烟台市新生儿苯丙酮尿症的筛查及基因突变分析

目的:分析细菌抑制法、荧光法、串联质谱法对烟台市新生儿苯丙酮尿症筛查的结果,并对阳性患儿的基因突变情况进行分析。方法:选取2005年6月-2021年6月烟台市辖区各级医院送检进行苯丙酮尿症筛查的695178例新生儿作为研究对象,筛查方法:细菌抑制法267950例,荧光免疫法424753例,串联质谱法2475例。比较3种方法的阳性确诊率。在确诊为苯丙酮尿症的阳性患儿中随机抽取40例做质谱基因分析,寻找可能的致病突变位点。结果:苯丙酮尿症筛查的3种方法中,串联质谱法阳性确诊率高于其他2种方法,差异有统计学意义(P<0.05);40例阳性患儿中,发现31个致病基因突变;80条染色体上共发现75个突变位点,基因突变检出率达93.75%。结论:串联质谱法可降低假阳性率,提高准确性。烟台市苯丙酮尿症患儿基因突变存在多样性,基因突变谱与其他地区的报告不完全相同。

烟台市新生儿筛查疾病分子流行病学调查研究

目的:进行烟台市新生儿疾病分子流行病学筛查,分析阳性患儿发病率及基因突变情况。方法:回顾性分析1998年8月-2021年12月烟台市出生的新生儿1147353例病历资料。2014年1月启动串联质谱筛查103321例。结果:在1147353例新生儿四病筛查中确诊先天性甲状腺功能减低症(CH)1203例,苯丙酮尿症131例,先天性肾上腺皮质增生症37例,葡萄糖-6磷酸脱氢酶缺乏症192例,发病率分别是1/984、1/8758、1/31010、1/5976。在103321例新生儿串联质谱筛查中发现了36例遗传代谢病,发病率1/2870。确诊的95例阳性患儿中检测出104种基因突变类型,分布在多个病种。结论:烟台市四病发病率最高的是CH,遗传代谢病发病率最高的甲基丙二酸血症。阳性病例基因检测初步构建了部分疾病基因突变谱,为进一步探索疾病的病因提供依据。

烟台地区非淋菌性泌尿生殖道炎感染率调查

目的分析烟台地区非淋菌性泌尿生殖道炎（NGU）患者感染情况。方法实时荧光定性PCR。结果NGU总检出率为32％，解脲支原体（UU）阳性检出率显著高于沙眼衣原体（CT）阳性检出率，混合感染占10％，女性UU检出率显著高于男性。结论不同国家、地域NGU感染情况有一定的差异，烟台地区NGU感染仍然占据相当的比例，应引起高度重视；及时进行准确的检测，以辅助临床早期诊断治疗，是降低发病率的关键因素之一。

烟台地区EBV相关胃癌临床病理特征及病毒基因分型

目的明确烟台地区EB病毒(EBV)相关胃癌(EBVaGC)的临床病理特征和病毒基因分型,探讨病毒基因变异与EBVaGC发生的相关性。方法收集烟台地区653例胃癌组织标本和116例健康人群咽漱液(TW)标本,分别采用原位杂交和PCR技术检测筛选EBV阳性标本;PCR结合限制性片段长度多态性及测序检测EBV阳性标本中1/2分型、C/D分型和F/f分型。结果共筛选和鉴定EBVaGC标本40例(6.1%)和EBV阳性TW标本42例(36.2%)。与EBV阴性胃癌比较,EBVaGC在男性中的检出率高于女性(χ2=4.998,P<0.05),在胃底贲门、胃体的检出率高于胃窦(χ2=22.766,q=4.290、5.724,P<0.05),低分化腺癌的检出率高于高分化腺癌、中分化腺癌和黏液腺癌(χ2=17.013,q=3.219～5.041,P<0.05)。40例EBVaGC中1/2型、C/D型和F/f型EBV的比例分别为90.0%/10.0%、42.5%/57.5%和97.5%/2.5%,42例TW标本中3种基因分型的比例分别为81.0%/19.0%、69.0%/31.0%和92.9%/7.1%。EBVaGC和健康人群之间1/2型、F/f型的分布差异均无统计学意义,而EBVaGC中D型EBV的检出率高于健康人群,差异有显著性(χ2=5.863,P<0.05);3种基因型综合分析,1DF型在EBVaGC的检出率高于健康人群(P=0.009)。结论烟台地区EBVaGC占胃癌的6.1%,好发于男性,主要发生在胃底贲门区和胃体(中上2/3),以低分化腺癌多见;EBVaGC中以1型、F型和D型EBV为主,D型变异可能与EBVaGC相关。

