胎鼠纹状体神经干细胞分离培养及鉴定

背景:从胎鼠神经系统的多个部位如大脑半球、海马、皮质、脑室区等可分离出神经干细胞。目的:探讨胚胎大鼠大脑纹状体神经干细胞的取材、分离、培养和鉴定方法,观察神经干细胞增殖、传代和分化的规律。设计、时间及地点:观察性实验,于2008-03/08在烟台毓璜顶医院中心实验室完成。材料:选用普通级健康成年Wistar大鼠12只,按雌雄1∶1比例于每晚6时合笼,次晨检查出阴道栓子(阴道内皮结晶)为妊娠0d。方法:在无菌条件下取孕13d胚胎大鼠脑纹状体组织,用无血清培养技术在体外进行神经干细胞的培养、扩增和传代。分别用抗巢蛋白抗体、抗微管相关蛋白2抗体和抗胶质原纤维酸性蛋白抗体对培养的细胞进行干细胞特性和多分化潜能的免疫组织化学鉴定。主要观察指标:①显微镜下观察细胞生长情况。②神经干细胞分化情况及免疫鉴定。结果:①原代细胞种植后24h可见大量分裂期的神经干细胞,呈对称或不对称分裂,细胞核较大,连续观察可见细胞分裂成2个完全独立的神经干细胞;48h后出现许多由4～10个细胞疏松连接的细胞团;神经干细胞进入快速增殖期5d后出现许多大小不等的细胞集落,即神经球,神经球呈规则的圆球状,细胞排列紧密,表面光滑没有突起。②培养4～6h后悬浮的神经干细胞球逐渐贴壁,大部分细胞分化后胞体呈圆形或椭圆形,具有1个或2个长突起,少量细胞具有多个粗长突起。贴壁分化3d左右,具有1个或2个突起的神经元样细胞逐渐减少,具有多个粗长突起的星形胶质细胞样细胞逐渐增多。悬浮的神经干细胞球经巢蛋白染色呈阳性反应,部分细胞呈微管相关蛋白2和胶质原纤维酸性蛋白染色阳性。结论:从胎鼠纹状体中分离培养的神经干细胞具有自我增殖、自我更新能力,并能分化为神经元及神经胶质细胞。

小儿深Ⅱ度烫伤创面早期采用磨痂术1例

1临床资料 病例:患儿,男性,5岁,因不慎被开水(水温约80℃)烫伤臀部,会阴部,双大腿1h急诊入院.查:神志清,精神不振;体温36℃,心率118次/min,呼吸24次/min,血压11/6kPa,烫伤部位表皮松解起水泡,部分水泡破溃,表皮脱落,基底呈红白相间,渗液少,疼痛不敏感,入院诊断:臀部、会阴部、双大腿烫伤20%深Ⅱ度.

骨髓间充质干细胞移植对Tourette综合征大鼠纹状体脑源性神经营养因子表达的影响

目的考察骨髓间充质干细胞(MSC)移植对Tourette综合征(TS)大鼠纹状体内脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨MSC移植治疗TS的作用机制。方法采用立体定向技术向大鼠纹状体内微量灌注抗基底神经节抗体(ABGA),制备自身免疫TS动物模型;采用密度梯度离心法在体外分离、培养和扩增大鼠MSC,经流式细胞仪鉴定后将MSC标记并移植到TS大鼠纹状体内。通过ELISA及RT-PCR技术检测大鼠脑内BDNF水平。结果将MSC移植到TS大鼠纹状体内,自移植后7d开始观察到TS大鼠的刻板行为减少。TS大鼠纹状体内BDNF水平升高(P<0.05);MSC移植后TS大鼠纹状体内BDNF含量下降。结论 MSC移植能减少TS大鼠的刻板行为、降低TS大鼠体内的BDNF含量。

病理性瘢痕治疗与展望

增殖性瘢痕常发生于深Ⅱ度烧伤自行愈合的部位,此外也见于普通切口缝合后的切缘上.其特点是瘢痕高出皮面,形状不规则,潮红充血,质坚韧,不向周围生长扩张,往往在延续数月或数年以后开始逐渐发生退化,软化变平,颜色转淡.瘢痕疙瘩是一种过度增生的异常瘢痕组织,隆起于皮肤表面,其内有大量胶原和基质成分的沉淀和毛细血管的再生,且向周围正常皮肤浸润,术后易复发,并有永生化倾向[1-2].