UF-100全自动尿沉渣分析仪进行尿常规检验时显微镜检查的意义

目的:强调在使用UF-100全自动尿沉渣分析仪进行尿常规检验时显微镜检查的意义。方法:我们对439例尿液标本同时进行了UF-100尿沉渣自动化分析(以后简称UF-100)和显微镜检查(以后简称镜检),将白细胞、红细胞、管型用两种方法检测的结果分成3个部分进行比较分析。结果:使用UF-100检测白细胞、红细胞、管型结果均阴性的尿标本236例。经镜检白细胞阳性1例,红细胞阳性1例,管型阳性2例,假阴性率分别为0.43%、0.43%、0.87%;使用UF-100检测白细胞阳性的尿标本107例,而镜检白细胞阳性标本86例,假阳性率为19.6%;使用UF-100检测红细胞阳性的尿标本121例,而镜检红细胞阳性标本83例,假阳性率为31.4%;使用UF-100检测管型阳性的尿标本100例,镜检管型阳性标本11例,假阳性率为89.0%。镜检发现这些假阳性标本中大多伴有上皮细胞、结晶、霉菌、黏液丝或其他有形成分的存在。结论:使用UF-100检测管型阳性的尿标本,假阳性率、假阴性率都较高,我们参考干化学尿蛋白结果,主张除镜检UF-100检测管型阳性的标本外,还应对管型阴性、尿蛋白阳性的尿标本进行镜检。原则上,每一个尿液标本都应进行尿沉渣镜检,在尿液常规检查自动化、规范化的基础上确保尿常规检验结果的准确性。

肺炎链球菌大环内酯类耐药表型与相关基因的关系

目的了解肺炎链球菌临床分离株红霉素耐药基因的流行情况和耐药表型的关系。方法对42株肺炎链球菌用E-试验和K-B纸片扩散法检测其对10种抗生素的敏感性;用红霉素和克林霉素双纸片协同试验确定其耐药表型;用PCR扩增这些菌株的耐药基因ermB、mefA和mefE。结果 42株肺炎链球菌中耐药基因ermB总检出率为95.2%(40/42),mefE总检出率为26.1%(11/42),未检出mefA基因。耐药基因组合ermB(+)mefE(-)和ermB(+)mefE(+)占95.2%,两者均呈cMLSB耐药表型。ermB(-)mefE(+)占4.8%(2/42),耐药表型为M型。结论耐药基因ermB导致的cMLSB耐药是大环内酯类耐药的主要原因。大环内酯类抗生素已不是治疗肺炎链球菌的有效药物。

产ESBLs大肠埃希菌与非产ESBLs大肠埃希菌耐消毒剂基因检测

目的了解大肠埃希菌(E.coli)耐消毒剂基因(qacE△1-sul1)在产ESBLs组及非产ESBLsE.coli组该基因携带情况。方法PCR法对54株E.coli进行qacE△1-sul1基因的检测。结果54株E.coliqacE△1-sul1基因扩增结果,38株阳性,其中产ESBLs组携带qacE△1-sul1基因有20株,不产ESBLs组携带qacE△1-sul1基因有18株。结论qacE△1-sul1基因在E.coli携带率较高,且产ESBLs组与非产ESBLs组E.coliqacE△1-sul1基因携带情况差异无统计学意义。

404例慢性粒细胞白血病的染色体核型研究

目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)不同时期骨髓细胞染色体核型的变化特点及临床意义。方法采用短期培养法制备骨髓细胞染色体标本,应用R显带技术对该院404例CML患者的骨髓染色体核型进行回顾性分析。结果 404例患者中Ph染色体阳性376例(93.1%),Ph染色体阴性但bcr/abl阳性28例(6.9%)。376例Ph染色体阳性患者中,具有典型Ph易位者360例,具有变异易位者16例(复杂变异易位14例,简单变异易位2例)。16例变异易位患者慢性期10例,急变期6例。伴额外染色体异常者80例(19.8%),其中慢性期32例,占CML慢性期患者(304例)的10.5%,以-Y、+8为主;急变期48例,占急变期患者(100例)的48%,以i(17)、+8、+Ph最多见。CML急变期伴额外染色体异常的比例高于慢性期(P<0.01)。结论 Ph染色体是CML的细胞遗传学标志,Ph染色体可表现为典型易位和变异易位,变异易位在慢性期和急变期都可出现。CML急变期伴额外染色体异常的比例高于慢性期,CML病程出现额外染色体异常预示病程进入加速或急变期。