NT-proBNP、cTnI、Mb对风湿性心脏病患者人工瓣膜置换术预后情况的预测价值

目的:探讨N-末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌红蛋白(Mb)对风湿性心脏病(RHD)人工瓣膜置换术预后情况的预测价值。方法:选取2020年1月-2022年12月烟台市烟台山医院收治的RHD患者60例为研究对象,均接受人工瓣膜置换术治疗。比较预后良好组(n=47)、预后不良组(n=13)NT-proBNP、cTnI、Mb、左室射血分数(LVEF)水平,分析NT-proBNP、cTnI、Mb与LVEF的相关性,分析NT-proBNP、cTnI、Mb对RHD预后不良的预测效能。结果:预后不良组NT-proBNP、cTnI、Mb水平高于预后良好组,LVEF水平低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,NT-proBNP、cTnI、Mb分别与LVEF呈负相关,差异有统计学意义(r=-0.685、-0.636、-0.614,P=0.016、0.022、0.027)。NT-proBNP、cTnI、Mb联合预测RHD预后不良的曲线下面积高于各单一指标,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:NT-proBNP、cTnI、Mb与RHD预后情况相关,RHD患者血清NT-proBNP、cTnI、Mb含量升高,提示病情恶化风险增加,NT-proBNP、cTnI、Mb联合预测RHD预后有一定价值。

医院碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌的耐药特征分析

目的 分析碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌的耐药表型和基因型等特征,为临床抗感染治疗提供实验依据。方法 收集2017年5月至2021年4月间住院患者感染性标本中分离的碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌,采用VITEK-2compact全自动细菌鉴定/药敏分析系统对碳青霉烯耐药菌株进行鉴定和药敏试验,应用SPSS Statistics 17.0软件进行耐药率差异分析。结果 共获得碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌55株,耐药菌株来源于痰液标本31株、尿液标本14株、血液标本10株;药敏结果显示:受试菌株均对美罗培南和亚胺培南耐药且对9种β-内酰胺类药物的耐药率均达到98.2%以上。碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌对多数抗菌药物的耐药率均在50%以上且多重耐药菌株高达81.8%,其中以β内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、复方新诺明四类耐药最为流行。不同类型标本来源的菌株对多数抗菌药物的耐药率并无显著性差异。55株菌株中均检测到碳青霉烯耐药基因,其中blaKPC-2检出率为90.9%,blaNDM为9.1%。受试菌株呈现10余种MLST型,其中以ST11和ST23型最为流行。结论 引起医院内感染的碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌多重耐药严重,MLST分型以ST11和ST23型为主,碳青霉烯耐药主要是由blaKPC-2和blaNDM引起的。

CST4、CA19-9、CA72-4和CEA联合检验诊断胃癌的价值

目的探讨半胱氨酸蛋白酶抑制剂S(cystatin 4,CST4)、糖抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)、糖抗原72-4(carbohydrate antigen 72-4,CA72-4)和癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)联合检验诊断胃癌的价值。方法2019年5月至2021年5月,选择烟台市烟台山医院收治的经胃镜活检或术后病理确诊的胃癌患者70例及胃良性病变患者40例作为观察研究资料,另选择健康体检者40例作为健康对照组,均接受CST4、CA19-9、CA72-4和CEA联合检验,比较各组指标水平,评价各指标阳性率及诊断胃癌的灵敏度、特异度及准确率。正态分布的计量资料以(-x±s)表示,采用独立样本t检验,计数资料以例(%)表示,采用χ^(2)检验。结果胃癌患者CST4、CA19-9、CA72-4、CEA阳性率分别为92.86%(65/70)、77.14%(54/70)、80.00%(56/70)、80.00%(56/70),高于胃良性病变患者的20.00%(8/40)、10.00%(4/40)、5.00%(2/40)、5.00%(2/40)及健康对照组的2.50%(1/40)、2.50%(1/40)、0.00%(0/40)、2.50%(1/40),胃良性病变患者CST4阳性率高于健康对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);胃良性病变与对照组CA19-9、CA72-4、CEA阳性率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。CST4诊断胃癌的灵敏度92.86%(65/70),高于CA19-9的77.14%(54/70)、CA72-4的80.00%(56/70)、CEA的80.00%(56/70),而且4项联合检验的灵敏度、准确率及阴性预测值98.57%(69/70)、98.00%(147/150)、98.73%(78/79),高于CA19-9、CA72-4、CEA单一及联合结果,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论胃癌术前诊断中联合检验CST4、CA19-9、CA72-4和CEA等肿瘤标志物可提高灵敏度、准确率,而且不同指标反映不同的病理特征,为临床诊治提供可靠依据,值得推广。

