp,RT-PCR反应性优良,能耐受RNase的降解,在血清中37℃经1个月未有明显降解。