血液HBV DNA的改良酚/氯仿抽提方法的建立及临床应用

目前在乙型肝炎患者实验室检测中，最常用的是检测乙型肝炎“两对半”；临床输血前也主要应用ELISA法筛查输血相关性传染病。其常常受到窗口期困扰，而DNA检测方法可大大缩短窗口期。血液HBVDNA定量检测是病毒复制最直接、可信的指标，用于乙型肝炎感染病原学动态变化监测及疗效评估，大大提高了时效性，因此，DNA提取的质量好坏和得率多少至关重要。

凝固酶阴性葡萄球菌qacA／B基因的检测分析

目的探讨凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）qacA／B耐消毒剂基因、耐药基因存在状况，为临床提供CNS对消毒剂的潜在耐药信息。方法收集临床标本中分离出的CNS，并根据其对头孢西丁的敏感性分为耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）和甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（MSCNS）两组，采用聚合酶链反应（PCR）检测qacA／B基因，并对组间检出率进行比较。结果38株CNS中qacA／B基因阳性13株（占34．2％），其中MRCNS35．7％，MSCNS30．0％。结论CNS的qacA／B基因携带率较高，且MRCNS菌株与MSCNS菌株组间携带率无统计学意义。MSCNS携带qacA／B基因为国内首次报道。

铜绿假单胞菌氨基糖甙类药物产酶耐药机制的研究

目的了解我院临床分离的30株多重耐药铜绿假单胞菌中16SrRNA甲基化酶基因及氨基糖甙类修饰酶（AMEs）基因存在状况。方法收集山东和江苏两地医院临床分离的铜绿假单胞菌共50株（山东烟台多重耐药30株，江苏泛耐株20株），采用聚合酶链反应（PCR）及序列分析的方法分析6种16SrRNA甲基化酶（armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、npmA）和6种AMEs基因aac（3）-I、aac（3）-II、aac（6’）-Ib、aac（6’）-II、ant（3”）-I和ant（2”）-I。结果山东烟台30株多重耐药铜绿假单胞菌中4种基因aac（3）-II、aac（C）-II、ant（3”）-I和ant（2”）-I的阳性株数分别为6株（20％）、14株（46．7％）、11株（36．7％）和1株（3．3％），其余8株基因均为阴性；AMEs基因总阳性率为50％（15／30）。江苏20株泛耐株中6种基因rmtB、aac（3）-II、aac（6’）-Ib、aac（6’）-II、ant（3”）-I和ant（2”）-I的阳性株数分别为ll株（55％）、12株（60％）、7株（35％）、12株（60％）、10株（50％）和9株（45％），其余6株基因均为阴性；AMEs基因总阳性率为95％（19／20）。结论铜绿假单胞菌存在16SrRNA甲基化酶基因为国内首次报道；铜绿假单胞菌AMEs基因携带率很高；两家医院检出酶基因种类有差别。

类风湿性关节炎患者血清黏附分子的水平变化及意义

目的:了解类风湿性关节炎(RA)患者血清中两种可溶性黏附分子:可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)和可溶性选择素E(sE-selectin)的水平。方法:采用ELISA方法检测63例RA患者及30例健康对照血清sICAM-1、sE-selectin的含量,并分析两种可溶性黏附分子与类风湿因子(RF)的相关性。结果:所测RA病人血清中sICAM-1、sE-Selectin水平较正常对照组明显增高(P<0.05)。RA病人血清中sICAM-1与RF呈正相关。结论:可溶性黏附分子sICAM-1、sE-Selectin参与了自身免疫性风湿病的发病过程。异常升高的sICAM-1水平可反映类风湿性关节炎的活动程度。