脂肪源性间充质干细胞外泌体在大鼠全层皮肤缺损创面愈合中的机制研究

目的探究脂肪源性间充质干细胞外泌体(hADSC-Exo)在大鼠全层皮肤缺损创面愈合中的作用机制。方法分离并鉴定hADSC与hADSC-Exo。将人真皮微血管内皮细胞(hMECs)分为对照组、200μg/L重组人表皮生长因子处理的阳性对照组与100μg/mL hADSC-Exo处理的hADSC-Exo组,通过CCK-8、划痕实验、血管形成实验,检测hMECs增殖、迁移与血管形成能力。60只大鼠随机分为对照组、阳性对照组、hADSC组与hADSC-Exo组,每组15只。所有大鼠于背部制备全层皮肤缺损创面,每组分别于大鼠尾静脉注射200μL 1×PBS、100μg/kg重组人表皮生长因子、200μL约含1×10^(6)个hADSC的1×PBS、200μL含200μg hADSC-Exo的1×PBS。每组随机保留3只大鼠,分别于0、3、7、10、12 d拍摄创面图像并计算创面面积。每组其余大鼠随机分为4组,每组3只,分别于3、7、10、12 d采集未愈合创面组织并制成石蜡切片,HE、Masson染色观察创面愈合情况,免疫组化检测炎症与创面愈合相关蛋白表达情况。结果细胞实验结果显示,与对照组相比,阳性对照组、hADSC-Exo组细胞增殖活性、细胞迁移率升高(P<0.05),管腔长度与分支点数量增加(P<0.05);与阳性对照组相比,hADSC-Exo组细胞增殖活性、细胞迁移率进一步升高(P<0.05),管腔长度与分支点数量进一步增加(P<0.05)。动物试验结果显示,与对照组相比,阳性对照组、hADSC组与hADSC-Exo组皮肤创面愈合率、CD206、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、CollagenⅢ、水通道蛋白3(AQP3)表达水平升高(P<0.05),肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、CD68、角蛋白1(KRT1)表达水平与CollagenⅠ/CollagenⅢ比例下降(P<0.05),新生表皮组织更为完整,厚度增加,表皮下可见成纤维细胞增殖,创面新生胶原沉积明显增加;与阳性对照组相比,hADSC组与hADSC-Exo组CD206、CollagenⅠ、CollagenⅢ、AQP3表达水平进一步升高(P<0.05),TNF-α、IL-6、CD68、KRT1表达水平进一步下降(P<0.05)。结论hADSC-Exo能够增强hMECs增殖、迁移、血管生成能力,降低创面炎症反应水平,促进创面细胞增殖、胶原重塑,加速创面愈合,具有成为皮肤创伤治疗药物的潜力。

肿瘤标志物检测的临床应用价值分析

目的:分析肿瘤标志物检测的应用价值。方法:将2022年1月—2023年5月烟台市烟台山医院收治的恶性肿瘤患者47例纳入观察组;将同期体检健康者47例纳入对照组。对两组对象肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(ATP)、糖类抗原199(CA199)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原153(CA153)]实施化学发光免疫法检验,并对结果进行对比分析。结果:观察组CEA、AFP、CA199、CA125、CA153检测水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。各项肿瘤标志物在不同类型恶性肿瘤疾病中的阳性检出率不同,肝癌患者AFP阳性检出率高于CEA、CA125、CA153,肠癌患者CEA阳性检出率高于AFP、CA199、CA125、CA153,差异均有统计学意义(P<0.05);在乳腺癌、卵巢癌及其他肿瘤诊断中,各项肿瘤标志物阳性检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:采用化学发光免疫法检测肿瘤标志物用于临床相关肿瘤疾病的诊断,各项指标可联合检测,提升检验准确性。

外源性抗氧化剂对老年全麻术后患者氧化/抗氧化系统的影响

目的研究外源性抗氧化剂还原性谷胱甘肽、维生素C对老年全麻术后患者围术期氧化/抗氧化系统的影响。方法选择老年胸腹部全麻术后患者33例,随机分为2组,对照组予常规治疗;治疗组在常规治疗基础上加用抗氧化剂还原性谷胱甘肽和维生素C。比较2组麻醉诱导前、术后即刻、术后6、12及18h动脉血中超氧化物歧化酶(SOD)、硒谷胱甘肽过氧化物酶(SeGSH-Px)、丙二醛(MDA)和羟自由基(.OH)水平。结果两组.OH水平术后较术前显著升高,治疗组.OH在术后6h始显著下降,与对照组有显著性差异(P<0.005);两组SeGSHPx水平术前较术后显著下降,治疗组SeGSHPx水平较对照组提前恢复(P<0.005)。两组SOD、MDA水平较术前有所下降,但差异无显著性。结论外源性抗氧化剂有助于体内抗氧化酶的恢复,有利于清除高氧诱导的氧自由基。