血细胞分析仪白细胞分类结果提示异常的准确性评价

目的:研究SYSMEX SF-3000血细胞分析仪白细胞(WBC)分类结果提示异常的准确性.方法:血细胞分析仪WBC分类结果提示Blast/A-Ly(原始/异型淋巴细胞)?,Imm Gran(未成熟粒细胞)?的标本505例,按WBC计数结果分五组,＜4.00×109/L;＜4.00×109/L～10.00×109/L;10.01×109/L～20.00×109/L;20.01×109/L～30.00×109/L;＞30.00×109/L.这些标本中另外还有MONO ↑(单核细胞增高)、EO ↑(嗜酸性粒细胞增高)、BASO ↑(嗜硷性粒细胞增高)等.同时推血片、染色、镜检分类.结果:505例仪器分类全部提示异常的标本,镜检分类结果21.98%(111/505)含有幼稚粒细胞,其中原始粒细胞21.32%(29/136例次);中、晚幼稚粒细胞78.68%(107/136例次);7.92%(40/505)的标本有异型淋巴细胞;21.58%(109/505)的标本中性粒细胞中含有中毒颗粒.并且WBC计数4×109/L～10×109/L组异常细胞和中毒颗粒检出率较高67.86%(57/84).WBC计数＞30×109/L组原始粒细胞检出率达100%(24/24).仪器分类提示单核细胞增高的155例与镜检分类有显著性差异(P＜0.05).提示嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞增高的55例和40例与镜检分类无显著性差异(P＞0.05).结论:SF-3000血细胞分析仪WBC分类结果提示异常的标本,需要镜检分类,避免漏诊.

体外循环心内直视手术电解质、血气分析变化的临床研究

目的通过对CPB转流过程电解质、血气分析的动态观察、监测分析,提高灌注质量,增加安全性。方法71例体外循环心内直视手术患者分为三组,对转流过程各阶段的血气和K+、Na+、Cl-同步测定,并进行统计学处理。结果CPB前,三组患者均存在不同的低血钾,F3+F4组、ASD+VSD组低HCO3-、ABE和SBE,F3+F4组的Hb高于其他两组,CPB中ASD+VSD组、风心病组和心脏复跳期间F3+F4组、风心病组高PCO2。心脏复跳期间风心病组高ABE、SBE。结论掌握CPB全过程电解质和血气分析变化规律,分析出现差异原因,随时调控转流中各项灌注指标,提高手术成功率。

急性动脉栓塞取栓后回心血经血液净化后回输的研究

目的 探讨将急性动脉栓塞取栓后的回心血经血液净化后回输的可能性。方法 将回心血收集、稀释10倍后用血滤器予以超滤、浓缩后经浅静脉回输。结果 超滤浓缩后血钾、血乳酸浓度呈显著性降低,回输后无各种并发症发生。结论 急性动脉栓塞取栓后回心血经血液净化回输是一种安全、有效的预防代谢障碍综合征的方法。

狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞株的作用

目的 探讨狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞株的细胞毒作用及其机制.方法 U266细胞株与狗舌草提取物共同培养,用CCK-8试剂检测细胞毒作用,用流式细胞术（FCM）对细胞周期及凋亡进行检测.结果 狗舌草提取物对U266细胞有细胞毒作用,半数抑制质量浓度约为3.2μg/ml;狗舌草总提取物影响U266细胞周期,当药物质量浓度为1.25、2.5、5、10 mg/L时G0/G1期细胞减少[（34.12±0.49）%、（38.06±0.63）%、（27.46±0.61）%、（15.91 4-0.32）%],S期[（4.98±0.50）%、（4.01±0.22）%、（4.16±0.15）%、（5.04±0.12）%]、G2/M期[（50.05±1.12）%、（51.27±0.71）%、（51.84±0.73）%、（55.1l±0.25）%]细胞增加;凋亡细胞增加;用Annexin V/PI染色FCM检测,均显示细胞凋亡与狗舌草提取物有剂量依赖关系.结论 狗舌草提取物对U266细胞有体外细胞毒作用.其作用机制部分是诱导细胞凋亡.

血浆外泌体源性miR-20a-5p通过靶向PIK3R1影响雌激素受体阳性乳腺癌细胞骨转移

目的探讨血浆外泌体源性miR-20a-5p通过靶向PIK3R1对雌激素受体阳性的乳腺癌(estrogen receptor-positive breast cancer,ER(+)BC)骨转移的影响。方法借助生物信息学网站检索与ER(+)BC骨转移相关的数据集,选择miR-20a-5p纳入研究。收集90例ER(+)BC患者与相对应的健康人的血浆,检测血浆中PIK3R1的表达,从血浆中提取外泌体,检测外泌体中miR-20a-5p的表达。双荧光素酶报告实验验证miR-20a-5p与PIK3R1的靶向调控关系。分别将转染NC-inhibitor、miR-inhibitor的外泌体或转染si-NC、si-PIK3R1的ER(+)BC细胞注射到小鼠左心室,Micro-CT扫描骨组织并进行骨组织TRAP染色。将转染NC-inhibitor、miR-inhibitor的外泌体与转染si-NC、si-PIK3R1的ER(+)BC细胞共培养后,使用Western blot检测破骨细胞分子c-fos、NFATc1的表达。结果qRT-PCR检测发现较正常血浆外泌体(1±0.26)或细胞(1±0.13),miR-20a-5p在ER(+)BC血浆外泌体(1.49±0.27)(t=12.40,P<0.001)及BC细胞系MCF-7(1.64±0.13)(t=6.03,P=0.004)、BT474(1.49±0.11)(t=4.98,P=0.008)、T47D(1.98±0.15)(t=8.55,P=0.001)中均表达升高。而与正常血浆外泌体(1±0.25)或细胞(1±0.10)比较,PIK3R1在ER(+)BC血浆外泌体(0.69±0.24)(t=8.48,P<0.001)及ER(+)BC细胞系MCF-7(0.73±0.05)(t=4.18,P=0.014)、BT474(0.61±0.05)(t=6.04,P=0.004)、T47D(0.34±0.04)(t=10.61,P<0.001)中则表达降低。PIK3R1在血浆(t=8.48,P<0.001)及ER(+)BC细胞系MCF-7(t=4.18,P=0.014)、BT474(t=6.04,P=0.004)、T47D(t=10.61,P<0.001)中则表达降低。PIK3R1被证实为miR-20a-5p的靶基因。与NC-inhibitor组小鼠相比,miR-inhibitor组小鼠的骨小梁组织体积(t=3.32,P=0.029)、骨小梁区域体积(t=6.24,P=0.003)、骨体积分数(t=7.35,P=0.002)和骨矿物密度(t=13.72,P<0.001)均增加,成熟破骨细胞数量减少。与NC-inhibitor组比较,miR-inhibitor组细胞中c-fos(t=9.04,P=0.001)和NFATc1(t=13.42,P<0.001)的表达减少。与miR-inhibitor+si-NC组相比,miR-inhibitor+si-PIK3R1组中小鼠的骨小梁组织体积(t=3.03,P=0.039)、骨小梁区域体积(t=6.37,P=0.003)、骨体积分数(t=3.36,P=0.028)和骨矿物密度(t=6.92,P=0.002)均减少,成熟破骨细胞数量增加,细胞中c-fos(t=7.75,P=0.002)和NFATc1(t=9.65,P=0.001)的表达增加。结论ER(+)BC患者血浆外泌体源性miR-20a-5p通过抑制PIK3R1表达来促进ER(+)BC骨转移。