818例自身免疫病抗ENA抗体与抗核抗体的对照分析

目的比较抗核抗体(ANA)荧光核型与抗可提取性核抗原(ENA)抗体结果之间的相互关系。方法ANA采用间接免疫荧光法检测,抗ENA抗体采用免疫印迹和免疫双扩散法检测,检测结果采用双盲对照比较分析。结果818例抗ENA抗体阳性中ANA的总阳性率97.4%,但有6.4%(8/125)针对分子量60000的SSA抗体和30.0%(3/10)抗Jo-1抗体阳性的标本ANA阴性。抗ENA抗体中抗Sm、U1-RNP抗体阳性时有94.4%(51/54)显示为ANA单纯的斑点型或合并有其他核型;抗SS-A、SS-B抗体阳性时核型较分散,斑点型占75.4%(49/65);抗Scl-70抗体阳性时以核仁型为主,阳性率为68.6%。82例斑点型ANA阳性病例中抗ENA抗体常规6项阳性率为67.1%(55/82)。结论ANA目前作为风湿免疫病的筛查实验还有欠缺,宜与抗ENA抗体同时检测。抗ENA抗体阳性时并非都与ANA斑点核型有关,需具体分析;ANA斑点型阳性时,抗ENA抗体常规项目可以为阴性,可扩大抗ENA抗体的检测范围。

人工关节置换术感染预防与持续改进分析

目的预防性管理措施改进对人工关节转换术术后感染的影响。方法收集山东省烟台市烟台山医院收治的309例施行人工关节置换术的患者，按改进前后时间将患者分为改进前组（94例）和改进后组（215例）。对2组患者术中空气、主刀人员的手、手术护士的手进行细菌采集，观察改进前与改进后的细菌生长情况。结果改进后组空气培养有细菌生长率与改进前组比较，差异有统计学意义[59．5％（128／215）比73．4％（69／94）]（P〈0．05）。空气培养中的细菌有微球菌、棒状杆菌、溶血葡萄球菌、奈瑟菌、柘草芽孢杆菌、黏质沙雷菌。改进后组主刀人员、护士手培养的有细菌菌生长率与改进前组比较，差异有统计学意义[1．9％（4／215）比6．4％（6／94）]（P〈0．05）。空气、主刀人员、护士手细菌培养中的细菌有微球菌、棒状杆菌、溶血葡萄球菌、奈瑟菌、枯草芽胞杆菌、黏质沙雷菌、表皮葡萄球菌、鲍曼不动杆菌。结论加强手术室感染管理，层流设备定期检测消毒，对人工关节置换术后感染的预防起重要作用。

全麻手术对老年患者羟自由基及SOD、GSH-PX水平的影响

目的研究全麻手术对老年患者氧化/抗氧化系统的影响。方法选择胸腹部全麻术后患者50例,分为老年组及非老年组,观察各组麻醉诱导前、术后即刻、术后6h、术后12h、术后18h血清中超氧化物歧化酶(SOD)、硒谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、和羟自由基(.OH)水平。结果两组全麻术后.OH水平均明显升高,SOD、GSH-Px水平下降,P<0.05,组间比较老年组各时段.OH水平较非老年组明显升高,而SOD、GSH-Px水平较非老年组下降,P<0.05。结论老年患者存在氧化/抗氧化失衡,而全麻手术可加重这种失衡状态,术中术后可能应预防性应用抗氧化剂。

烟台高危人乳头瘤病毒宫颈感染的流行病学调查

目的调查烟台地区妇女宫颈感染高危人乳头瘤病毒（HR-HPV）的状况，建立本地区妇女HR-HPV感染的流行病学资料库。方法选取2009年3月至2011年6月在我院妇科门诊就诊的妇女3690例，常规采取宫颈脱落细胞，PCR结合导流杂交技术使基因芯片杂交显色，检测包括13种高危亚型的21种HPv亚型，同时对其中自愿进行阴道镜活检的445例患者取宫颈样本做病理检查。结果3690例患者中，HPV阳性721例，占19．54％，其中HR-HPV622例，占16．86％，HR-HPV感染者中，单一感染426例，多重感染196例，各HR-HPV亚型感染排在前三位的是HPV16（30．06％）、HPV58（17．36％）和HPV52（16．40％），各亚型阳性率和多重感染率差异均有统计学意义（χ2=617．447，P〈0．01；χ2=28．045，P〈0．01）。受检人群根据年龄分为五组：≤20、21。30、31～40、41～50和〉50岁组，各年龄组HR-HPV感染率分别为21．88％、18．67％、15．63％、15．26％、17．05％（χ2=6．692，P〉0．05）；不同季度HR-HPV感染率分别为17-81％、17．05％、16．67％、15．92％（χ2=1．141，P〉0．05）；各病理组HR-HPV亚型以HPV16为主。结论烟台地区妇女HR-HPV感染以HPV16亚型为主，其次为HPV58和HPV52，不同年龄组感染呈双高峰特点，HPV16在宫颈癌的发生中起重要作用。

肺炎支原体黏附蛋白P30的高效表达及初步应用

目的:克隆表达肺炎支原体黏附蛋白P30,为临床诊断试剂和疫苗研制打下基础。方法:采用大肠杆菌优势密码子设计P30蛋白优化基因序列,采用Genscript软件评价设计基因的密码子适应指数(CAI),并利用载体p BVIL1实现P30优势表位基因在大肠杆菌中的表达,采用ELISA法对纯化的P30抗原活性进行测定。结果:野生P30基因的CAI为0.59,优化P30基因的CAI为0.84;在大肠杆菌中表达的IL1-P30融合蛋白的相对分子质量为43.5×103,纯化后的重组抗原能与肺炎支原体感染者血清发生特异性免疫反应,灵敏度和特异性分别为82.35%和89.36%,ROC曲线下面积为0.9088。结论:采用密码子优化技术实现了肺炎支原体黏附蛋白P30在大肠杆菌中的高效表达,获得的重组P30蛋白具有很好的抗原性,可用于肺炎支原体诊断试剂的研究。

138株致肺炎的鲍曼不动杆菌耐药性研究

目的 了解某医院鲍曼不动杆菌的耐药情况,以指导临床合理用药。方法 采用API20NE系统进行细菌鉴定,琼脂扩散法进行药敏试验。结果 从肺部感染患者的疾标本中分离出的138株鲍曼不动杆菌对各类抗菌药物均有不同程度耐药,其中对氨曲南、氨苄西林耐药率达90％以上;对亚胺培南的耐药率最低,为0.7％,其次为头孢哌酮/舒巴坦10.1％,头孢吡肟10.9％,阿米卡星15.2％;头孢他啶和头孢噻肟有不少菌株处于中介范围。结论 鲍曼不动杆菌所致肺炎具多重耐药,治疗困难;应根据药敏结果用药,减少抗菌药物滥用,以免造成严重的医院感染流行。

肺心病患者上呼吸道感染产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的检测

目的检测反复呼吸道感染(RRI)慢性肺心病患者咽拭子培养产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)病原菌,回顾分析其耐药性。方法收集2012年10月至2015年1月于该院就诊的1 098例老年肺心病伴RRI患者咽拭子标本进行培养,用法国生物梅里埃细菌分析软件对患者进行菌株鉴定及药敏试验,结果按美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准判读,并进行统计分析。结果共检出大肠埃希菌197株、肺炎克雷伯菌156株,其中产ESBLs菌株的检出率分别为44.16%、30.77%。产ESBLs菌株较非产ESBLs菌株有更强的耐药性,两者对亚胺培南、哌拉西林/舒巴坦及阿米卡星高度敏感,但对三代以下头孢类抗菌药物呈多重耐药性。结论慢性肺心病合并RRI患者产ESBLs病原菌检出率较高,该类细菌对头孢类抗菌药物呈较高耐药性,依据细菌培养结果及药敏试验进行治疗是治疗成功的关键。

Graves病患者TNFβ基因微卫星多态性分析

为研究Graves病患者(简称GD)TNF(tumornecrosisfactor)β基因内含子1的微卫星多态性(TNFc),应用聚合酶链反应(PCR)技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳分析Graves病实验组和正常对照组的基因频率和基因型频率。结果可见,TNFc微卫星多态性含有两个等位基因及3种基因型,Graves病实验组的TNFc2基因频率高于正常对照组,有显著性差异(χ2=4.02,P<0.05),TNFc1c1基因型频率在Graves病实验组与正常对照组无显著性差异(χ2=2.72,P>0.05),提示TNFc2等位基因在Graves病的发病中可能起重要作用。